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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome, PRRS）,，又稱藍(lán)耳病,，是由豬藍(lán)耳病病毒引起豬的高度接觸性傳染病，我國(guó)列為二類傳染病,。該病的主要臨床特征為：厭食,，發(fā)熱，母豬流產(chǎn),、   產(chǎn)死胎,、產(chǎn)弱胎和木乃伊胎以及各種年齡豬呼吸困難。我國(guó)于 1996 年首-次分離到該病毒,，確定為經(jīng)典株美洲型,，為低致病性毒株。本試劑盒適用于檢測(cè)肺,、扁桃體和口腔拭子,、全血等標(biāo)本中豬藍(lán)耳病病毒經(jīng)典株 RNA， 適用于豬藍(lán)耳病病毒經(jīng)典株感染的輔助診斷。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

一,、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量，讓您的檢測(cè)結(jié)果更可信,。

二,、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過(guò)不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度,，能夠檢測(cè)到極微量的豬藍(lán)耳病病毒經(jīng)典型核酸,，不放過(guò)任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)。

三,、便捷操作

綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析,，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手。

四,、多樣的檢測(cè)驗(yàn)證樣本

該試劑盒經(jīng)過(guò)多種樣本的檢測(cè)驗(yàn)證，適用于肺,、扁桃體和口腔拭子,、全血等多種常見(jiàn)樣本，滿足不同的檢測(cè)需求,。

五,、個(gè)性化定制服務(wù)

專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù)，根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,，為您提供更貼合實(shí)際的檢測(cè)方案,。

六、豐富的產(chǎn)品線

除了豬藍(lán)耳病病毒經(jīng)典型(PRRSV-C)PCR檢測(cè)試劑盒,，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領(lǐng)域的檢測(cè)需求。

七,、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),，在您購(gòu)買前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持，購(gòu)買后為您解決使用過(guò)程中遇到的任何問(wèn)題,，讓您無(wú)后顧之憂,。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒，可滿足一定規(guī)模的檢測(cè)需求,。

檢測(cè)方法

實(shí)時(shí)熒光PCR,，具有快速、準(zhǔn)確,、靈敏等優(yōu)點(diǎn),。

適用儀器

ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

標(biāo)本采集

病死或撲殺豬,，取肺臟,、淋巴結(jié)、扁桃體,、脾臟等組織,；待檢活豬，取口腔拭子或取血   5mL,；公豬可采集精液,。

血清樣品采集：用無(wú)菌-注射器抽取受檢豬靜脈血不少于 5mL，置于無(wú)菌離心管內(nèi),，2000r/min~3000r/min 離心 10min,，吸取上清液到新的離心管內(nèi)備用。公豬精液：按照 GB/T25172 的方法采集和保存精液,?？谇皇米樱捍筘i使用保定器保定，小豬可以雙手保定,，用采樣拭子蘸取口腔分泌物,，放入無(wú)菌采樣管中。肺灌洗液：   完整摘取肺臟/肺葉,，送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行灌洗,。組織樣品：取肺臟、淋巴結(jié),、扁桃體,、脾臟等組織，置于無(wú)菌離心管內(nèi)備用,。

保存和運(yùn)輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò) 24 h,；若需長(zhǎng)期保存，應(yīng)放置-70℃以下保存,，凍融不超過(guò) 3 次,。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

血清和精液樣品：無(wú)需進(jìn)行前處理，直接用于核酸提??；口腔拭子樣品：加入 500μL 無(wú)菌 PBS，充分渦旋震蕩 1min，反復(fù)擠壓拭子,，棄去拭子后 3000r/min 離心 5min,，取上清用于后續(xù)的核酸提取。肺灌洗液：根據(jù)肺臟/肺葉的大小,，通過(guò)肺管加入 5mL~10mL 無(wú)菌 PBS,，反復(fù)揉捏，吸取灌洗液,，3000r/min 離心 5 min,，取上清用于核酸提取。組織樣品：取 1g 組織,，剪碎,，加人 2mL 生理鹽水進(jìn)行研磨，制備組織勻漿,，8000r/min 離心 5min,，取上清用于后續(xù)的核酸提取。

1.2核酸提取

推薦采用公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進(jìn)行核酸提取,，請(qǐng)按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,。

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照,；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,，多配制 1 份)，每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑PRRSV-C 反應(yīng)液酶液

用量19μL1μL

將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,，20μL/管。

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的核酸,、陽(yáng)性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 5μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,，蓋好管蓋,，混勻,， 短暫離心,。

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi),；

4.2設(shè)置好通道、樣品信息,，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；熒光通道選擇：

檢測(cè)通道（Reporter Dye）FAM,， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE,，ABI 系列儀器請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光，選擇 None 即可。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間收集熒光信號(hào)

11 cycle50℃10min否

21 cycle95℃2min否

345 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定（請(qǐng)參照各儀器使用說(shuō)明書進(jìn)行設(shè)置，以分析 ABI7500 儀器為例）

反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果,，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整,，Start 值可設(shè)在 3～15,、End 值可設(shè)在 5～20，使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期,，陰性質(zhì)控品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線）,，點(diǎn)擊 Analyze 自動(dòng)獲得分析結(jié)果,。

5.2結(jié)果判斷

陽(yáng)性：檢測(cè)通道 Ct 值≤40,，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線； 陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>40 或無(wú) Ct 值,。

5.3質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無(wú)特異性擴(kuò)增曲線或無(wú) Ct 值顯示,；

陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期,，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,，否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效,。

6.檢測(cè)方法的局限性

1.樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理,、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；

2.樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,，會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,；

3.陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,，會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果,；

4.病原體在流行過(guò)程中基因突變,、重組，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果,；

5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

6.試劑運(yùn)輸,，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果,；

7.本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,，如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。

注意事項(xiàng)：

1.所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行,；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,，完-全混勻并短暫離心,；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,，以免交叉污染,；

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器,；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理,。

9.本產(chǎn)品僅供科研,。

選擇我們的豬藍(lán)耳病病毒經(jīng)典型(PRRSV-C)PCR檢測(cè)試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效,、可靠的檢測(cè)方案,，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,！