目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 禽-流感病毒通用型(AIV-U)PCR檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
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貨號 | XY-D-0160 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Avian Influenza Virus Detection Kit |
保存條件 | -20℃±5℃,,避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介:
禽-流感是禽類流行型感冒的簡稱,,它是由甲型流感病毒的一種亞型(也稱禽-流感病毒)引起的一種急性傳染病,, 經(jīng)變異后也能感染人類,,被國際獸疫局定為甲類傳染病,。禽-流感病毒(AIV)為正粘病毒科甲型流感病毒屬,,單股 負鏈 RNA 病毒。依據(jù)其外膜血凝素(H)和神經(jīng)氨酸酶(N)蛋白可分為 H 亞型和 N 亞型,,目前已發(fā)現(xiàn) 18 個 HA 和 11 個 NA 亞型,。
本試劑盒適用于檢測拭子樣品、氣管,、肺,、腦、腸(包括內(nèi)容物),、肝,、脾、腎,、心等組織臟器中禽-流感病 毒 RNA,,適用于禽-流感病毒感染的診斷、檢疫,、檢測,、監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查等。
產(chǎn)品特點:
一,、嚴格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,,確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,讓您的檢測結(jié)果更可信,。
二,、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,具有出色的靈敏度,,能夠檢測到極微量的禽-流感病毒通用型核酸,,不放過任何潛在的感染風(fēng)險。
三,、便捷操作
綜合各項指標特性,,研發(fā)出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結(jié)果分析,,每一步都有清晰的操作指南,,即使是新手也能輕松上手。
四、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,,適用于拭子樣品,、氣管、肺,、腦,、腸(包括內(nèi)容物)、肝,、脾,、腎、心等多種常見樣本,,滿足不同的檢測需求,。
五,、個性化定制服務(wù)
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務(wù),,根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六,、豐富的產(chǎn)品線
除了禽-流感病毒通用型(AIV-U)PCR檢測試劑盒,我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,,滿足您在不同領(lǐng)域的檢測需求,。
七、完善的售前售后服務(wù)
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團隊,,在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持,,購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,讓您無后顧之憂,。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,,可滿足一定規(guī)模的檢測需求。
檢測方法
實時熒光PCR,,具有快速,、準確、靈敏等優(yōu)點,。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
標本采集
拭子樣品:采集咽喉拭子時將拭子每人喉頭及上顎裂來回刮 2 次~3 次并旋轉(zhuǎn),,取分泌液,;采集泄殖腔拭子時將拭子深入泄殖腔至少旋轉(zhuǎn) 3 圈并沾取少量糞便;將采樣后的拭子分別放入盛有 1.2 mL 樣品稀釋液(配制方法見 GB/T 18936-2020 高致病性禽-流感診斷技術(shù))的 2 mL 采樣管中,編號并填寫相應(yīng)采樣單,。
發(fā)病禽鳥可無菌采集氣管,、肺、腦,、腸(包括內(nèi)容物),、肝、脾,、腎,、心等組織臟器,裝入 15 mL 或 50 mL
帶螺口的有機材料保存管中,,編號并填寫相應(yīng)采樣單,。
保存和運輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過 24 h;若需長期保存,,應(yīng)放置-70℃以下保存,,凍融不超過 3 次。
使用方法:
1.樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1樣本前處理
將棉拭子充分捻動,、擠干后棄去拭子,;糞便,研碎的組織加 PBS 充分研磨,,按照 1g 組織加 10 mL PBS 的比例配成懸液,。樣品液經(jīng) 3 000 r/min 離心 10 min,取上清作為核酸檢測材料,。
1.2核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取試劑(離心柱法)進行核酸提取,,請按照試劑說明書 進行操作。
2.試劑配制(試劑準備區(qū))
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),,設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,;反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,多配制 1 份),,每測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑AIV-U 反應(yīng)液酶液
用量19μL1μL
將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,,20μL /管。
3.加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的核酸,、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 5μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,,蓋好管蓋,,混勻,
短暫離心,。
4.PCR 擴增(核酸擴增區(qū))
4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi),;
4.2設(shè)置好通道,、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL,;熒光通道選擇:檢測通道(ReporterDye)FAM,,淬滅通道
(QuencherDye)NONE,ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,,選擇 None 即可,。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號
11 cycle50℃10min否
21 cycle95℃2min否
345 cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設(shè)定(請參照各儀器使用說明書進行設(shè)置,以分析 ABI7500 儀器為例)
反應(yīng)結(jié)束后自動保存結(jié)果,,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值(用戶可根據(jù)實際情況自行調(diào)整,Start 值可設(shè)在 3~15,、End 值可設(shè)在 5~20,,使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期,陰性質(zhì)控品的擴增曲線平直或低于閾值線),,點擊 Analyze 自動獲得分析結(jié)果,。
5.2結(jié)果判斷
陽性:檢測通道 Ct 值≤40,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,; 陰性:樣本檢測結(jié)果 Ct 值>40 或無 Ct 值,。
5.3質(zhì)控標準
陰性質(zhì)控品:無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示,;
陽性質(zhì)控品:擴增曲線有明顯指數(shù)增長期,,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時滿足,,否則實驗視為無效,。
6.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理,、運送以及保存質(zhì)量有關(guān),;
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,;
3.陽性對照,、擴增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果,;
4.病原體在流行過程中基因突變,、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果,;
5.不同的提取方法存在提取效率差異,,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
6.試劑運輸,,保存不當(dāng)或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果,;
7.本檢測結(jié)果僅供參考,如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。
注意事項:
1.所有操作嚴格按照說明書進行,;
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,完-全混勻并短暫離心,;
3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存,;
4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊,;
5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服;
6.樣本處理,、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進行,以免交叉污染,;
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,;
8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研,。
選擇我們的禽-流感病毒通用型(AIV-U)PCR檢測試劑盒,就是選擇精準,、高效,、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航,!