膠滲透色譜系統(tǒng)正是為此目的而設(shè)計(jì)的一種高效,、精確的分離技術(shù)。本文將詳細(xì)介紹膠滲透色譜系統(tǒng)的基本原理,、特點(diǎn)以及其在各個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用,。
膠滲透色譜,又稱凝膠滲透色譜或體積排阻色譜,,是一種基于分子大小差異進(jìn)行分離的色譜技術(shù),。它利用具有多孔結(jié)構(gòu)的凝膠作為固定相,通過(guò)不同大小的分子在凝膠中的滲透和擴(kuò)散行為差異,,實(shí)現(xiàn)混合物的分離,。在膠滲透色譜系統(tǒng)中,樣品溶液在高壓泵的作用下通過(guò)色譜柱,,其中的組分根據(jù)分子量大小被分離出來(lái),,最終由檢測(cè)器進(jìn)行定量和定性分析。
膠滲透色譜的分離原理主要基于兩個(gè)效應(yīng):分子篩效應(yīng)和擴(kuò)散效應(yīng),。分子篩效應(yīng)是指大分子不能進(jìn)入凝膠顆粒的小孔中,只能分布在顆粒之間,,較早地通過(guò)色譜柱,,而小分子可以進(jìn)入凝膠顆粒的小孔中,較晚地流出色譜柱,。擴(kuò)散效應(yīng)則是指分子在凝膠中的擴(kuò)散速度不同,,大分子擴(kuò)散速度慢,小分子擴(kuò)散速度快,從而實(shí)現(xiàn)了不同大小分子的分離,。
在膠滲透色譜過(guò)程中,,樣品溶液中的分子首先進(jìn)入色譜柱的凝膠顆粒內(nèi)部。對(duì)于小于凝膠孔徑的分子,,它們可以自由地進(jìn)入凝膠顆粒的孔道中,,并在其中進(jìn)行擴(kuò)散。而對(duì)于大于凝膠孔徑的分子,,它們則無(wú)法進(jìn)入孔道,,只能在凝膠顆粒之間流動(dòng)。隨著流動(dòng)相的移動(dòng),,分子逐漸從色譜柱中流出,,并根據(jù)其分子量大小形成不同的色譜峰。
膠滲透色譜系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于高分子材料的分子量測(cè)定,、分子量分布分析以及聚合反應(yīng)過(guò)程監(jiān)控等方面,。此外,在生物科學(xué)領(lǐng)域,,膠滲透色譜也被用于蛋白質(zhì),、多肽、核酸等生物大分子的分離和分析,。由于其高效,、準(zhǔn)確的分離能力,膠滲透色譜已成為化學(xué),、生物及材料科學(xué)等領(lǐng)域中重要的分析工具,。