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超微量分光光度計(jì)的工作原理及應(yīng)用

時(shí)間:2025/3/18閱讀:116
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1. 引言

超微量分光光度計(jì)(Nano spectrophotometer)是一種基于紫外-可見光(UV-Vis)分光光度法的高精度檢測(cè)儀器,廣泛用于生物醫(yī)學(xué),、環(huán)境分析和材料科學(xué)等領(lǐng)域,。其主要優(yōu)勢(shì)在于可測(cè)量極微量樣品(0.5–2 µL),,無需比色皿,,大大降低了樣品損耗,。本文將詳細(xì)介紹其工作原理及應(yīng)用,。

2. 工作原理

2.1 光源與光譜測(cè)量

超微量分光光度計(jì)通常采用氙燈或LED作為光源,,覆蓋200–900 nm的波長范圍。光束穿過待測(cè)樣品后,,未被吸收的部分由檢測(cè)器(如光電二極管或CCD陣列)接收,,以計(jì)算樣品的吸光度。

2.2 比爾-朗伯定律

光吸收特性遵循比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law):

其中:

  • 為吸光度

  • 為摩爾消光系數(shù)(與物質(zhì)特性相關(guān))

  • 為溶液濃度(mol/L)

  • 為光程長度(cm)

超微量分光光度計(jì)通常采用固定光程(如0.5 mm 或 1 mm),,可直接計(jì)算樣品濃度,,無需額外稀釋。

2.3 樣品檢測(cè)方式

與傳統(tǒng)分光光度計(jì)不同,,超微量分光光度計(jì)采用納米樣品平臺(tái)(NanoDrop技術(shù)),,通過表面張力固定微量液滴(如1 µL),無需比色皿,,從而減少樣品浪費(fèi),。

3. 主要應(yīng)用

3.1 核酸檢測(cè)

  • DNA/RNA濃度測(cè)定:通過測(cè)量260 nm波長的吸光度(A260)計(jì)算核酸濃度。

  • 純度評(píng)估:常用A260/A280比值(≈ 1.8 表示純DNA,,≈ 2.0 表示純RNA)判斷蛋白質(zhì)污染,。

3.2 蛋白質(zhì)分析

  • 通過280 nm波長測(cè)定蛋白質(zhì)吸光度(A280),。

  • 利用布拉德福德法(Bradford Assay)或雙縮脲法(BCA Assay)進(jìn)行定量分析。

3.3 其他應(yīng)用

  • 細(xì)胞培養(yǎng)液的濃度測(cè)定

  • 納米材料溶液的光學(xué)特性分析

  • 環(huán)境樣品(如水污染物)的檢測(cè)

4. 結(jié)論

超微量分光光度計(jì)以其高靈敏度,、低樣品需求和便捷操作的特點(diǎn),,在生命科學(xué)和材料研究領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。隨著技術(shù)的發(fā)展,,其檢測(cè)精度和自動(dòng)化水平將進(jìn)一步提高,,為科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供更加高效的分析工具。

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