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產(chǎn)品簡介：

4×LAMP MasterMix 含有 LAMP 擴(kuò)增所需的所有成分，可以用于 LAMP 等溫?cái)U(kuò)增,。LAMP 即 Loop-Mediated Isothermal Amplification（環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增）,，它利用 4 條模板專一的特異引物和具有鏈置換能力的 Bst DNA 聚合酶 2.0(8 U/μL)，在等溫條件下(65℃左右) 30－60 分鐘完成 LAMP 擴(kuò)增,。該技術(shù)在靈敏度,、特異性和檢測(cè)范圍等指標(biāo)上能媲美甚至優(yōu)于定性 PCR 技術(shù)，同時(shí)還不需要昂貴的儀器設(shè)備,。目前已成功應(yīng)用于生物的快速檢測(cè),，廣泛用于各個(gè)領(lǐng)域。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.即開即用,，含有紅色電泳示蹤劑,，擴(kuò)增后可以直接上樣，不需要上樣液,。

2.4×濃度,，提供更多的加樣品的空間，可以增加檢測(cè)機(jī)率,。

3.高特異性,，精心優(yōu)化的配方，非特異擴(kuò)增比自配的試劑更低,。

4.高擴(kuò)增效率,，一般比PCR 靈敏一個(gè)數(shù)量級(jí)。

5.65℃左右等溫?cái)U(kuò)增,，不需要貴重儀器,。

6.本試劑盒足夠 50 次 20 μL 體系的 LAMP 擴(kuò)增。

7.提供擴(kuò)增對(duì)照,，便于在遇到困難時(shí)分析原因,。

8.4×LAMP MasterMix（電泳法）只能用于科研,，不能用于臨床。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成分規(guī)格包裝

4×LAMP MasterMix

（含電泳示蹤劑,，待加酶）200 μL0.5 mL 白蓋管

Bst DNA 聚合酶 2.0(8 U/μL)50 μL0.5 mL 紅蓋管

陽性對(duì)照模板-引物混合物50 μL0.5 mL 藍(lán)蓋管

使用手冊(cè)1 份無

保存和運(yùn)輸

低溫運(yùn)輸,，-20℃保存，有效期一年,。

自備試劑

DNA 模板,、LAMP 引物

使用方法：

1.制備模板DNA：用于選用合適的方法制備模板DNA。如果有N個(gè)樣品,，最好設(shè)置N+2個(gè)樣品制備,，多出的兩個(gè)一個(gè)是樣品制備陽性對(duì)照，一個(gè)是樣品制備陰性對(duì)照,。

2.配制5×LAMP引物混合液

先加超純水將合成的HPLC級(jí)別的下列引物干粉稀釋到下表所標(biāo)注的母液 濃度,，然后在一新的離心管中按表中所列體積加入各種引物母液和超純水，最后得到1 mL的5×LAMP引物混合液,，此混合液足夠250次20 μL體系的 LAMP擴(kuò)增,。如果需要配制的5×LAMP引物混合液體積異于1  mL，則各成分的用量請(qǐng)按比例調(diào)整,。引物混合液可以在-20℃放置2年。

注：如果沒有Loop引物,，則用超純水補(bǔ)足其體積,。

3.在冰上融化4×LAMP MasterMix（待加酶），混勻,，稍離心,。第一次使用時(shí)， 請(qǐng)將50 μ L Bst DNA 聚合酶2.0(8 U/ μ L) 全部加入到4 × LAMP MasterMix中并輕柔混勻至少1分鐘,，然后再使用,。如果有N個(gè)樣品，則在 N+2個(gè)反應(yīng)管中加入以下組份,，多出的一管是LAMP擴(kuò)增陽性對(duì)照（PC）,， 一管是LAMP擴(kuò)增陰性對(duì)照（NC）：

4.混勻，置于65℃保溫60分鐘,。如果是在PCR儀中保溫,，必須加熱蓋。如果用金屬浴或水浴保溫,，沒有熱蓋,，必須覆蓋50 μL的自備石蠟油，否則保溫期間反應(yīng)體系的水分會(huì)蒸發(fā),，會(huì)嚴(yán)重影響反應(yīng)效率,。

5.擴(kuò)增結(jié)束后取5-10 μL擴(kuò)增產(chǎn)物直接上樣（本產(chǎn)品含有紅色電泳示蹤劑,，不需要再加上樣液，紅色示蹤劑的泳動(dòng)速度相當(dāng)于50 bp的DNA）進(jìn)行2-3% 的瓊脂糖凝膠電泳,，有LAMP擴(kuò)增的樣品將可見LAMP特征性DNA梯度電泳

6. 結(jié)果分析：如果本試劑盒提供的陽性對(duì)照-引物混合物能夠擴(kuò)增而陰性對(duì)照不能擴(kuò)出,，則實(shí)驗(yàn)有效。如果陽性對(duì)照-引物混合物沒有擴(kuò)增出條帶,，則試劑盒的問題,，請(qǐng)跟廠家聯(lián)系。如果陰性對(duì)照（水作為模板）有擴(kuò)增出條帶,， 則說明LAMP樣品或試劑有過去的擴(kuò)增產(chǎn)物的污染,，需要注意操作的規(guī)范 性，如果不能解決,，可以重新設(shè)計(jì)LAMP引物擴(kuò)增新的靶片段,。

選擇我們的4×LAMP MasterMix（電泳法），就是選擇精準(zhǔn),、高效,、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,！