目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T口蹄疫病毒亞洲1型(FMDV-Asia1)PCR試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-0248 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Foot-and-mouth Disease Virus Type Asia I Detection |
| 保存條件 | -20℃±5℃，避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介：
口蹄疫（Foot and mouth disease,，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus,，F(xiàn)MDV）感染引起偶蹄動物的一種急性、烈性,、接觸性傳染病,。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將口蹄疫列為必須報告的動物傳染 病，我國規(guī)定口蹄疫為一類動物疫病,。
口蹄疫的傳染源主要為潛伏期感染及臨床發(fā)病動物,。易感動物可通過呼吸道、消化道,、生殖道和傷口感染病毒,，通常以直接或間接接觸（飛沫等）方式傳播，或通過人或犬,、蠅,、蟬、等動物媒介,。感染動物呼出物,、唾液、糞便,、尿液,、乳、精液及肉和副產(chǎn)品均可帶毒,。牛羊等反芻動物感染后,，病毒可在食道-咽喉部持續(xù)帶毒[1]。該病可分為 O,、A,、C、南非 I 型,、南非 II 型,、南 III 型和亞洲 I 型等血清型，我國口蹄疫以 O 型,、A 型為主,，亞洲 1 型也有分布，其產(chǎn)生的危害不容忽視,。
本試劑盒適用于檢測口蹄疫易感動物的水泡液,、水泡皮、組織樣品,、反芻動物 O-P 液樣品及血清樣品中亞洲 1 型口蹄疫病毒,，適用于亞洲 1 型口蹄疫病毒感染的輔助診斷。
產(chǎn)品特點：
一、嚴格的質控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量,，讓您的檢測結果更可信。
二,、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的口蹄疫病毒亞洲1型核酸,，不放過任何潛在的感染風險,。
三、便捷操作
綜合各項指標特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手,。
四、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,，適用于水泡液,、水泡皮、組織樣品,、反芻動物 O-P 液樣品及血清等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求。
五,、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務，根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調整,，為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六、豐富的產(chǎn)品線
除了口蹄疫病毒亞洲1型(FMDV-Asia1)PCR試劑盒,，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領域的檢測需求。
七,、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,，在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,，讓您無后顧之憂,。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒，可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。
檢測方法
實時熒光PCR,，具有快速、準確,、靈敏等優(yōu)點,。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
標本采集
水泡液采集：典型臨床發(fā)病動物水泡液用滅菌注射器吸出后裝入樣品保存管,，加青-霉素 1000 IU/mL,、鏈-霉素 500 IU/ mL，加蓋封口,，冷凍保存,。
其它樣品采集參考 GB/T 18935-2018《口蹄疫診斷技術》[1]中（5.3.2 章節(jié)）水泡皮樣品采集，（5.3.3 章節(jié)）組織樣品采集,、（5.3.4 章節(jié)）反芻動物 O-P 液樣品采集,、（5.3.5 章節(jié)）血清樣品采集進行規(guī)范采集。
保存和運輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h,；若需長期保存,，應放置-70℃以下保存，凍融不超過 3 次,。
使用方法：
1.樣品處理（樣品處理區(qū)）
1.1樣品前處理
水泡液樣品：水泡液以 3000 r/ min 離心 10 min,，取上清液備用。
水泡皮樣品處理,，組織樣品處理,、反芻動物 O-P 液樣品處理，血清樣品處理參考 GB/T18935-2018《口蹄疫診斷技術》[1]進行規(guī)范處理,。
1.2核酸提取
推薦采用公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提取,，請按照試劑說明書進行操作。
2.試劑配制（試劑準備區(qū)）
根據(jù)待檢測樣品總數(shù),，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N（N=樣品數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；反應管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份）,，每測試反應體系配制如下表：
試劑FMDV-Asia1 反應液酶液
用量19μL1μL
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，20μL/管。
3.加樣（樣品處理區(qū)）
將步驟 1 提取的核酸,、陽性質控品,、陰性質控品各取 5μL，分別加入相應的反應管中,，蓋好管蓋,，混勻， 短暫離心。
4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內,；
4.2設置好通道,、樣品信息，反應體系設置為 25μL,；
熒光通道選擇：檢測通道（Reporter Dye）FAM,， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器請勿選擇
ROX 參比熒光,，選擇 None 即可,。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號
11 cycle50℃10min否
21 cycle95℃2min否
345 cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結果分析判定
5.1結果分析條件設定（請參照各儀器使用說明書進行設置，以分析 ABI7500 儀器為例）
反應結束后自動保存結果,，根據(jù)分析后圖像調節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實際情況自行調整，Start 值可設在 3～15,、End 值可設在 5～20,，使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期， 陰性質控品的擴增曲線平直或低于閾值線）,，點擊 Analyze 自動獲得分析結果,。
5.2結果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,； 陰性：樣品檢測結果 Ct 值>40 或無 Ct 值,。
5.3質控標準
陰性質控品：無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示；
陽性質控品：擴增曲線有明顯指數(shù)增長期,，且 Ct 值≤32,； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效,。
6.檢測方法的局限性
1.樣品檢測結果與樣品收集,、處理、運送以及保存質量有關,；
2.樣品提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結果,；
3.陽性對照,、擴增產(chǎn)物泄漏，會導致假陽性結果,；
4.病原體在流行過程中基因突變,、重組，會導致假陰性結果,；
5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會導致假陰性結果；
6.試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果,；
7.本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段,。
注意事項：
1.所有操作嚴格按照說明書進行,；
2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化，完-全混勻并短暫離心,；
3.反應液應避光保存,；
4.反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊,；
5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服；
6.樣本處理,、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染,；
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,；
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研,。
選擇我們的口蹄疫病毒亞洲1型(FMDV-Asia1)PCR試劑盒，就是選擇精準,、高效,、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航,！
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