諾博萊德 RNAsafe 無(wú)液氮 RNA 樣品保存液

RNAsafe 無(wú)液氮 RNA 樣品保存液

目錄號(hào)：91115

產(chǎn)品內(nèi)容

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

RNAsafe 是一種水相的,，無(wú)毒的組織保存液體，可以迅速滲入新鮮組織細(xì)胞的胞漿中，在非凍狀態(tài)下原位穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞內(nèi)的RNA,。適用于動(dòng)物組織（心,，肝，腎,，肌肉,，睪丸，腦,，脾等）,、培養(yǎng)細(xì)胞、RNA 病毒,、果蠅,、細(xì)菌、白細(xì)胞,、全血,、一些植物組織等。

特別適合野外和臨床采集樣本,，無(wú)需攜帶液氮,，浸入RNAsafe后，新鮮組織細(xì)胞中RNA可以完好地在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一個(gè)月, 在-20℃或-80℃下長(zhǎng)期保存,。RNA 病毒樣品(如HCV 和HIV)可在37℃保存一個(gè)月,。

產(chǎn)品特點(diǎn)

操作容易：將組織jian成適當(dāng)大小，浸沒(méi)在RNAsafe中即可使其RNA不被降解,。

無(wú)需液氮：使樣品的保存不需液氮干冰或-80℃冰箱 尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規(guī)模采集,。

方便運(yùn)輸：處理過(guò)的樣品能在25℃保存一周，使樣品郵寄和運(yùn)輸變得容易,。

多次凍融: 經(jīng)RNAsafe處理的樣品可反復(fù)凍融多次,，不影響提取的RNA 質(zhì)量。

可比性強(qiáng): 能減少重復(fù)實(shí)驗(yàn)中的誤差,，對(duì)大規(guī)?；虮磉_(dá)譜的分析尤其有用。

兼容性廣: 多種總RNA提取試劑都可以用來(lái)提取保存在RNAsafe內(nèi)的樣品,。還可直接用于組織切片免疫學(xué)和流式細(xì)胞分析而不影響RNA提取的質(zhì)量,。

一、如何使用RNAsafe：

RNAsafe只用于新鮮組織,，浸泡入RNAsafe前禁止冷凍組織,。只需要迅速將新鮮組織jian成長(zhǎng)，寬,，高任意一邊厚度<0.5厘米浸泡入RNAsafe即可（只要有一邊厚度不超過(guò)0.5厘米,，RNAsafe可以迅速滲透,，其它兩邊的尺寸并不重要）。將新鮮組織浸泡在5倍體積的RNAsafe中,，按要求存放在適當(dāng)?shù)臏囟取?/span>

1. 動(dòng)物組織

RNAsafe并不破壞或者溶解組織結(jié)構(gòu),，因此浸泡在RNAsafe中達(dá)到滲透平衡的組織可以從RNAsafe中取出，然后切成更小的塊,，然后放回到RNAsafe中下次繼續(xù)使用,。小器官如小鼠肝，腎,，和脾不需要剪切,，可以完整的存放在RNAsafe中。

2. 植物組織

很多植物組織直接浸泡入RNAsafe即可,，有的植物有天然滲透屏障如臘質(zhì)保護(hù)層,，需要先破壞掉臘質(zhì)層，便于RNAsafe滲透,。

3. 組織培養(yǎng)細(xì)胞

細(xì)胞吹打下來(lái)后,，離心收集細(xì)胞,棄上清，用冰浴的PBS緩沖液洗一次去除殘留培養(yǎng)液,。將細(xì)胞懸浮在少量PBS緩沖液中,。加入五到十倍體積RNAsafe, 混均。

4. 血和血漿

和紅細(xì)胞和血清分離的白細(xì)胞可以和組織培養(yǎng)細(xì)胞一樣的保存,。RNAsafe也可以保存抗凝全血,，血清和血漿。對(duì)于全血加入3倍體積RNAsafe,，混勻,。

5. 酵母

離心收集3X108的細(xì)胞（>12，000g離心兩分鐘）,，立刻將細(xì)胞團(tuán)重懸在0.5~1 ml 的RNAsafe中,。酵母細(xì)胞可以保存在RNAsafe中25℃8小時(shí)或者4℃一個(gè)星期。如果要保存存更長(zhǎng)時(shí)間,，將酵母細(xì)胞在RNAsafe中放置一個(gè)小時(shí)后,， 再次于>12,000g離心5分鐘，將酵母細(xì)胞團(tuán)放入液氮瞬時(shí)冷凍后放置于–80℃儲(chǔ)存,。

6. 細(xì)菌

細(xì)菌并不能在RNAsafe 中生長(zhǎng),，但是RNAsafe并不破壞細(xì)菌，E. coli在4℃ 保存一個(gè)月仍舊可以提出完整的RNA,。

二,、RNAsafe中樣本的存放：

1. 存放在–80℃

文檔樣品長(zhǎng)期保存用。將RNAsafe中樣本放置于4℃過(guò)夜,，然后將樣本撈出,，盡量去除干凈RNAsafe液體，然后放置于–80℃. 對(duì)于組織培養(yǎng)細(xì)胞,，則不需要去除RNAsafe,，直接冷凍于–80℃，并不會(huì)裂解細(xì)胞,。樣品使用時(shí)可以在室溫融化,，并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產(chǎn)量。

2. 存放在–20℃

將RNAsafe中樣本放置于4℃過(guò)夜,，然后轉(zhuǎn)移到–20℃,。在–20℃樣品并不會(huì)被冰凍，但是可能會(huì)形成一些結(jié)晶,，這并不會(huì)影響將來(lái)的RNA提取,。樣品使用時(shí)可以在室溫融化，并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產(chǎn)量,。

3. 存放在4℃

樣本可以在4℃存放一個(gè)月,。

4. 存放于25℃

存放于25℃樣本的RNA在一周內(nèi)保持完整，保存兩周的樣品RNA有輕微降解,，勉強(qiáng)能用于northern analysis, 但是質(zhì)量足夠用于nuclease protection assay or RT-PCR analysis,。

5. 存放于37℃

存放于37℃樣本的RNA在24小時(shí)內(nèi)保持完整，3天的時(shí)候有部分降解,。

三,、RNAsafe 保存樣本的 RNA 提取：

將樣本從RNAsafe中取出,，RNAsafe可以直接倒入水池,，用自來(lái)水沖洗即可，不需特殊處理,。

1. 組織

需要用干凈鑷子將樣本從RNAsafe中撈出,，用吸水紙稍稍吸去殘留的RNAsafe后，可以和新鮮組織一樣按照液氮研磨,，然后勻漿處理的標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行提取RNA,。

2. 細(xì)胞

對(duì)于儲(chǔ)存在RNAsafe中的細(xì)胞有兩種選擇。一是去除RNAsafe后提取RNA, 另一個(gè)是直接從細(xì)胞和RNAsafe的混合物提取,。

a. 去除 RNAsafe 后提取 RNA

存放于RNAsafe中的細(xì)胞變得不那么脆弱,，可以承受較高的離心速度而不被裂解。我們有在5000g離心成功收集細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn),，由于每種細(xì)胞的強(qiáng)度不一樣,， 可以先用不重要的細(xì)胞做個(gè)預(yù)試驗(yàn)，以保證在使用的速度下離心不會(huì)破壞細(xì)胞,。另一個(gè)選擇是在離心前加等體積的

PBS稀釋RNAsafe和細(xì)胞的混合物,，以減少溶液的密度,，使細(xì)胞溶液可以沉淀下來(lái)。

b. 不去除 RNAsafe,，直接提取 RNA也可以直接加10倍體積的一步法提取試劑（如RNAzol,，Trizol reagent）到細(xì)胞和RNAsafe的混合物，然后按照正常步驟操作,。

相關(guān)產(chǎn)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)

RNAsafe無(wú)液氮RNA樣品保存液（RNAlater）