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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

革 蘭 氏 陰 性 細(xì) 菌 （ 如 大 腸 桿 菌 ） 的 細(xì) 胞 表 面 的 結(jié) 構(gòu) 成 分 LPS（lipopolysaccharides,，脂多糖）就是內(nèi)毒素，因此純化的革蘭氏陰性細(xì)菌基因組 DNA 和質(zhì)粒 DNA 中幾乎都有內(nèi)毒素污染,。內(nèi)毒素對(duì)原代細(xì)胞,、傳代細(xì)胞和整體動(dòng)物均具有顯著的毒性作用，這也是為何被叫做內(nèi)毒素的原因,。因此去除DNA 樣本中的內(nèi)毒素具有重要的意義,，本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)用于高效去除 DNA 樣品中的內(nèi)毒素污染的試劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.簡(jiǎn)單快速,，一次處理只需要 30 分鐘左右,，不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。

2.高效,，一次處理可以去除 90%以上的內(nèi)毒素,，經(jīng)過(guò)三次重復(fù)抽提可將內(nèi)毒素的水平降低到 0.2 EU (Endotoxin Unit，約 0.1 ng LPS)/mL 以下,。

3.不影響 DNA 的活性和完整性,，處理過(guò)的 DNA 可以直接用于活體細(xì)胞科研或活體生物科研，也可以用于常規(guī)的分子生物學(xué)研究,。

4.適用范圍廣,，可用于處理各種來(lái)源的 DNA（基因組 DNA 和質(zhì)粒 DNA）和各種形狀的 DNA（單鏈和雙鏈，線狀和環(huán)狀）,。

5.既可小規(guī)模使用（在 1.5 mL 離心管內(nèi)）,，也可放量使用。

6.本產(chǎn)品提供的試劑足夠進(jìn)行 50 次處理（每次處理 300 ?L 樣本,，每個(gè)樣本處理三次）,。

7.DNA 溶液內(nèi)毒素清除劑只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝

DNA 溶液內(nèi)毒素清除溶液 A1.5 mL1.5 mL 白蓋管

DNA 溶液內(nèi)毒素清除溶液 B1.5 mL1.5 mL 藍(lán)蓋管

使用手冊(cè)1 份無(wú)

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸和保存,，有效期兩年,。

自備試劑

TE、無(wú)水乙醇,、75%乙醇,。

使用方法：

一：微量處理（用于體積小于 300 ?L 樣品）

1. 在一干凈的 1.5 mL 的塑料離心管中加入濃度在 0.1-1 ?g/?L 的 300 ?L 的待處理 DNA 樣品（來(lái)于基因組 DNA 提取和質(zhì)粒 DNA 提取）,。如果體積不足 300 ?L,，可以用自備的 TE 補(bǔ)足到 300 ?L。如果濃度不到此范圍,，可以

用本公司的核酸濃縮劑濃縮或乙醇沉淀后再用小體積 TE 溶解,。

2.加入 30 ?L DNA 溶液內(nèi)毒素清除溶液 A,。

3.加入 10 ?L DNA 溶液內(nèi)毒素清除溶液 B，渦旋振蕩器充分震蕩 1 分鐘混勻,。

4.臺(tái)式搖床上室溫?fù)u晃 20 分鐘,。

5.再放置到金屬浴上 50℃保溫 10 分鐘。

6.臺(tái)式離心機(jī)室溫 13000-15000×g 離心 3 分鐘,，離心后上層為無(wú)色透明,， 下層為淡藍(lán)色。注意：此步不能低溫離心,。

7.小心將上清（含 DNA）轉(zhuǎn)移到新的離心管中,，注意不要吸取下層（含內(nèi)毒素）的液體。

8.此上清液就是去除內(nèi)毒素后的 DNA 溶液,，留樣少許,，剩下的樣品可以重復(fù)3-7 步兩次，最后比較三次處理得到的 DNA 溶液的殘留內(nèi)毒素含量,，并據(jù)此確定今后處理此類(lèi) DNA 溶液所需要的抽提次數(shù),。一般對(duì)內(nèi)毒素污染嚴(yán)重的 DNA 溶液（含 1000 EU 左右的），需要抽提三次,。如果起始含量低的,，可能只需要一次。

9.加入自備的兩倍體積的無(wú)水乙醇,，混勻后 13000-15000×g 離心 5 分鐘,。

10.小心吸棄上清。

11.加入 1mL 自備的 75%乙醇,，顛倒 3 次,。12. 13000-15000×g 離心 2 分鐘。

13. 小心吸棄上清,。

14. 13000-15000×g 離心 10 秒,。

15.小心吸棄殘留上清（約 50 ?L）。

16.加入適量的 TE 溶解 DNA 沉淀,。

17.測(cè)試殘留內(nèi)毒素的含量,。如果內(nèi)毒素含量已經(jīng)減低到可以接收的水平，則可將 DNA 溶液用于各種后續(xù)實(shí)驗(yàn),，包括酶切電泳，活性檢測(cè),，處理培養(yǎng)細(xì)胞,， 打入活體實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等。注意：本產(chǎn)品只能用于科研,，故不能將得到的 DNA 打入人體,。

二：用于體積大于 500 ?L 的 DNA 樣品

18.整個(gè)操作同上,，只是在 15 或 50 mL 塑料離心管中進(jìn)行，離心速度不能超過(guò)離心管的承受力,。

選擇我們的DNA 溶液內(nèi)毒素清除劑,，就是選擇精準(zhǔn)、高效,、可靠的檢測(cè)方案,，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！