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- EM0177 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):47更新時間:2025-04-16 16:21:19
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10^5 |
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貨號 | EM0177 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:EM0177
產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,,不可用于臨床診斷或治療,。
小鼠表皮成纖維細胞
小鼠表皮成纖維細胞分離自皮膚組織,;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成,。從基底層到表面可分為五層,即基底層,、棘層,、顆粒層、透明層和角質層,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長,,不聚集成團,;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細胞質透明,細胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
分離的小鼠表皮成纖維細胞采用先中性蛋白酶消化,、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
分離的小鼠表皮成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 | 含F(xiàn)BS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
傳代特性 | 可傳3-5代 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%,;CO2,,5% |
細胞培養(yǎng)狀態(tài) 發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
使用方法: 小鼠表皮成纖維細胞是一種貼壁細胞,,細胞形態(tài)程成纖維細胞樣,在我們標準操作流程下,,細胞可傳3-5代,;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。 客戶收到細胞后,,請按照以下方法進行操作,。
取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,、飽和濕度 的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
貼壁細胞傳代
吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次,;
添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng) 瓶底后,,吸出多余胰蛋白酶消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變 圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5m L,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基,。
細胞實驗 因原代細胞貼壁特殊性,,原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿 (如玻璃爬片、培養(yǎng) 板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,,避免細胞因沒 貼好影響實驗,;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2 ),,多聚懶氨酸PLL(0.1mg/ml), 明膠(0.1%),, 依據(jù)細胞種類而定 ,。 四、注意事項
培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。
傳代培養(yǎng)過程中,,胰酶消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),,便于和我們溝通;由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,詳盡 告知細胞的具體情況,,以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
該細胞只可用于科研,。 備注:由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
小鼠表皮成纖維細胞