諾博萊德 普通RIPA裂解液(組織/細(xì)胞)

普通RIPA裂解液(組織/細(xì)胞) 樣本裂解

產(chǎn)品貨號(hào)：R8808

產(chǎn)品名稱(chēng)：普通RIPA裂解液(組織/細(xì)胞),蛋白提取試劑盒,RIPA buffer

產(chǎn)品規(guī)格：100ml /500ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

別名：蛋白提取試劑盒

英文名稱(chēng)：RIPA buffer

中文名稱(chēng)：普通RIPA裂解液(組織/細(xì)胞)

規(guī)格：100ml ; 500ml

儲(chǔ)存條件：附件PMSF-20℃,，裂解液4℃,。有效期1年

     NobleRyder R8808普通RIPA裂解液(組織/細(xì)胞),蛋白提取試劑盒,RIPA buffer產(chǎn)品介紹

運(yùn)輸溫度：常溫運(yùn)輸

普通RIPA裂解液(組織/細(xì)胞)產(chǎn)品配有一支PMSF（100mM,，1.5ml）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：RIPA 組織/細(xì)胞裂解液是利用表面活性劑等來(lái)裂解細(xì)胞膜（包括核膜）,。本試劑提取的蛋白為可溶性總蛋白。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

使用說(shuō)明 ：

如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀,，請(qǐng)放室溫半小時(shí)或者常溫水浴使沉淀溶解,。

根據(jù)使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,，使PMSF的最終濃度為1mM,，混勻備用 （PMSF現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1,、樣品前處理：

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞,，按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液,，用手指輕彈懸浮細(xì)胞以充分裂解。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,，必需分裝成 5-10×105細(xì)胞/管，然后再裂解,。

c)對(duì)于組織樣品：把組zhi剪切成細(xì)小的碎片,。按照每20mg組織加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液

(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量) ,。

用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解,。

2,、后處理：

將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作,。

注意事項(xiàng)：

1,、使用本裂解液可以裂解細(xì)胞核，釋放出核蛋白的同時(shí),，也會(huì)將基因組一并釋放出來(lái),， 造成細(xì)胞裂解液粘稠，此時(shí)可以直接加入蛋白上樣緩沖液煮沸再離心,，離心后直接上樣電泳,； 若想測(cè)定濃度，可入加少量 SDS（1%）,，煮沸后離心測(cè)濃度,。

2、本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑,，所以不適合使用 Bradford 蛋白濃度測(cè)定試劑盒,，請(qǐng)選擇 BCA 法或者 Lowry 法檢測(cè)蛋白濃度。

3,、如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,，則可以通過(guò)超聲處理打碎打散粘稠狀物， 隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。

普通RIPA裂解液(組織/細(xì)胞) 樣本裂解

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

R8808普通RIPA裂解液(組織/細(xì)胞),蛋白提取試劑盒,RIPA buffer 100ml /500ml