目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 豬圓環(huán)病毒2型PCV-2檢測試劑盒(熒光PCR法)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-0212 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Porcine Circovirus type II Detection Kit |
| 保存條件 | -20℃±5℃,，避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介：
豬圓環(huán)病是由豬圓環(huán)病毒（Porcine Circovirus）引起豬的一種傳染性,、先天性顫抖和斷奶仔豬多系統(tǒng)功能障礙性疾病。該病毒具有 PCV1 和PCV2 兩種血清型,， PCV1 無致病性,。PCV2 具有很強的免疫抑制作用，臨床上常表現(xiàn)為多病原混合感染,，PCV2 與斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）密切相關,，還可引起豬皮炎與腎炎綜合征、呼吸道綜合征和 A2 型先天性震顫等疾病,，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失,。因此PCV2 感染早期診斷尤為重要。
本試劑盒適用于檢測從肺,、淋巴結(jié)組織,、全血等標本中分離出的豬圓環(huán)病毒 2 型 DNA，用于豬圓環(huán)病毒 2 型的輔助診斷,。
產(chǎn)品特點：
一,、嚴格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,，讓您的檢測結(jié)果更可信,。
二、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度,，能夠檢測到極微量的豬圓環(huán)病毒2型核酸，不放過任何潛在的感染風險,。
三,、便捷操作
綜合各項指標特性，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結(jié)果分析,，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手。
四,、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,，適用于肺、淋巴結(jié)組織,、全血等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求。
五,、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,，根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整，為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六,、豐富的產(chǎn)品線
除了豬圓環(huán)病毒2型PCV-2檢測試劑盒(熒光PCR法)，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領域的檢測需求,。
七、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,，在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂,。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。
檢測方法
實時熒光PCR,，具有快速,、準確、靈敏等優(yōu)點,。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
標本采集
病死或撲殺的豬,，取肺,、淋巴結(jié)等組織；待檢活豬,，用注射器取血 5mL,。
保存和運輸
上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月,，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,，嚴禁反復凍融,。
使用方法：
1.樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
組織樣品：每份組織分別從 3 個不同的位置稱取樣品約 1g,，手-術剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中,，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中,； 全血樣本：待血凝固后,，取血清放于離心管中，8000rpm 離心 2min,，取上清 100 μL 于滅菌離心管中
1.2DNA 提取
采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的 DNA-提取試劑盒（離心柱提取法）,，請按照試劑盒說明書進行操作。
2.試劑配制（試劑準備區(qū)）
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；反應管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份),，每測試反應體系配制如下表：
試劑PCV-2 反應液
用量（樣本數(shù)為 N）21μL
3.加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的 DNA,、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL,，加入相應的反應管中,，蓋好管蓋，混勻,，短暫離心,。
4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）
4.1將待檢測反應管置于 PCR 儀反應槽內(nèi)；
4.2推薦循環(huán)參數(shù)設置：
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間
11 cycle94℃2min
2
35 cycles94℃30sec
58℃30sec
72℃60 sec
反應體系為 25μL,；
5.電泳檢測
1)2%瓊脂糖凝膠配制：稀釋 50×TAE 緩沖液至 1×TAE (取 20mL 50×TAE 緩沖液,， 加 980mL 雙蒸水至 1L)，稱 4g 瓊脂糖放于 500mL 錐形瓶中,，1×TAE 緩沖液 200 mL,，置入微波爐中加熱熔解(避免加熱沸騰溶液外溢)，再加入 10μL 染料充分混勻,。在電泳槽內(nèi)放好梳子,，倒入瓊脂糖凝膠，待凝固后使用,；
2)電泳：在電泳槽中加入 1×TAE 緩沖液,，使液面剛剛沒過凝膠。用移液器取 10μ L PCR 擴增產(chǎn)物于瓊脂糖凝膠孔中,。加樣后,，以 5V/cm 電壓,，電泳 20-30min（每次電泳時，每隔 10min 觀察一次,。當加樣緩沖液中溴酚藍電泳過半至凝膠下 2/5 處時,，可停止電泳）。電泳后,，紫外燈下觀察結(jié)果,。
6.結(jié)果判定
陽性質(zhì)控品出現(xiàn) 1154 bp 條帶，陰性質(zhì)控品不出現(xiàn)條帶或只出現(xiàn)片段較小的引物二聚體條帶,，實驗結(jié)果成立,。被檢樣品出現(xiàn) 1154 bp 條帶，判斷為陽性,，否則為陰性,。
7.產(chǎn)品性能指標
試劑靈敏性 10-3 以上，特異性 100%,，批間批內(nèi)差異≤3%,。
注意事項：
1.所有操作嚴格按照說明書進行；
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應自然融化,，完-全混勻并短暫離心,；
3.反應液應避光保存；
4.反應中盡量避免氣泡存在,，管蓋需蓋緊,；
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；
6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,，以免交叉污染,；
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研。
選擇我們的豬圓環(huán)病毒2型PCV-2檢測試劑盒(熒光PCR法),，就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,，為您的科研實驗保駕護航,！
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