諾博萊德  全血基因組DNA提取系統(tǒng)（沉淀法）Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)

全血基因組DNA提qu系統(tǒng)（沉淀法） 質(zhì)粒提取

產(chǎn)品貨號：D9638

產(chǎn)品名稱：全血基因組DNA提取系統(tǒng)（沉淀法）Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)

英文名稱：Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)

產(chǎn)品規(guī)格：50T/200T

產(chǎn)品簡介：

儲存條件：RT,，復(fù)檢期1年

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderD9638  全血基因組DNA提取系統(tǒng)（沉淀法）產(chǎn)品適用于處理新鮮的或已經(jīng)添加抗凝劑的血液樣品,，采用異丙醇沉淀方法，操作簡便,，尤其適合大量提取血液基因組DNA,。提取的DNA可用于PCR、酶切等常規(guī)分子生物學(xué)實驗,。

本產(chǎn)品使用前請根據(jù)使用量將10×紅細(xì)胞裂解液用水稀釋成1×的即用型紅細(xì)胞裂解液,。

操作步驟：

以1mL全血為例

1.樣品的處理：在血液中加入3倍體積的1×紅細(xì)胞裂解液(請確認(rèn)已經(jīng)稀釋過)，充分顛倒混勻,，12000rpm離心1min(如為大量提取并且為大離心機(jī),，可11000rpm離心5min)，小心吸去上清,，再加入2倍體積的1×紅細(xì)胞裂解液,，用移液器輕輕吹打沉淀，充分混勻,，離心,，棄上清，沉淀為白細(xì)胞,。

2.向沉淀中加500μL白細(xì)胞裂解液,，振蕩或者用移液器吹打至che底混勻。65℃水浴10-20min,，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,，直至溶液較為清澈看不見明顯細(xì)胞為止。

3.加入500μL蛋白沉淀液,，充分顛倒混勻,，此時會出現(xiàn)白色沉淀，65℃水浴5min,，12000rpm離心5min,，小心吸取上清(不要吸到下層沉淀或漂浮不溶物)，轉(zhuǎn)移到干凈離心管中,，如還有沉淀物,，可再次離心。

4.在上清中加入1mL異丙醇,，混勻,。12000rpm離心5min，可看到管底有少量白色DNA沉淀,，棄掉上清。

5.向離心管中加入1mL 75%乙醇,，12000rpm離心5min,，棄去上清液?？稍俅味虝弘x心用移液器去除殘余上清,。

6.將離心管敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,，否則乙醇可能影響后續(xù)的實驗如酶切,、PCR等,。

7.向離心管中加入100-300μL DNA溶解液,，室溫放置讓DNA自然溶解。如果DNA難于溶解,，可室溫放置過夜或?qū)㈦x心管置于50-60℃水浴中水浴加熱5min。

注意事項：

1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,，否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

2.若試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果,。

3.DNA濃度及純度檢測：得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān),?；厥盏玫降腄NA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度,。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰,，OD260值為1相當(dāng)于大約50μg/mL雙鏈DNA,、40μg/mL單鏈DNA,。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9,，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,，而使用去離子水,，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值,，但并不表示純度低,。

全血基因組DNA提qu系統(tǒng)（沉淀法） 質(zhì)粒提取

產(chǎn)品訂購信息

D9638  全血基因組DNA提取系統(tǒng)（沉淀法）Blood Genomic DNA Extraction Kit (Ethanol precipitation)  50T/200T