目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T2型脊髓灰質炎病毒(PV-2)熒光PCR檢測試劑盒
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-0558 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Poliovirus 2 Detection Kit |
| 保存條件 | -20℃±5℃，避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產品簡介：
脊髓灰質炎（脊灰）是由脊灰病毒引起的一種急性傳染病,，主要感染五歲以下兒童,。病毒主要通過糞便-口腔途徑在人與人之間傳播，或者不太常見的是通過普通媒介（如受污染的水或食物）傳播,，并在腸道中繁殖,， 可以侵入神經系統(tǒng)并導致癱瘓。臨床表現主要有發(fā)熱,、咽痛和肢體疼痛等,，部分病人可發(fā)生弛緩性麻痹。脊髓灰質炎通常是由天然存在的野生型脊髓灰質炎病毒引起的,，包括 1 型,、2 型、3 型三種血清型,。
本試劑盒適用于檢測標本中的 2 型脊髓灰質炎病毒RNA,，適用于 2 型脊髓灰質炎病毒感染的輔助診斷及流行病學調查，其檢測結果僅供參考,。
產品特點：
一,、嚴格的質控體系
所有試劑盒從原料到成品都經過嚴格的質量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量,，讓您的檢測結果更可信,。
二、高靈敏度
產品經過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度,，能夠檢測到極微量的2型脊髓灰質炎病毒核酸，不放過任何潛在的感染風險,。
三,、便捷操作
綜合各項指標特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結果分析,，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手,。
四,、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經過多種樣本的檢測驗證，適用于咽部分泌物,、糞便等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求。
五,、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,，根據您的特殊需求進行產品優(yōu)化和調整，為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六,、豐富的產品線
除了2型脊髓灰質炎病毒(PV-2)熒光PCR檢測試劑盒,，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領域的檢測需求,。
七,、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊，在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,，讓您無后顧之憂。
產品參數：
產品規(guī)格
50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。
檢測方法
實時熒光PCR，具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。
標本采集
咽-拭子標本：用采樣拭子蘸取咽部分泌物，放入無菌采樣管中(含 0.4ml 滅菌生理鹽水) 糞便:用采樣拭子蘸取糞便或腹瀉物置入無菌采樣管中(含 0.4ml 滅菌生理鹽水)
保存和運輸
制備的樣本在 2℃～8℃條件下保存應不超過 24 h,，若需長期保存應置-70℃以下,，但應避免反復凍融（凍融不超過 3 次）。
使用方法：
1.樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
將拭子充分震蕩混勻取上清作為核酸檢測材料,。
1.2核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產的核酸-提取試劑（離心柱法）進行核酸提取,，請按照試劑說明書 進行操作。
2.試劑配制（試劑準備區(qū)）
根據待檢測樣本總數,，設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；反應管數每滿 10 份，多配制 1 份),，每測試反應體系配制如下表：
試劑PV-2 反應液酶液
用量19μL1μL
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，20μL /管。
3.加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的核酸,、陽性質控品,、陰性質控品各取 5μL，分別加入相應的反應管中,，蓋好管蓋,，混勻,， 短暫離心,。
4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內,；
4.2設置好通道、樣品信息,，反應體系設置為 25μL,；熒光通道選擇：
檢測通道（ReporterDye）FAM，淬滅通道（QuencherDye）NONE,，光,。ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光， 選擇 None 即可,。
4.3推薦循環(huán)參數設置：
步驟循環(huán)數溫度時間收集熒光信號
11 cycle50℃10min否
21 cycle95℃2min否
345 cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結果分析判定
5.1結果分析條件設定（請參照各儀器使用說明書進行設置,，以分析 ABI7500 儀器為例）
反應結束后自動保存結果，根據分析后圖像調節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據實際情況自行調整,，Start 值可設在 3～15、End 值可設在 5～20,，使閾值線位于擴增曲線指數期,，陰性質控品的擴增曲線平直或低于閾值線），點擊 Analyze 自動獲得分析結果,。
5.2結果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤40,，且曲線有明顯的指數增長曲線； 陰性：樣本檢測結果無 Ct 值,，且無特異性擴增曲線,；
可疑：樣本檢測結果 40＜Ct 值≤45，建議重復檢測,，如果檢測通道仍為 40<Ct 值≤45,，且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性,，否則為陰性,。
5.3質控標準
陰性質控品：無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示；
陽性質控品：擴增曲線有明顯指數增長期,，且 Ct 值≤32,； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效,。
6.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結果與樣本收集,、處理、運送以及保存質量有關,；
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,，會出現假陽性結果；
3.陽性對照,、擴增產物泄漏,，會導致假陽性結果,；
4.病原體在流行過程中基因突變、重組,，會導致假陰性結果,；
5.不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果,；
6.試劑運輸,，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果,；
7.本檢測結果僅供參考,，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。
注意事項：
1.所有操作嚴格按照說明書進行,；
2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化,，完-全混勻并短暫離心；
3.反應液應避光保存,；
4.反應中盡量避免氣泡存在,，管蓋需蓋緊；
5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；
6.樣本處理、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進行,，以免交叉污染；
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,；
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。
9.本產品僅供科研,。
選擇我們的2型脊髓灰質炎病毒(PV-2)熒光PCR檢測試劑盒,，就是選擇精準、高效,、可靠的檢測方案,，為您的科研實驗保駕護航！
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