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產(chǎn)品簡介：

本試劑盒適用于馬鼻腔分泌物棉拭子,、血液等樣本中的馬皰疹病毒 4 型，用于馬皰疹病毒 4 型感染的輔助診斷，其檢測結(jié)果僅供參考,。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

一,、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,，讓您的檢測結(jié)果更可信,。

二、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度,，能夠檢測到極微量的馬皰疹病毒4型核酸，不放過任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn),。

三,、便捷操作

綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結(jié)果分析,，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手,。

四,、多樣的檢測驗(yàn)證樣本

該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗(yàn)證，適用于鼻腔分泌物棉拭子,、血液等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求。

五,、個(gè)性化定制服務(wù)

專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù),，根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整，為您提供更貼合實(shí)際的檢測方案,。

六,、豐富的產(chǎn)品線

除了馬皰疹病毒4型（EHV-IV）熒光PCR檢測試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領(lǐng)域的檢測需求,。

七、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),，在您購買前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂,。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。

檢測方法

實(shí)時(shí)熒光PCR,，具有快速,、準(zhǔn)確、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。

適用儀器

ABI ,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。

標(biāo)本采集

待檢馬，用棉拭子取鼻腔分泌物,，置于 50%甘油生理鹽水中,，或用注射器取血5mL。

保存和運(yùn)輸

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,，長期保存可置-70℃,，但不能超過 6 個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,，嚴(yán)禁反復(fù)凍融,。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

鼻腔分泌物棉拭子直接取 100μL 提取,；血液取血清 100μL 提取,。

1.2DNA 提取

1)DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的 DNA-提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作,。

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),，設(shè)所需要的PCR 反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,，多配制 1 份),，每測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑EHV-IV 反應(yīng)液酶液

用量（樣本數(shù)為 N）20μL1μL

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 4μL,，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋,，混勻,，短暫離心。

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi),；

4.2設(shè)置好通道,、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL,；

熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM,， 淬滅通道（Quencher Dye） NONE，請勿選擇 ROX 參比熒光,。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

55℃30sec是

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析，當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí)，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對照)，重新分析結(jié)果,。

5.2結(jié)果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35,，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線；

可疑：檢測通道 35<Ct 值≤38,，建議重復(fù)檢測,，如果檢測通道仍為 35<Ct 值

≤38，且曲線有明顯的增長曲線,，判定為陽性,，否則為陰性； 陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值,。

6.質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：Ct 值>38 或無 Ct 值,；

陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32,； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,，否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

7.產(chǎn)品性能指標(biāo)

陰陽性參考品符合率：5 份陽性參考品符合率為 100％,；10 份陰性參考品符合率為 100％,。

最-低檢測限：1.0×103copies/mL。

精密度：批內(nèi),、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數(shù)（CV）均小于等于 3%,。

8.檢測方法的局限性

8.1樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理,、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān),；

8.2樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果,；

8.3陽性對照,、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果,；

8.4病原體在流行過程中基因突變,、重組，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果,；

8.5不同的提取方法存在提取效率差異,，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

8.6試劑運(yùn)輸,，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果,；

8.7本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。

注意事項(xiàng)：

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完-全混勻并短暫離心,；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存,；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊,；

5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理,、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染,；

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器,；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理,。

9.本產(chǎn)品僅供科研,。

選擇我們的馬皰疹病毒4型（EHV-IV）熒光PCR檢測試劑盒，就是選擇精準(zhǔn),、高效,、可靠的檢測方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,！