目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T牛結(jié)核分枝桿菌(MB)熒光PCR檢測試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-0271 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Mycobacterium Bovis Detection Kit |
| 保存條件 | -20℃±5℃,，避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介：
牛結(jié)核病(Bovine tuberculosis,，bTB)是由牛型分枝桿菌(Mycobacterium boris)引起的包括人和家畜以及野生動物發(fā)病的一種慢性消耗性人獸共患傳染病,，被國際動物衛(wèi)生組織(OIE)定為 B 類動物傳染病，是一種危害嚴重的人獸共患傳染病,， 可以通過吸入含菌氣溶膠或食用受污染的乳制品而從牛傳染到人,。結(jié)核病為慢性消耗性疾病，感染牛型分枝桿菌的奶牛并不一定馬上出現(xiàn)臨床癥狀,，牛型分枝桿菌蛋白膠乳凝集方法的建立及應用易被忽視,，但奶牛通常會在一定時間后表現(xiàn)出臨床癥狀，并將病菌傳播給群內(nèi)其他動物,。本試劑盒適用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的牛結(jié)核分枝桿菌,，用于牛結(jié)核分枝桿菌感染的輔助診斷,。
產(chǎn)品特點：
一、嚴格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,，讓您的檢測結(jié)果更可信。
二,、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度,，能夠檢測到極微量的牛結(jié)核分枝桿菌核酸，不放過任何潛在的感染風險,。
三,、便捷操作
綜合各項指標特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結(jié)果分析,，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手,。
四,、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證，適用于氣管分泌物拭子,、肺組織等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求。
五,、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,，根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整，為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六,、豐富的產(chǎn)品線
除了牛結(jié)核分枝桿菌(MB)熒光PCR檢測試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領域的檢測需求,。
七、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,，在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂,。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。
檢測方法
實時熒光PCR,，具有快速,、準確、靈敏等優(yōu)點,。
適用儀器
ABI ,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
標本采集
病死或撲殺動物，無菌采集肺病變部位或病變/非病變部位交界處的樣品,；活動物 滅菌棉拭子沾取氣管分泌物,，放入無菌試管中。
保存和運輸
上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃,，長期保存可置-70℃,，但不能超過 6 個月，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,，嚴禁反復凍融,。
使用方法：
1.樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
組織樣品：每份組織分別從 3 個不同的位置稱取樣品約 1g，手術-剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨,，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min,，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中,；氣管分泌物取 100μL 提取。
1.2DNA 提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的 DNA-提取試劑盒（離心柱提取法）,，請按照試劑盒說明書進行操作,。
2.試劑配制（試劑準備區(qū)）
根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；樣品每滿 7 份,，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：
試劑MB 反應液酶液
用量（樣本數(shù)為 N）20μL1μL
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，21uL/管,。
3.加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 4μL,，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋,，混勻,，短暫離心。
4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內(nèi),；
4.2設置好通道,、樣品信息，反應體系設置為 25μL,；熒光通道選擇： 檢測通道
（Reporter Dye）FAM,， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,，選擇 None 即可。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號
11 cycle95℃10min否
240 cycles94℃15sec否
55℃30sec是
5.結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設定
設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結(jié)果分析，當曲線出現(xiàn)整體傾斜時,，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),，重新分析結(jié)果,。
5.2結(jié)果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,；
可疑：檢測通道 35<Ct 值≤38,，建議重復檢測，如果檢測通道仍為 35<Ct 值≤38,， 且曲線有明顯的增長曲線,，判定為陽性，否則為陰性,；
陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值,。
6.質(zhì)控標準
陰性質(zhì)控品：Ct>38 或無 Ct 值顯示；
陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期,，且 Ct 值≤32,； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效,。
7.檢測方法的局限性
7.1樣本檢測結(jié)果與樣本收集,、處理、運送以及保存質(zhì)量有關,；
7.2樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
7.3陽性對照,、擴增產(chǎn)物泄漏,，會導致假陽性結(jié)果；
7.4病原體在流行過程中基因突變,、重組,，會導致假陰性結(jié)果；
7.5不同的提取方法存在提取效率差異,，會導致假陰性結(jié)果,；
7.6試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定 量檢測不準確的結(jié)果,；
7.7本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。
注意事項：
1.所有操作嚴格按照說明書進行,；
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應自然融化，完-全混勻并短暫離心；
3.反應液應避光保存,；
4.反應中盡量避免氣泡存在,，管蓋需蓋緊；
5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；
6.樣本處理、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進行,，以免交叉污染；
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,；
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理。
9.本產(chǎn)品僅供科研,。
選擇我們的牛結(jié)核分枝桿菌(MB)熒光PCR檢測試劑盒,，就是選擇精準、高效,、可靠的檢測方案,，為您的科研實驗保駕護航！
1
化工儀器網(wǎng)