高效液相色譜儀的應(yīng)用
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,,流動相可選擇的范圍寬,,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的,、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì),。
與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC 所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,,使分離和同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離,。
HPLC成為解決生化分析問題*有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率,、高靈敏度,、速度快,、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點,,因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué),、食品分析、醫(yī)藥研究,、環(huán)境分析,、無機分析等各種領(lǐng)域,。高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向,。
液相色譜- 質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等; 液相色譜- 紅外光譜連用也發(fā)展很快,,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展,。
使用注意事項:
1)流動相均需色譜純度,,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡,。
2)柱子是非常脆弱的,,**次做的方法,先不要讓液體過柱子,。
3)所有過柱子的液體均需嚴(yán)格的過濾,。
4)壓力不能太大,*好不要超過150kgf/cm2 .
5).因為緩沖試劑遇有機溶劑,,會結(jié)晶,,有損色譜柱,所以,,每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清洗,。