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產(chǎn)品簡介：

流行性感冒（流感）是一種傳染性強(qiáng)的病毒性疾病,，也是人類呼吸道疾病的重要病因。2009 年發(fā)生的新型甲型 H1N1 流感大流行，波及了全球 66 個(gè)國家,，這種流感病毒是由人流感、禽-流感和豬流感的病毒基因組重組形成的,。2010 年 8 月,，世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO） 宣布 2009 年甲型 H1N1 流感大流行結(jié)束,。然而,，2009 新型甲型 H1N1 流感病毒已成為季節(jié)性流感在世界范圍內(nèi)持續(xù)傳播，并造成不同程度的暴發(fā)流行,。

本試劑盒適用于檢測標(biāo)本中的甲型流感病毒 H1N1,，適用于甲型流感病毒 H1N1 感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

一,、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量，讓您的檢測結(jié)果更可信,。

二,、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度,，能夠檢測到極微量的甲型流感病毒H1N1亞型核酸,，不放過任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn),。

三、便捷操作

綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結(jié)果分析，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手,。

四、多樣的檢測驗(yàn)證樣本

該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗(yàn)證,，適用于喉氣管,、腦、胸肌,、心肌和肺等組織,；待檢活禽，用棉拭子取呼吸道分泌物或排泄物等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求,。

五、個(gè)性化定制服務(wù)

專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù),，根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,，為您提供更貼合實(shí)際的檢測方案。

六,、豐富的產(chǎn)品線

除了甲型流感病毒H1N1亞型(IAV-H1N1)PCR試劑盒,，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領(lǐng)域的檢測需求,。

七,、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì)，在您購買前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,，讓您無后顧之憂。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。

檢測方法

實(shí)時(shí)熒光PCR，具有快速,、準(zhǔn)確,、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。

適用儀器

ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。

標(biāo)本采集

病死或撲殺禽，取喉氣管,、腦,、胸肌、心肌和肺等組織,；待檢活禽,，用棉拭子取呼吸道分泌物或排泄物， 置于 1mL 50%甘油生理鹽水中,。

保存和運(yùn)輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過 24 h,；若需長期保存，應(yīng)放置-70℃以下保存,，凍融不超過 3 次,。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

每份組織分別從 3 個(gè)不同的位置稱取樣品約 1g，手術(shù)-剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min,，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中,；棉拭子直接取 100μL 提取。

1.2核酸提取

推薦采用公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進(jìn)行核酸提取,， 請按照試劑說明書進(jìn)行操作,。

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,，多配制 1 份)，每測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑IAV -H1N1 反應(yīng)液酶液

用量19μL1μL

將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,，20μL/管,。

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的核酸、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 5μL,，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋,，混勻,， 短暫離心。

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi),；

4.2設(shè)置好通道,、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL,；熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM,、ROX,， 淬滅通道（Quencher Dye）選擇 NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,，選擇 None 即可,。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間收集熒光信號

11 cycle50℃10min否

21 cycle95℃2min否

345 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定（請參照各儀器使用說明書進(jìn)行設(shè)置，以分析 ABI7500 儀器為例）

反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果,，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整，Start 值可設(shè)在 3～15,、End 值可設(shè)在 5～20,，使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期，陰性質(zhì)控品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線）,，點(diǎn)擊 Analyze 自動(dòng)獲得分析結(jié)果,。

5.2結(jié)果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,； 陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>40 或無 Ct 值,。

5.3質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無特異性擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示；

陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長期,，且 Ct 值≤32,； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無效,。

6.檢測方法的局限性

1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集,、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān),；

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

3.陽性對照,、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,，會導(dǎo)致假陽性結(jié)果；

4.病原體在流行過程中基因突變,、重組,，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果,；

6.試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果,；

7.本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

注意事項(xiàng)：

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,，完-全混勻并短暫離心；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存,；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊,；

5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理,、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染,；

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理,。

9.本產(chǎn)品僅供科研,。

選擇我們的甲型流感病毒H1N1亞型(IAV-H1N1)PCR試劑盒，就是選擇精準(zhǔn),、高效,、可靠的檢測方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,！