諾博萊德 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution

AO染色液(1mg/ml)   細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法

產(chǎn)品貨號(hào)：CA9921

產(chǎn)品名稱：AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution

英文名稱：AO Stain Solution

產(chǎn)品規(guī)格：10ml

產(chǎn)品簡介：

儲(chǔ)存條件：2-8℃,，避光,，有效期6個(gè)月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderCA9921 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution屬于三環(huán)雜芳香燃料,，可以標(biāo)記DNA,、RNA，屬于異染性熒光染料,。該染料具有膜通透性,，能透過細(xì)胞膜，使核DNA和RNA染色,。因此AO常用于細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA進(jìn)行檢測(cè),。AO與核酸結(jié)合方式主要有：1、插入性結(jié)合,，AO嵌入核酸雙鏈的堿基對(duì)之間,，這種結(jié)合方式主要為AO與DNA的結(jié)合，其熒光發(fā)射峰為530nm,，激發(fā)后呈綠色熒光,；2、靜電吸引,，帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負(fù)電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合,，這種結(jié)合方式主要為AO與RNA的結(jié)合，其熒光發(fā)射峰為640nm,，激發(fā)后呈紅色熒光,，少量結(jié)合會(huì)呈桔黃色或桔紅色熒光,。因此，AO嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色,，與DNA單鏈或RNA結(jié)合時(shí)發(fā)桔黃色或橙紅色熒光,。

AO染色液(1mg/ml)為儲(chǔ)存液，使用時(shí)應(yīng)稀釋到合適濃度后使用,。染色后在熒光顯微鏡下觀察,，AO可透過正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光,；而在凋亡細(xì)胞中,，因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體,。AO使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片顆粒,；而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。AO染色常與EB染色合用雙染,，因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,，由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞,。

自備材料：

1,、熒光顯微鏡

2,、低速離心機(jī)

3,、PBS

 4、細(xì)胞計(jì)數(shù)板

5,、載玻片,、蓋玻片

操作步驟(僅供參考)：

1、收集細(xì)胞(采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),，應(yīng)先固定細(xì)胞),，用PBS清洗細(xì)胞1次，計(jì)數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至106/ml,。

2,、取適量的細(xì)胞懸液，加入AcridineOrangeStain(1mg/ml),，使AO終濃度為8.5～17μg/ml,，輕輕混勻。

3,、室溫避光染色15～20min,，滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細(xì)胞儀分析。

4,、熒光顯微鏡下觀察(激發(fā)濾光片波長488nm,，阻斷濾光片波長515nm)，計(jì)數(shù)并拍照。

染色結(jié)果

正常細(xì)胞：細(xì)胞被均勻染成黃綠色熒光

凋亡細(xì)胞：染色質(zhì)濃縮,，細(xì)胞核碎裂成點(diǎn)狀,，被染成大小不一、致密濃染的綠色顆粒

注意事項(xiàng)：

1,、Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破膜劑,，較少單獨(dú)使用。

2,、AO常與EB染色合用,，可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞,。

3,、如有低溫離心機(jī)進(jìn)行離心效果更佳。

4,、操作過程中應(yīng)注意減少試劑暴露于強(qiáng)光下的時(shí)間,。

5、試劑有一定毒性,，請(qǐng)小心操作,。

6、為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

AO染色液(1mg/ml)   細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法

產(chǎn)品訂購信息

CA9921 AO染色液(1mg/ml)AO Stain Solution  10ml