目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T豬囊尾蚴?。–c)熒光PCR檢測試劑盒
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
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貨號 | XY-D-0322 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Cysticercus cellulosae (Cc) Nucleic Acid Detection |
保存條件 | -20℃±5℃,,避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產品簡介:
豬囊尾蚴病(porcine cysticercosis)是由豬帶絳蟲(Taenia solium)的幼蟲所引起的一種危害嚴重的人獸共患寄生蟲病,。世界動物衛(wèi)生組織將該病列為需申報的疾病之一,。目前,該病廣泛存在于發(fā)展中國家,,而且發(fā)達國家 的病例也有逐年增加的趨勢,,不僅影響?zhàn)B豬業(yè)的發(fā)展,造成巨大的經濟損失,,而且還嚴重威脅人類健康,。
本試劑盒適用于肌肉,、內臟等組織以及全血等樣品中的豬囊尾蚴病,用于豬囊尾蚴病感染的輔助診斷,。
產品特點:
一,、嚴格的質控體系
所有試劑盒從原料到成品都經過嚴格的質量控制,確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量,,讓您的檢測結果更可信,。
二、高靈敏度
產品經過不斷優(yōu)化,,具有出色的靈敏度,,能夠檢測到極微量的豬囊尾蚴病核酸,不放過任何潛在的感染風險,。
三,、便捷操作
綜合各項指標特性,研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結果分析,,每一步都有清晰的操作指南,即使是新手也能輕松上手,。
四,、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經過多種樣本的檢測驗證,適用于肌肉,、內臟等多種常見樣本,,滿足不同的檢測需求。
五,、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,,根據您的特殊需求進行產品優(yōu)化和調整,為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六,、豐富的產品線
除了豬囊尾蚴病(Cc)熒光PCR檢測試劑盒,,我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,滿足您在不同領域的檢測需求,。
七,、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持,,購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,,讓您無后顧之憂,。
產品參數:
產品規(guī)格
50T/盒,,可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。
檢測方法
實時熒光PCR,具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。
標本采集
肉眼觀察舌肌、咬肌,、內腰肌,、膈肌、肩胛肌及心臟,、肝臟、肺臟等組織,,采集有可疑蟲體寄生部位的肌肉或內臟組織,用手術-刀將其切成約 1 cm 厚的薄片,,仔細檢查切口有無蟲體,。全血樣本:采集豬全血,,5 mL/頭。
保存和運輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h,;若需長期保存,應放置-70℃以下保存,,凍融不超過 3 次,。
使用方法:
1.樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1樣本前處理
組織樣品:每 50~100mg 的樣品加入 1mL Trizol 試劑,玻璃勻漿器研磨搗碎組織,。
采集豬全血,,5 mL/頭,置 4℃析出血清后,,3000g 離心 15 min,取上層血清用等體積 20% TCA 室溫沉淀 20 min,, 4℃,、10000g 離心 10min,,吸取上清于干凈離心管中,作為待檢樣品,。
1.2核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產的核酸-提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進行核酸提取,,請 按照試劑說明書進行操作。
2.試劑配制(試劑準備區(qū))
根據待檢測樣本總數,,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照,;反應管數每滿 10 份,多配制 1 份),,每測試反應體系配制如下表:
試劑Cc 反應液酶液
用量(樣本數為 N)19μL1μL
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,,20μL/管。
3.加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的核酸,、陽性質控品,、陰性質控品各取 5μL,分別加入相應的反應管中,,蓋好管蓋,,混勻,短暫離心,。
4.PCR 擴增(核酸擴增區(qū))
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內,;
4.2設置好通道、樣品信息,,反應體系設置為 25μL,;
熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,,ABI 系列儀器請勿選擇
ROX 參比熒光,,選擇 None 即可。
4.3推薦循環(huán)參數設置:
步驟循環(huán)數溫度時間收集熒光信號
11 cycle95℃2min否
245 cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結果分析判定
5.1結果分析條件設定(請參照各儀器使用說明書進行設置,,以分析 ABI7500 儀器為例)
反應結束后自動保存結果,,根據分析后圖像調節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶可根據實際情況自行調整,,Start 值可設在 3~15,、End 值可設在 5~20,使閾值線位于擴增曲線指數期,,陰性質控品的擴增曲線平直或低于閾值線),,點擊 Analyze 自動獲得分析結果。
5.2結果判斷
陽性:檢測通道 Ct 值≤40,,且曲線有明顯的指數增長曲線,; 陰性:樣本檢測結果無 Ct 值,且無特異性擴增曲線,;
可疑:樣本檢測結果 40<Ct 值≤45,,建議重復檢測,,如果檢測通道仍為 40<Ct 值≤45,且曲線有明顯的增長曲線,,判定為陽性,,否則為陰性,。
5.3質控標準
陰性質控品:無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示,;
陽性質控品:擴增曲線有明顯指數增長期,且 Ct 值≤32,; 以上條件應同時滿足,,否則實驗視為無效。
6.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結果與樣本收集,、處理,、運送以及保存質量有關;
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,,會出現假陽性結果,;
3.陽性對照、擴增產物泄漏,,會導致假陽性結果,;
4.病原體在流行過程中基因突變、重組,,會導致假陰性結果,;
5.不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果,;
6.試劑運輸,,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果,;
7.本檢測結果僅供參考,,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。
注意事項:
1.所有操作嚴格按照說明書進行,;
2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化,,完-全混勻并短暫離心;
3.反應液應避光保存,;
4.反應中盡量避免氣泡存在,,管蓋需蓋緊;
5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服,;
6.樣本處理、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進行,,以免交叉污染,;
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,,并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產品僅供科研。
選擇我們的豬囊尾蚴?。–c)熒光PCR檢測試劑盒,,就是選擇精準、高效,、可靠的檢測方案,,為您的科研實驗保駕護航!