目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T犬副流感病毒(CPiV)熒光PCR檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
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貨號 | XY-D-0382 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Canine parainfluenza virus Detection Kit |
保存條件 | -20℃±5℃,,避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介:
犬副流感是由犬副流感病毒(Canine parainfluenza virus,,CPiV)引起的犬的一種以咳嗽,、流涕、發(fā)熱為特征的呼吸道傳染病。CPiV 是仔犬咳嗽的病原之一,,主要感染幼犬,,發(fā)病急,傳播快,。
本試劑盒適用于檢測犬鼻-拭子,、口咽-拭子中犬副流感病毒 (CPiV)的 RNA,適用于犬副流感病毒 (CPiV)的輔助診斷,。
產(chǎn)品特點:
一,、嚴格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,,讓您的檢測結(jié)果更可信,。
二、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,,具有出色的靈敏度,,能夠檢測到極微量的犬副流感病毒核酸,不放過任何潛在的感染風險,。
三,、便捷操作
綜合各項指標特性,研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結(jié)果分析,,每一步都有清晰的操作指南,即使是新手也能輕松上手,。
四,、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,適用于鼻-拭子,、口咽-拭子等多種常見樣本,,滿足不同的檢測需求。
五,、個性化定制服務(wù)
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務(wù),,根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六,、豐富的產(chǎn)品線
除了犬副流感病毒(CPiV)熒光PCR檢測試劑盒,我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,,滿足您在不同領(lǐng)域的檢測需求,。
七、完善的售前售后服務(wù)
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團隊,,在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持,,購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,,讓您無后顧之憂。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,,可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。
檢測方法
實時熒光PCR,具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。
標本采集
鼻-拭子、口咽-拭子:取無菌拭子,,插入寵物鼻腔或口腔至咽的后部直達喉氣管,,輕輕擦拭并慢慢旋轉(zhuǎn) 2圈~3 圈,沾取鼻腔分泌物或氣管分泌物取出后放入保存管中,。
保存和運輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過 24 h,;若需長期保存,應(yīng)放置-70℃以下保存,,凍融不超過 3 次,。
使用方法:
1.樣本處理(樣本處理區(qū))
1.1樣本前處理
拭子樣本:將棉拭子樣本置于 1.5mL 離心管中;加入 1mL 生理鹽水,,生理鹽水以沒過棉簽頭為宜,浸泡并震蕩 1 分鐘,,離心取上清液用于核酸提取,。
1.2核酸提取
采用商品化試劑盒,按照試劑盒說明書進行操作,。
2.試劑配制(試劑準備區(qū))
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),,設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,,多配制 1 份),,每測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑CPiV 反應(yīng)液酶液
用量(樣本數(shù)為 N)19μL1μL
將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,20μL/管,。
3.加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的核酸,、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 5μL,,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,,蓋好管蓋,混勻, 短暫離心,。
4.PCR 擴增(核酸擴增區(qū))
4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi),;
4.2設(shè)置好通道、樣品信息,,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL,;
熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM,淬滅通道(Quencher Dye)NONE,,ABI 系列儀器請勿選擇
ROX 參比熒光,,選擇 None 即可。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號
11 cycle50℃10min否
21 cycle95℃2min否
345cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設(shè)定(請參照各儀器使用說明書進行設(shè)置,,以分析 ABI7500 儀器為例)
反應(yīng)結(jié)束后自動保存結(jié)果,,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶可根據(jù)實際情況自行調(diào)整,,Start 值可設(shè)在 3~15,、End 值可設(shè)在 5~20,使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期,,陰性質(zhì)控品的擴增曲線平直或低于閾值線),,點擊 Analyze 自動獲得分析結(jié)果。
5.2結(jié)果判斷
陽性:檢測通道 Ct 值≤40,,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,; 陰性:樣本檢測結(jié)果無 Ct 值,且無特異性擴增曲線,;
可疑:樣本檢測結(jié)果 40<Ct 值≤45,,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 40<Ct 值≤45,,且曲線有明顯的增長曲線,,判定為陽性,否則為陰性,。
5.3質(zhì)控標準
陰性質(zhì)控品:無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示,;
陽性質(zhì)控品:擴增曲線有明顯指數(shù)增長期,且 Ct 值≤32,; 以上條件應(yīng)同時滿足,,否則實驗視為無效。
6.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集,、處理,、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,;
3.陽性對照,、擴增產(chǎn)物泄漏,會導致假陽性結(jié)果,;
4.病原體在流行過程中基因突變,、重組,會導致假陰性結(jié)果,;
5.不同的提取方法存在提取效率差異,,會導致假陰性結(jié)果;
6.試劑運輸,,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果;
7.本檢測結(jié)果僅供參考,,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。
注意事項:
1.所有操作嚴格按照說明書進行;
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,,完-全混勻并短暫離心,;
3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,,管蓋需蓋緊,;
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服,;
6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,,以免交叉污染,;
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;
8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,,并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研。
選擇我們的犬副流感病毒(CPiV)熒光PCR檢測試劑盒,,就是選擇精準,、高效,、可靠的檢測方案,,為您的科研實驗保駕護航!