目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T猴痘病毒(MPV)熒光PCR檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
---|---|---|---|
貨號 | XY-D-0313 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Monkey pox Virus Detection Kit |
保存條件 | -20℃±5℃,避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介:
猴痘(Monkeypox)是由猴痘病毒(Monkeypoxvirus)一種病毒性人畜共患病(一種從動物傳播給人類的病 毒),,病毒最早在猴子身上發(fā)現(xiàn),。發(fā)生于非洲中西部雨林中的猴類,也可感染其他動物,,偶可使人類受感染,。臨床表現(xiàn)類似天花,但病情較輕,。這種疾病由猴痘病毒造成,,它屬于一個包括天花病毒,并在天花疫苗中采用的病毒和牛痘病毒的病毒組,,但需與天花,、水痘相鑒別。這種病毒可以通過直接密切接觸由動物傳染給人,,也可以在人與人之間傳播,。
本試劑盒適用于檢測皮疹、痂皮,、水皰液,、膿皰液和全血等樣本中的猴痘病毒,用于猴痘病毒感染的輔助診斷,。
產(chǎn)品特點:
一,、嚴格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,,讓您的檢測結(jié)果更可信,。
二、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,,具有出色的靈敏度,,能夠檢測到極微量的猴痘病毒核酸,不放過任何潛在的感染風(fēng)險。
三,、便捷操作
綜合各項指標特性,,研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析,,每一步都有清晰的操作指南,,即使是新手也能輕松上手。
四,、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,,適用于皮疹、痂皮,、水皰液,、膿皰液和全血等多種常見樣本,滿足不同的檢測需求,。
五,、個性化定制服務(wù)
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務(wù),根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,,為您提供更貼合實際的檢測方案。
六,、豐富的產(chǎn)品線
除了猴痘病毒(MPV)熒光PCR檢測試劑盒,,我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,滿足您在不同領(lǐng)域的檢測需求,。
七,、完善的售前售后服務(wù)
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團隊,在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持,,購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,,讓您無后顧之憂。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,,可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。
檢測方法
實時熒光PCR,具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。
標本采集
皮疹、痂皮采集:取皮疹上蓋或痂皮,裝入 2mL 的滅菌塑料管里,,密封,,4℃或 4℃以下保存運輸。
水皰液,、膿皰液采集:用附有注射針的一次性注射器吸取 0.2mL 的 PBS,,從皰膜插入,來回 2 次~3 次混勻后吸取內(nèi)容液,,把吸取的內(nèi)容液裝入血清管,,4℃或 4℃以下保存運輸。
全血采集:脈采集疑似病人抗凝全血 5mL,,4℃或 4℃以下保存運輸,。
保存和運輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過 24 h;若需長期保存,,應(yīng)放置-70℃以下保存,,凍融不超過 3 次。
使用方法:
1.樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1樣本前處理
皮疹,、痂皮等病變組織:取 1mg~100mg 的病變組織移入冰浴預(yù)冷的研缽中,,快速用力研成勻漿(富含膠原蛋白的皮膚等組織需加液氮研磨至粉末狀);水皰液,、膿皰液及全血樣品直接取 500μL 于 1.5mL 滅菌離心管中,。
1.2核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取試劑(離心柱法)進行核酸提取,請按照試劑說 明書進行操作,。
2.試劑配制(試劑準備區(qū))
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),,設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿
10 份,,多配制 1 份),,每測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑MPV 反應(yīng)液
用量(樣本數(shù)為 N)20μL
將混合好的 MPV 反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,20μL/管,。
3.加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的核酸,、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 5μL,,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,,蓋好管蓋,混勻,, 短暫離心,。
4.PCR 擴增(核酸擴增區(qū))
4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);
4.2設(shè)置好通道,、樣品信息,,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL,;
熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,,ABI 系列儀器請勿選擇
ROX 參比熒光,,選擇 None 即可。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號
11 cycle95℃2min否
245 cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設(shè)定(請參照各儀器使用說明書進行設(shè)置,,以分析 ABI7500 儀器為例)
反應(yīng)結(jié)束后自動保存結(jié)果,,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值(用戶可根據(jù)實際情況自行調(diào)整,,Start 值可設(shè)在 3~15,、End 值可設(shè)在 5~20,使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期,,陰性質(zhì)控品的擴增曲線平直或低于閾值線),,點擊 Analyze 自動獲得分析結(jié)果。
5.2結(jié)果判斷
陽性:檢測通道 Ct 值≤40,,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,; 陰性:樣本檢測結(jié)果 Ct 值>40 或無 Ct 值。
5.3質(zhì)控標準
陰性質(zhì)控品:無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示,;
陽性質(zhì)控品:擴增曲線有明顯指數(shù)增長期,,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時滿足,,否則實驗視為無效,。
6.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理,、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,;
3.陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果,;
4.病原體在流行過程中基因突變、重組,,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果,;
5.不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果,;
6.試劑運輸,,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果,;
7.本檢測結(jié)果僅供參考,,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。
注意事項:
1.所有操作嚴格按照說明書進行;
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,,完-全混勻并短暫離心,;
3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,,管蓋需蓋緊,;
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服,;
6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,,以免交叉污染,;
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;
8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研。
選擇我們的猴痘病毒(MPV)熒光PCR檢測試劑盒,,就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,,為您的科研實驗保駕護航,!