目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T日本乙型腦炎病毒(JEV)熒光PCR檢測試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-0244 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Japanese encephalitis virus Detection Kit |
| 保存條件 | -20℃±5℃,，避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介：
日本乙型腦炎,，又稱流行性乙型腦炎,，簡稱乙腦，是由日本腦炎病毒（Japanese encephalitis,，JEV）引起的一種人畜共患傳染病,。JEV 主要是通過帶病毒的蚊蟲叮咬傳播， 而豬是 JEV 的主要增殖宿主和擴散宿主,。JEV 可引起妊娠母豬發(fā)生流產(chǎn)和死胎,、公豬發(fā)生睪丸炎，新生仔豬發(fā)生腦炎,、育肥豬持續(xù)高熱,，對養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的 經(jīng)濟損失。日本乙型腦炎廣泛存在于世界許多國家,， 嚴重威脅著人類的健康,。
本試劑盒適用于檢測樣本中日本乙型腦炎病毒 RNA，適用于日本乙型腦炎病毒感染的輔助診斷,。
產(chǎn)品特點：
一,、嚴格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量，讓您的檢測結(jié)果更可信,。
二,、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度,，能夠檢測到極微量的日本乙型腦炎病毒核酸,，不放過任何潛在的感染風險。
三,、便捷操作
綜合各項指標特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析,，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手。
四,、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,，適用于腦脊髓液或采集病畜血液等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求,。
五,、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務，根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,，為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六、豐富的產(chǎn)品線
除了日本乙型腦炎病毒(JEV)熒光PCR檢測試劑盒,，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領域的檢測需求。
七,、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,，在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,，讓您無后顧之憂。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。
檢測方法
實時熒光PCR，具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。
標本采集
病死或撲殺動物(包括流產(chǎn)死胎)死亡后 3h 內(nèi)采取腦組織(選大腦皮質(zhì),、腦干、中腦,、海馬回及橋腦),；待檢活動物，無菌采集動物的腦脊髓液或采集病畜血液不少于 5 mL 于無菌離心管中,。
保存和運輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h,；若需長期保存，應放置-70℃以下保存,，凍融不超過 3 次,。
使用方法：
1.樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
將采集的動物腦組織或翠丸組織在組織研磨器中充分研磨,加入青-霉素500 IU/mL 和鏈-霉素500 μg/mL,加入0.5%水解乳蛋白 Hank's 液,制成 10%懸液,4℃浸泡 3h~4 h,3 000 r/min 離心 30 min,取上清液備用；全血樣品待血凝后取血清于 1.5mL 滅菌離心管中備用,。
1.2核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提取,，請 按照試劑說明書進行操作。
2.試劑配制（試劑準備區(qū)）
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N（N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；反應管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份）,，每測試反應體系配制如下表：
試劑JEV 反應液酶液
用量19μL1μL
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，20μL/管。
3.加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的核酸,、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 5μL，分別加入相應的反應管中,，蓋好管蓋,，混勻，短暫離心,。
4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內(nèi),；
4.2設置好通道、樣品信息,，反應體系設置為 25μL,；熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE,，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,，選擇 None 即可。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號
11cycle50℃10min否
21 cycle95℃2min否
345 cycle95℃15sec否
60℃30sec是
5.結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設定（請參照各儀器使用說明書進行設置,，以分析 ABI7500 儀器為例）
反應結(jié)束后自動保存結(jié)果,，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實際情況自行調(diào)整，Start 值可設在 3～15,、End 值可設在 5～20,，使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期，陰性質(zhì)控品的擴增曲線平直或低于閾值線）,，點擊 Analyze 自動獲得分析結(jié)果,。
5.2結(jié)果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,； 陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>40 或無 Ct 值,。
5.3質(zhì)控標準
陰性質(zhì)控品：無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示；
陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯指數(shù)增長期,，且 Ct 值≤32,； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效,。
6.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集,、處理、運送以及保存質(zhì)量有關,；
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
3.陽性對照,、擴增產(chǎn)物泄漏,，會導致假陽性結(jié)果；
4.病原體在流行過程中基因突變,、重組,，會導致假陰性結(jié)果；
5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會導致假陰性結(jié)果,；
6.試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果,；
7.本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。
注意事項：
1.所有操作嚴格按照說明書進行,；
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應自然融化，完-全混勻并短暫離心,；
3.反應液應避光保存；
4.反應中盡量避免氣泡存在,，管蓋需蓋緊,；
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；
6.樣本處理,、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染,；
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,；
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研,。
選擇我們的日本乙型腦炎病毒(JEV)熒光PCR檢測試劑盒，就是選擇精準,、高效,、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航,！
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