目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 豬肺炎支原體(MHP)檢測試劑盒(熒光PCR法)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-0207 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Mycoplasma hyopneumoniae Detection Kit |
| 保存條件 | -20℃±5℃,，避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介：
豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae, MHP）可引起豬支原體肺炎,，該病又稱豬霉形體肺炎或豬氣喘病,，是豬的一種高發(fā)性的慢性呼吸道傳染病,，主要臨床表現(xiàn)為咳嗽和氣喘，病理變化以患豬肺心葉,、尖葉的背側和橫隔葉的前端肉樣病變?yōu)樘卣?。該病一年四季均可發(fā)病，但以冬,、春寒冷季節(jié)較常見,，各種日齡豬均可發(fā)病。病豬生長緩慢,，飼料利用率低,，給世界各國養(yǎng)豬業(yè)造成了重大經(jīng)濟損失。
本試劑盒適用于檢測氣管分泌物拭子,、肺組織等樣本中的豬肺炎支原體,，用于豬肺炎支原體感染的輔助診斷,。
產(chǎn)品特點：
一、嚴格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,，讓您的檢測結果更可信。
二,、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的豬肺炎支原體核酸,，不放過任何潛在的感染風險,。
三、便捷操作
綜合各項指標特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手,。
四、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,，適用于氣管分泌物拭子,、肺組織等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求,。
五,、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務，根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,，為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六、豐富的產(chǎn)品線
除了豬肺炎支原體(MHP)檢測試劑盒(熒光PCR法),，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領域的檢測需求,。
七,、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊，在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,，讓您無后顧之憂。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。
檢測方法
實時熒光PCR，具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點,。
適用儀器
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler,、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。
標本采集
病死或撲殺豬,，無菌采集肺病變部位或病變/非病變部位交界處的樣品；生豬滅菌棉拭子沾取氣管分泌物,， 放入無菌試管中,。
保存和運輸
上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃,，但不能超過 6 個月,，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸， 嚴禁反復凍融,。
使用方法：
1.樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
組織樣品：每份組織分別從 3 個不同的位置稱取樣品約 1g,，手術-剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入
1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,，待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中,，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL
滅菌離心管中,；棉拭子取 100μL 進行提取,。
1.2 核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提取， 請按照試劑說明書進行操作,。
2.試劑配制（試劑準備區(qū)）
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N（N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應管數(shù)每滿 10 份,，多配制 1 份）,，每測試反應體系配制如下表：
試劑MHP 反應液酶液
用量（樣本數(shù)為 N）20μL1μL
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中，21μL/管,。
3.加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的核酸,、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL,，分別加入相應的反應管中,，蓋好管蓋，混勻,，短暫離心,。
4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內(nèi)；
4.2設置好通道、樣品信息,，反應體系設置為 25μL,；
熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE,，ABI 系列儀器請勿選擇
ROX 參比熒光,，選擇 None 即可。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號
11 cycle95℃10min否
240 cycles94℃15sec否
55℃30sec是
5.結果分析判定
5.1結果分析條件設定
設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結果分析,，當曲線出現(xiàn)整體傾斜時,，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值（一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)）、stop 值（一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)）,，以及 Threshold的 Value 值（上下拖動閾值線至高于陰性對照）,，重新分析結果。
5.2結果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤35,，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,；
可疑：檢測通道 35<Ct 值≤38，建議重復檢測,，如果檢測通道仍為 35<Ct 值≤38,，且曲線有明顯的增長曲線， 判定為陽性,，否則為陰性,；
陰性：樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。
6.質(zhì)控標準
陰性質(zhì)控品：Ct>38 或無 Ct 值顯示,；
陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期,，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足,，否則實驗視為無效,。
7.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結果與樣本收集、處理,、運送以及保存質(zhì)量有關,；
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結果,；
3.陽性對照,、擴增產(chǎn)物泄漏，會導致假陽性結果,；
4.病原體在流行過程中基因突變、重組,，會導致假陰性結果,；
5.不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果；
6.試劑運輸,，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果；
7.本檢測結果僅供參考,，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段,。
注意事項：
1.所有操作嚴格按照說明書進行；
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應自然融化,，完-全混勻并短暫離心,；
3.反應液應避光保存；
4.反應中盡量避免氣泡存在,，管蓋需蓋緊,；
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；
6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,，以免交叉污染,；
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研。
選擇我們的豬肺炎支原體(MHP)檢測試劑盒(熒光PCR法),，就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,，為您的科研實驗保駕護航,！
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