目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌(SP/SG)PCR試劑盒
參考價(jià) | ¥ 2800 |
訂貨量 | ≥1盒 |
¥2800 |
≥1盒 |
更新時(shí)間:2025-03-19 10:18:40瀏覽次數(shù):56評(píng)價(jià)
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/盒 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | XY-D-0130 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | S.Gallinarum-Pullorum Nucleic Acid Detection Kit |
保存條件 | -20℃±5℃,避光保存 | 有效期 | 12個(gè)月 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
由沙門氏菌屬的某些致病性沙門氏菌引起的雞群細(xì)菌性傳染病稱為雞沙門氏菌病,一般分為雞白痢,、雞傷寒 和副傷寒三種病型,,其中以雞白痢和雞傷寒發(fā)病較多,危害較強(qiáng),。雞白痢是由雞白痢沙門氏菌(S.Pullorum)感染雞群引起的,,主要是侵害雛雞。2 周以下的雛雞發(fā)病后死亡率可達(dá) 40%-70%,,受感染的雛雞在 4-7 天死亡,,急性時(shí)可在 1-3 天死亡。雞傷寒-沙門氏菌(S.Gallinarum)感染雞群可引起雞傷寒病癥,,主要是感染成年雞,,雛雞有時(shí)也會(huì)被感染, 出殼后幾天開始發(fā)病,, 死亡率較高,。 現(xiàn)在, 這兩種致病菌統(tǒng)稱為雞- 雛沙門氏
(S.Gallinarum-Pullorum),沒有鞭毛,,不會(huì)運(yùn)動(dòng),,只會(huì)感染雞群,可存在于卵巢,、睪丸,、肝臟等器官中,能夠通過親代感染子代,,因此對(duì)養(yǎng)雞業(yè)的危害極大,。
本試劑盒適用于肝臟、脾臟等組織樣品以及腸內(nèi)容物樣品,,糞便樣品,,泄殖腔拭子樣品等樣品中的雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌,用于雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌感染的輔助診斷,。
產(chǎn)品特點(diǎn):
一,、嚴(yán)格的質(zhì)控體系
所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,,讓您的檢測(cè)結(jié)果更可信,。
二、高靈敏度
產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化,,具有出色的靈敏度,,能夠檢測(cè)到極微量的雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌核酸,不放過任何潛在的感染風(fēng)險(xiǎn),。
三,、便捷操作
綜合各項(xiàng)指標(biāo)特性,研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結(jié)果分析,,每一步都有清晰的操作指南,即使是新手也能輕松上手,。
四、多樣的檢測(cè)驗(yàn)證樣本
該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測(cè)驗(yàn)證,,適用于肝臟,、脾臟等組織樣品以及腸內(nèi)容物樣品,糞便樣品,,泄殖腔拭子等多種常見樣本,,滿足不同的檢測(cè)需求。
五,、個(gè)性化定制服務(wù)
專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)可為您提供個(gè)性化的定制服務(wù),,根據(jù)您的特殊需求進(jìn)行產(chǎn)品優(yōu)化和調(diào)整,為您提供更貼合實(shí)際的檢測(cè)方案。
六,、豐富的產(chǎn)品線
除了雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌(SP/SG)PCR試劑盒,,我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,滿足您在不同領(lǐng)域的檢測(cè)需求,。
七,、完善的售前售后服務(wù)
我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),在您購(gòu)買前為您提供詳細(xì)的產(chǎn)品咨詢和技術(shù)支持,,購(gòu)買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,,讓您無后顧之憂。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品規(guī)格
50T/盒,,可滿足一定規(guī)模的檢測(cè)需求,。
檢測(cè)方法
實(shí)時(shí)熒光PCR,具有快速,、準(zhǔn)確,、靈敏等優(yōu)點(diǎn)。
適用儀器
ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀,。
標(biāo)本采集
組織樣品:選擇具有典型臨床癥狀的病死雞,無菌取其肝臟,、脾臟等組織樣品,,放置于無菌容器內(nèi),標(biāo)記好 組織名稱和采樣日期,,冷藏運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè),。
肛拭子樣品:采集肛拭子樣品時(shí),取無菌棉拭子插入畜禽肛-門或泄殖腔中,,旋轉(zhuǎn) 2 圈~3 圈,,刮取直腸黏液或糞便,放入裝有 30%甘油磷酸鹽緩沖液或半固體培養(yǎng)基中送檢,。
腸內(nèi)容物樣品:取腸內(nèi)容物時(shí),,應(yīng)燒烙腸壁表面,用吸管中扎穿腸壁,。從腸腔內(nèi)吸取內(nèi)容物放入盛有滅菌的
30%甘油磷酸鹽緩沖液或半固體培養(yǎng)基中送檢或?qū)в屑S便的腸管兩端結(jié)扎,,從兩端剪斷送檢。
糞便樣品:應(yīng)選新鮮糞便至少 10g,,運(yùn)送糞便樣品可用帶螺帽容器或滅菌塑料袋,,不得用帶皮塞的試管,。
保存和運(yùn)輸
采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過 24 h;若需長(zhǎng)期保存,,應(yīng)放置-70℃以下保存,,凍融不超過 3 次。
使用方法:
1.樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1樣本前處理
組織樣品:每份組織分別從不同的位置稱取樣品約 1g,,手術(shù)-剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,,加入 1.5mL生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中,,8000rpm 離心 2min,,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中;水樣便 13000rpm 離心 2min,,去盡上清,;其它樣品處理參考 NY/T541-2016。
1.2核酸提取
推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進(jìn)行核酸提取,,請(qǐng) 按照試劑說明書進(jìn)行操作,。
2.試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽性對(duì)照,;反應(yīng)管數(shù)每滿 10 份,,多配制 1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑SP/SG 反應(yīng)液酶液
用量(樣本數(shù)為 N)19μL1μL
將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,,20μL/管,。
3.加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的核酸、陽性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 5μL,,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,,混勻,,短暫離心,。
4.PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
4.1將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);
4.2設(shè)置好通道,、樣品信息,,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL,;
熒光通道選擇:檢測(cè)通道(Reporter Dye)FAM,, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,,ABI 系列儀器請(qǐng)勿選擇 ROX
參比熒光,選擇 None 即可,。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟循環(huán)數(shù)溫度時(shí)間收集熒光信號(hào)
11 cycle95℃2min否
245 cycles95℃15sec否
60℃30sec是
5.結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設(shè)定(請(qǐng)參照各儀器使用說明書進(jìn)行設(shè)置,以分析 ABI7500 儀器為例)
反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果,,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值(用戶可根據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整,,Start 值可設(shè)在 3~15、End 值可設(shè)在 5~20,,使閾值線位于擴(kuò)增曲線指數(shù)期,,陰性質(zhì)控品的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線),點(diǎn)擊 Analyze 自動(dòng)獲得分析結(jié)果,。
5.2結(jié)果判斷
陽性:檢測(cè)通道 Ct 值≤40,,且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線; 陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>40 或無 Ct 值,。
5.3質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品:無特異性擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示,;
陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期,且 Ct 值≤32,; 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足,,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。
6.檢測(cè)方法的局限性
1.樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集,、處理,、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);
2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,,會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果,;
3.陽性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,,會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果,;
4.病原體在流行過程中基因突變、重組,,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果,;
5.不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果,;
6.試劑運(yùn)輸,,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果,;
7.本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。
注意事項(xiàng):
1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,;
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,,完-全混勻并短暫離心;
3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存,;
4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,,管蓋需蓋緊;
5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服,;
6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,,以免交叉污染,;
7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;
8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理,。
9.本產(chǎn)品僅供科研。
選擇我們的雞白痢/雞傷寒-沙門氏菌(SP/SG)PCR試劑盒,,就是選擇精準(zhǔn),、高效、可靠的檢測(cè)方案,,為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,!
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)