諾博萊德  動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒質(zhì)粒提取

產(chǎn)品貨號：D9588

產(chǎn)品名稱：動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

英文名稱：Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

儲存條件：酶附件-20℃,，其它試劑RT，復(fù)檢期1年

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

   NobleRyderD9588  動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng),，提取組織和細胞的基因組DNA,。 離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司te有新型材料,，能夠高效、專一吸附DNA,，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細胞中其他有機化合物,。 提取的基因組DNA片段大，純度高,，質(zhì)量穩(wěn)定可靠,。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作，包括酶切,、 PCR,、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實驗,。

操作步驟：

1. 樣品的處理：

(1) 細胞：取1×106-1×107個懸浮培養(yǎng)細胞,，12000rpm離心1min收集細胞，貼壁細胞先用yi蛋白酶消化處理,，再用預(yù)冷的PBS吹打成細胞懸液,，然后12000rpm離心1min收集細胞，盡量除去上清,，加200μL溶液A,，振蕩至che底混勻。

(2) 組織：組織量不宜過大,，一般不要超過25mg,，可以使用勻漿器勻漿，最好用液氮研磨成粉末狀,，再用預(yù)冷的PBS或無菌水充分懸浮,，然后12000rpm離心1min收集細胞，盡量除去上清,，加200μL溶液A,，振蕩至che底混勻。

2. 向懸浮液中加入2μL RNase A,，55℃放置5min,。

3. 加入20μL的蛋白酶K，充分顛倒混勻,，56℃水浴消化,，細胞消化時間較短，組織消化時間較長,，一般需要1-3個小時才能完成（鼠尾需要消化過夜）,。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次，直至樣品消化wan全為止,。消化wan全的指標(biāo)是：液體清亮及粘稠,。

4. 加入200μL體積溶液B,，充分顛倒混勻，如出現(xiàn)白色沉淀,，可在75℃放置15-30min,，沉淀即會消失，不影響后續(xù)實驗,。如溶液未變清亮,，說明樣品消化不che底，可能導(dǎo)致提取的DNA量少及不純,，還有可能導(dǎo)致堵塞吸附柱,。

5. 加入200μL無水乙醇，充分振蕩混勻15s,，溶液變清亮,。此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響DNA的提取,，將溶液和絮狀物都加入吸附柱中,。

6. 12000rpm 離心1min，棄廢液,，將吸附柱放入收集管中,。

7. 向吸附柱中加入600μL 漂洗液（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm 離心1min,，棄廢液,，將吸附柱放入收集管中。

8. 重復(fù)步驟7,。

9. 12000rpm 離心 2min,，將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,，否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切,、PCR等。

10. 將吸附柱放入一個干凈的離心管中,，向吸附膜中央懸空滴加50-200μL經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,，室溫放置5min，12000rpm離心2min,。

11. 可將離心所得洗脫液再加入吸附柱中,，12000rpm 離心 2min，即可得到高質(zhì)量的基因組DNA,。

注意事項：

1. 試劑盒拆封后,，RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。

2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,，否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降,。

3. 如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,，可在65℃水浴中重新溶解后再使用,，不影響效果,。

4. 洗脫緩沖液的體積最好不少于50μL，體積過小會影響回收效率：洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右（可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍）,，pH值低于7.0會降低洗脫效率。

動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒質(zhì)粒提取

產(chǎn)品訂購信息

D9588  動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit  50T

D9588  動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit  100T