諾博萊德 SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)

SDS-PAGE濃縮膠緩沖液(4×)   凝膠配制

產(chǎn)品簡介：

本試劑為配制SDS-PAGE濃縮膠緩沖液，可用于配制各種濃度的變性及非變性PAGE凝膠,，方便,、快捷。產(chǎn)品中已加入10%SDS,，使用時不用另外加入,。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、 凝膠模具

2,、 Acr-Bis(30%,29:1)

3,、 10%APS(過硫酸銨)

4、 TEMED

5,、 蒸餾水

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

操作步驟(僅供參考)：

根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配制濃度,，優(yōu)良膠濃度請參考附表1。

(一)灌制分離膠(各試劑使用量請參考附表2)

1,、參照凝膠模具說明書,，裝配好凝膠模具。(注：加入上層篩板有助于加樣時保持填料與樣品均勻接觸,，是否加入上層篩板可根據(jù)實際情況選擇,。)

2、將不同體積的Acr-Bis(30%,29:1),、分離膠緩沖液和蒸餾水在小燒杯或試管中混合,。

3、加入10%APS和TEMED,，輕輕攪拌使其混勻,，避免產(chǎn)生氣泡。

4,、在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液(對于mini-gel，凝膠液加至約距前玻璃板頂端

1.5 cm或距梳齒約0.5cm即可)，然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1～2cm的水層,，

使凝膠表面保持平整,。

6、 靜置30～60min,，待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個清晰的界面后,，表面凝膠已聚合。

(二)灌制濃縮膠(各試劑使用量請參考附表3)

1,、小心傾倒出覆蓋在分離膠上的水層,。

2、將不同體積的Acr-Bis(30%,29:1),、濃縮膠緩沖液和蒸餾水在一個小燒杯或試管中混

合,。

3、加入10%APS和TEMED,，輕輕攪拌使其混勻,，避免產(chǎn)生氣泡。

4,、將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,，直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端。

5,、將梳子插入凝膠內(nèi),，避免產(chǎn)生氣泡。

6,、靜置10~20min,，等待濃縮膠聚合。

7,、待凝膠聚合后,，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔,。

8,、進行常規(guī)電泳操作。

注意事項：

1,、 過硫酸銨配制成10%溶液后應當-20℃保存,。應盡量減少室溫存放時間以防失效。有效避免失效的方法是分成小份,，-20℃保存,，用2~3次，剩余的棄用,，亦可4℃保存幾天,。

2、 TEMED易揮發(fā)，使用后請蓋緊瓶蓋,。另外凝膠凝聚的速度和溫度及光照關系密切,，可通過適當調(diào)節(jié)TEMED的用量，控制在不同的室內(nèi)環(huán)境下凝膠凝聚的速度,。

3,、 配制聚丙烯凝膠的過程中，如果室溫較低,，可以置于37℃放置,，加速凝固。

4,、 Acr-Bis(30%,29:1)有輕微神經(jīng)毒性,，請小心操作。

5,、 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期： 3個月有效,。

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