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LX-101370
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上海市
48T 1180元 80盒可售
96T 1680元 80盒可售
更新時(shí)間:2025-06-10 09:41:21瀏覽次數(shù):61次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子3(Smad3)ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱:人艱難梭菌毒素B(cdtB)ELISA試劑盒
產(chǎn)品性狀:盒狀液體
產(chǎn)品規(guī)格:96T/盒:zui多可以檢測(cè)90個(gè)樣本;48T/盒:zui多可以檢測(cè)42個(gè)樣本
保存條件:試劑盒2-8℃保存,,樣本-80℃保存,。運(yùn)輸采用干冰或冰袋
技術(shù)要求:請(qǐng)嚴(yán)格按照說明書操作步驟進(jìn)行檢測(cè),操作規(guī)范,、儀器設(shè)備齊全
1.人艱難梭菌毒素B(cdtB)ELISA試劑盒 實(shí)驗(yàn)步驟
使用前將所有試劑置于室溫平衡30分鐘左右,,也可置于37℃溫箱快速回溫至室溫。
注意:酶標(biāo)板未恢復(fù)室溫前,,請(qǐng)勿開封,。
1 | 每孔加入校準(zhǔn)品/待測(cè)樣品50μL,之后每孔再加入一抗抗體50uL,。 |
2 | 蓋上封板膜,,在37℃下孵育60分鐘,或者室溫置于微孔板振蕩器*上震蕩60分鐘,。 |
3 | 洗板5次,,最后一次洗板后棄去殘留洗液,倒扣酶標(biāo)板,,在干凈的吸水紙上拍干,。 |
4 | 每孔加入100μL酶標(biāo)二抗工作液。 |
5 | 蓋上封板膜,,在37℃下孵育30分鐘,,或者室溫置于微孔板振蕩器*上震蕩60分鐘。 |
6 | 洗板5次,,最后一次洗板后棄去殘留洗液,,倒扣酶標(biāo)板,在干凈的吸水紙上拍干,。 |
7 | 每孔加入100μL顯色液 |
8 | 37℃下避光孵育15**分鐘。 |
9 | 每孔加入50μL終止液,。 |
10 | 使用酶標(biāo)儀在450nm檢測(cè)波長(zhǎng)及620~690nm參比波長(zhǎng)條件下測(cè)定吸光度值,,如果沒有參比波長(zhǎng)則僅選擇450nm波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)。如果最高濃度校準(zhǔn)品OD值過高,,應(yīng)立即在405/630nm雙波長(zhǎng)條件下檢測(cè),。 |
2.樣品采集、預(yù)處理及儲(chǔ)存
下面列出的樣品收集和儲(chǔ)存條件旨在作為一般性指導(dǎo),,不同類型樣品的儲(chǔ)存,、使用穩(wěn)定性尚未評(píng)估,。
· 血清:使用血清采集管采集全血,室溫靜置待血細(xì)胞凝集后取的血清,,或直接在1000×g下離心15分鐘取得血清,。操作應(yīng)柔和,避免溶血發(fā)生,。獲取的血清應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢測(cè),,如不能及時(shí)進(jìn)行檢測(cè),應(yīng)等分為多份,,儲(chǔ)存在-20℃及以下溫度條件,,儲(chǔ)存時(shí)間不超過6個(gè)月,冷凍儲(chǔ)存血清樣品凍融不超過2次,。血清樣品建議2倍以上稀釋,,例如:50μL樣品+50μL的1×通用稀釋液,稀釋后的血清樣本可在2~8℃儲(chǔ)存不超過8小時(shí),。建議選取1~2份樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳稀釋度,。
血漿:使用EDTA或肝素采血guan收集血漿。全血采集后以1000×g離心15分鐘取得血漿,。操作應(yīng)柔和,,避免溶血發(fā)生。獲取的血漿應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢測(cè),,如不能及時(shí)進(jìn)行檢測(cè),,應(yīng)等分為多份,儲(chǔ)存在-20℃及以下溫度條件,,儲(chǔ)存時(shí)間不超過6個(gè)月,,冷凍儲(chǔ)存血漿樣品凍融不超過2次。血漿樣品建議2倍以上稀釋,,例如:50μL樣品+50μL的1×通用稀釋液,,稀釋后的血清樣本可在2~8℃儲(chǔ)存不超過8小時(shí)。建議取1~2份樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳稀釋度,。
· 結(jié)果計(jì)算
建議使用以下方式進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合:
l 四參數(shù)邏輯(4-P)曲線擬合:以濃度值為橫坐標(biāo),,吸光度值為縱坐標(biāo);
建議使用專業(yè)化軟件進(jìn)行結(jié)果擬合和計(jì)算,,如ELISACALC,、SPSS、Graphpad Prism等,。示例數(shù)據(jù)
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1. 注意事項(xiàng)
· 試劑盒內(nèi)所有成分僅供研究使用,!
· 終止液含稀硫酸,,具有腐蝕性,,應(yīng)謹(jǐn)慎操作。
· 試劑盒成分含防腐劑,、蛋白成分等,,可能引起皮膚過敏反應(yīng),應(yīng)佩帶口罩避免吸入薄霧,。
· 顯色劑,、濃縮洗液可能引起皮膚、眼睛和呼吸道刺激,,應(yīng)佩帶口罩避免吸入薄霧,。
· 佩戴防護(hù)手套、眼睛和面部防護(hù)用品,,實(shí)驗(yàn)操作后洗手,。
2. 技術(shù)要點(diǎn)
· 不同批次的試劑盒不能混用,不建議將不同板上的微孔板條組裝在一塊板上檢測(cè),,盡管是同一批次試劑,,也可能存在板與板之間的差異。
· 每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)當(dāng)始終配制標(biāo)準(zhǔn)曲線平行檢測(cè),,不能將上一次的標(biāo)準(zhǔn)曲線用于下一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算,。
· 不要使用超過有效期的試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。
· 底物顯色劑應(yīng)當(dāng)為無色,,如變藍(lán)表明已變質(zhì),,不能應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)。
· 使用適當(dāng)?shù)姆獍迥っ芊馕⒖装鍡l,,以便檢測(cè)結(jié)果更加可靠,。
· 操作時(shí)盡量避免產(chǎn)生氣泡。不要將不同試劑瓶的瓶蓋交叉使用,。
· 應(yīng)當(dāng)遵循說明書的操作進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,不按照說明書的操作將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的變化,任何不遵循說明書的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)當(dāng)事先詢問售后技術(shù)支持的建議,。否則我們不保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠,。
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