諾博萊德 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒 細(xì)胞

產(chǎn)品貨號：BC9963

產(chǎn)品名稱：氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

英文名稱：Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品別名：氧化型gu胱甘肽含量測定試劑盒/GSSG Kit 氧化型gu胱甘肽（GSSG）含量測定試劑盒/氧化型gu胱甘肽（GSSG）含量測試盒

檢測方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條件：Store at 2-8℃,，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderBC9963 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit是gu胱甘肽(GSH)的化形式,，又稱為二硫代gu甘肽,，是兩分子的gu胱甘肽氧化而成,。GSSG 會(huì)被gu胱甘肽還原酶還原成GSH,，因此機(jī)體中大多數(shù)是以還原型形式存在,。測定細(xì)胞內(nèi)GSH 和GSSG含量以及GSHGSSG比值,，能夠很好地反映細(xì)胞新處的氧化還原狀態(tài),。本試劑盒利用gu胱甘肽能和5.5-二硫代-雙-(2-硝基苯甲酸)(5.5'-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB)反應(yīng)產(chǎn)生 2-硝基-5-巰基苯甲酸,，2-硝基-5-巰基苯甲酸在波長 412nm 處具有最大光吸收的特點(diǎn),，通過 2-乙烯吡啶抑制樣本中原有的還原型gu胱甘肽，然后利用gu胱甘肽還原酶將GSSG還原為GSH,，借此測定氧化型gu胱甘肽的含量,。

技術(shù)指標(biāo):

*低檢出限:3.2llHg/mL

線性范圍:3.9-125 ug/mL

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、分析天平,、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱,、移液器,、微量玻璃比色皿/96孔板、勻漿器/研缽/細(xì)胞超聲破碎儀,、冰和蒸餾水,。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,，具體比例可以參考文獻(xiàn))

1,、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織，加入1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿(勻漿器/研缽提前放冰上預(yù)冷),。12000g,，4℃離心10min，取上清液放置于4℃待測,。若暫時(shí)不能完成測試可放于-80℃C保存(可保存3天),。

2、細(xì)菌,、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(106個(gè)):試劑一體積(mL)為5~10:1的比例(建議5百萬細(xì)胞加入1mL 試劑一),，反復(fù)凍融2-3次(可在液氮中凍結(jié)、37℃℃水浴中溶解)或者冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率200w,，超聲 3s,間隔10s,，重復(fù)30次)，12000g,，4C離心10分鐘,，取上清置于冰上待測。若暫時(shí)不能完成測試可放于-80℃保存(可保存3天),。

3,、血液處理

血漿:將收集的抗凝血于4℃，600g離心10分鐘,，吸取上層血漿到另一支試管中,，加入等體積的試劑一，沸水浴 5min(纏封口膜,，防止爆蓋),。之后I2000g，4℃離心 10 分鐘，將上清移入新的試管中放置于 4℃待測,，若暫時(shí)不能完成測試可放于-80C保存(可保存3天),。

血細(xì)胞:將收集的抗凝血于4℃，600g離心10分鏟,，棄去上層血漿用3倍體積的PBS 清洗3次(用PBS重懸血細(xì)胞,，600g離心 10分鐘)，加入等體積試劑一,，沸水浴5min(纏封口膜,，防止爆蓋)。之后12000g,，4℃離心10分鐘,，吸取上清放于4℃待測，若暫時(shí)不能完成測試可放于-80℃保存(可保存3天),。

注意事項(xiàng):

1.若不確定樣本中 GSSG 含量的高低,，可稀釋幾個(gè)梯度后再進(jìn)行測量。

2. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值,，可以增加樣云量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定,。

3.因?yàn)樵噭┮恢泻械鞍踪|(zhì)沉淀劑,，因此上清液不能月于蛋白濃度測定,。如測定蛋白含量，需另取組織,。

氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒 細(xì)胞

產(chǎn)品訂購信息

BC9963 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit  100T/96S