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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,，PRV）又稱(chēng) 豬皰疹病毒Ⅰ型,、傳染性延髓麻痹病毒、奇癢癥病毒,、奧葉茲基氏病病毒,。是引起牛、羊,、豬,、犬和貓等多種家畜和野生動(dòng)物發(fā)熱、奇癢（豬除外）及腦脊髓炎為主要癥狀的皰疹病毒,。豬是偽狂犬病的唯-一自然宿主,，對(duì)其危害大?？芍氯?母豬流產(chǎn),，產(chǎn)死胎及胎兒干尸化。對(duì)初生仔豬則引起神經(jīng)癥狀,，出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失調(diào)，麻痹,，衰竭死亡,，病死率 100%。成年豬多呈隱性感染,，但可引起呼吸道癥狀,。病豬,、帶毒豬及帶毒鼠類(lèi)是本病的主要傳染源，病毒主要從病豬的鼻分泌物,、唾液,、乳汁和尿中排除，有的帶毒豬可持續(xù)排毒一年,。

本試劑盒利用實(shí)時(shí)熒光 PCR 原理,，檢測(cè)偽狂犬病毒野毒株，對(duì)偽狂犬病毒野毒株引起的疾病及其并發(fā)癥的診斷及療效評(píng)估有重要指導(dǎo)意義,。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

一,、嚴(yán)格的質(zhì)控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,，讓您的檢測(cè)結(jié)果更可信,。

二、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過(guò)不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度,，能夠檢測(cè)到極微量的偽狂犬病毒野毒株核酸，不放過(guò)任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn),。

三,、便捷操作

綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結(jié)果分析,，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手,。

四,、多樣的檢測(cè)驗(yàn)證樣本

該試劑盒經(jīng)過(guò)多種樣本的檢測(cè)驗(yàn)證，適用于腦,、淋巴結(jié),、脾臟、肺臟,、待檢活豬,，用棉拭子取鼻腔分泌物、唾液,、乳汁等多種常見(jiàn)樣本,，滿足不同的檢測(cè)需求。

五,、個(gè)性化定制服務(wù)

專(zhuān)業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù),，根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整，為您提供更貼合實(shí)際的檢測(cè)方案,。

六,、豐富的產(chǎn)品線

除了偽狂犬病毒野毒株(PRV-gE)PCR檢測(cè)試劑盒,，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領(lǐng)域的檢測(cè)需求,。

七,、完善的售前售后服務(wù)

我們擁有完善專(zhuān)業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì)，在您購(gòu)買(mǎi)前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢(xún)和技術(shù)支持,，購(gòu)買(mǎi)后為您解決使用過(guò)程中遇到的任何問(wèn)題,，讓您無(wú)后顧之憂。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測(cè)需求,。

檢測(cè)方法

實(shí)時(shí)熒光PCR，具有快速,、準(zhǔn)確,、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。

適用儀器

ABI ,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀,。

標(biāo)本采集

病死或撲殺的豬，取腦,、淋巴結(jié),、脾臟、肺臟等組織,；待檢活豬,，用棉拭子取鼻腔分泌物、唾液,、乳汁等,，   置于 50%甘油生理鹽水中，或用注射器取血 5mL,。

保存和運(yùn)輸

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過(guò) 6 個(gè)月,，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,， 嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

組織樣品：每份組織分別從 3 個(gè)不同的位置稱(chēng)取樣品約 1g,，手術(shù)-剪剪碎混勻后取 0. 5g 于研磨器中研磨,，加入1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min,，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；分泌物棉拭子直接取 100μL 提??；血液取血清 100μL 提取。

1.2核酸提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進(jìn)行核酸提取,，請(qǐng)按照    試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,。

2.試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N（N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照,；反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,，多配制 1 份），單個(gè)測(cè)試反應(yīng)液體系配制如下表：

試劑PRV-gE 反應(yīng)液酶液

用量（樣本數(shù)為 N）20μL1μL

將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,，21μL/管,。

3.加樣（樣本處理區(qū)）

μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,，蓋好管蓋,，混勻，短暫離心,。

4.PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi),；

4.2設(shè)置好通道、樣品信息,，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL,；

熒光通道選擇： 檢測(cè)通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE,，ABI 系列儀器請(qǐng)勿選擇

ROX 參比熒光,，選擇 None 即可。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間收集熒光信號(hào)

11 cycle95℃10min否

240 cycles94℃15sec否

55℃30sec是

5.結(jié)果分析判定

5.1結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,，當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí),，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值（一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)）、stop 值（一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)）,，以及 Threshold 的 Value 值（上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照）,，重新分析結(jié)果。

5.2結(jié)果判斷

陽(yáng)性：檢測(cè)通道 Ct 值≤35,，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線,；

可疑：檢測(cè)通道 35<Ct 值≤38，建議重復(fù)檢測(cè),，如果檢測(cè)通道仍為 35<Ct 值≤38,，且曲線有明顯的增長(zhǎng)曲線， 判定為陽(yáng)性，否則為陰性,；

陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>38 或無(wú) Ct 值,。

6.質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：Ct>38 或無(wú) Ct 值顯示；

陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,，且Ct 值≤32,； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效,。

7.檢測(cè)方法的局限性

1.樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集,、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān),；

2.樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,，會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；

3.陽(yáng)性對(duì)照,、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,，會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果；

4.病原體在流行過(guò)程中基因突變,、重組,，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果,；

6.試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果,；

7.本檢測(cè)結(jié)果僅供參考，如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段,。

注意事項(xiàng)：

1.所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,；

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，完-全混勻并短暫離心,；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存,；

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊,；

5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專(zhuān)用工作服；

6.樣本處理,、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染,；

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器,；

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。

9.本產(chǎn)品僅供科研,。

選擇我們的偽狂犬病毒野毒株(PRV-gE)PCR檢測(cè)試劑盒,，就是選擇精準(zhǔn)、高效,、可靠的檢測(cè)方案,，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！