目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 禽-流感病毒 H3 亞型(AIV-H3)PCR檢測試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | XY-D-0152 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Avian Influenza Virus subtype H3 Detection Kit |
| 保存條件 | -20℃±5℃，避光保存 | 有效期 | 12個月 |
產(chǎn)品簡介：
禽-流感是禽類流行型感冒的簡稱,，它是由甲型流感病毒的一種亞型(也稱禽-流感病毒)引起的一種急性傳染病,，經(jīng)變異后也能感染人類,，被國際獸疫局定為甲類傳染病,。禽-流感病毒(AIV)為正粘病毒科甲型流感病毒屬,，單股 負鏈 RNA 病毒。依據(jù)其外膜血凝素(H)和神經(jīng)氨酸酶(N)蛋白可分為 H 亞型和 N 亞型,，目前已發(fā)現(xiàn) 18 個 HA 和11 個 NA 亞型,。
本試劑盒適用于檢測拭子樣品、氣管,、肺,、腦、腸（包括內(nèi)容物）,、肝,、脾、腎,、心等組織臟器中 H3 亞型禽-流感病毒 RNA,，適用于 H3 亞型禽-流感病毒感染的診斷、檢疫,、檢測,、監(jiān)測和流行病學調(diào)查等,。
產(chǎn)品特點：
一、嚴格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,，讓您的檢測結(jié)果更可信。
二,、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的禽-流感病毒 H3 亞型核酸,，不放過任何潛在的感染風險,。
三、便捷操作
綜合各項指標特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結(jié)果分析，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手,。
四、多樣的檢測驗證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,，適用于拭子樣品,、氣管、肺,、腦,、腸（包括內(nèi)容物）、肝,、脾,、腎、心等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求,。
五、個性化定制服務
專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,，根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,，為您提供更貼合實際的檢測方案,。
六,、豐富的產(chǎn)品線
除了禽-流感病毒 H3 亞型(AIV-H3)PCR檢測試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領域的檢測需求,。
七、完善的售前售后服務
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,，在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,，讓您無后顧之憂。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。
檢測方法
實時熒光PCR，具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。
標本采集
拭子樣品：采集咽喉拭子時將拭子每人喉頭及上顎裂來回刮 2 次~3 次并旋轉(zhuǎn)，取分泌液,；采集泄殖腔拭子時將拭子深入泄殖腔至少旋轉(zhuǎn) 3 圈并沾取少量糞便,；將采樣后的拭子分別放入盛有 1.2 mL 樣品稀釋液（配制方法見 GB/T 18936-2020 高致病性禽-流感診斷技術）的 2 mL 采樣管中，編號并填寫相應采樣單,。
發(fā)病禽鳥可無菌采集氣管,、肺、腦,、腸（包括內(nèi)容物）,、肝、脾,、腎,、心等組織臟器，裝入 15 mL 或 50 mL
帶螺口的有機材料保存管中,，編號并填寫相應采樣單,。
保存和運輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h；若需長期保存,，應放置-70℃以下保存,，凍融不超過 3 次。
使用方法：
1.樣品處理（樣本處理區(qū)）
1.1樣本前處理
將棉拭子充分捻動,、擠干后棄去拭子,；糞便，研碎的組織加 PBS 充分研磨,，按照 1g 組織加 10 mL PBS 的比例配成懸液,。樣品液經(jīng) 3000r/min 離心 10 min，取上清作為核酸檢測材料,。
1.2核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提取,， 請按照試劑說明書進行操作,。
2.試劑配制（試劑準備區(qū)）
根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；反應管數(shù)每滿 10 份,，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：
試劑AIV-H3 反應液酶液
用量19μL1μL
將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，20μL/管,。
3.加樣（樣本處理區(qū)）
將步驟 1 提取的核酸、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 5μL,，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋,，混勻,， 短暫離心。
4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）
4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內(nèi),；
4.2設置好通道,、樣品信息，反應體系設置為 25μL,；熒光通道選擇：
檢測通道（ReporterDye）FAM,，淬滅通道（QuencherDye）NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,， 選擇 None 即可,。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：
步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號
11 cycle50℃10min否
21 cycle95℃2min否
345 cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設定（請參照各儀器使用說明書進行設置，以分析 ABI7500 儀器為例）
反應結(jié)束后自動保存結(jié)果,，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實際情況自行調(diào)整，Start 值可設在 3～15,、End 值可設在 5～20,，使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期，陰性質(zhì)控品的擴增曲線平直或低于閾值線）,，點擊 Analyze 自動獲得分析結(jié)果,。
5.2結(jié)果判斷
陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,； 陰性：樣本檢測結(jié)果無 Ct 值,，且無特異性擴增曲線；
可疑：樣本檢測結(jié)果 40＜Ct 值≤45,，建議重復檢測,，如果檢測通道仍為 40<Ct 值≤45,，且曲線有明顯的增長曲線,，判定為陽性,，否則為陰性。
5.3質(zhì)控標準
陰性質(zhì)控品：無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示,；
陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯指數(shù)增長期,，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足,，否則實驗視為無效,。
6.檢測方法的局限性
1.樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理,、運送以及保存質(zhì)量有關,；
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,；
3.陽性對照,、擴增產(chǎn)物泄漏，會導致假陽性結(jié)果,；
4.病原體在流行過程中基因突變,、重組，會導致假陰性結(jié)果,；
5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會導致假陰性結(jié)果；
6.試劑運輸,，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果；
7.本檢測結(jié)果僅供參考,，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段,。
注意事項：
1.所有操作嚴格按照說明書進行；
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應自然融化,，完-全混勻并短暫離心,；
3.反應液應避光保存；
4.反應中盡量避免氣泡存在,，管蓋需蓋緊,；
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；
6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,，以免交叉污染,；
7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；
8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研,。
選擇我們的禽-流感病毒 H3 亞型(AIV-H3)PCR檢測試劑盒，就是選擇精準,、高效,、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航,！
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