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參考價: | 面議 |
- CM0069 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):52更新時間:2025-03-31 16:31:50
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
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貨號 | CM0069 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:CM0069
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
YAC-1小鼠淋巴瘤細(xì)胞
YAC-1是一個淋巴瘤,將Moloney白血病病毒(MLV)接種到新生A/Sn小鼠中生成。 細(xì)胞對NK細(xì)胞的活動敏感,,對NK細(xì)胞活性檢測十分有用。檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。
細(xì)胞特性
1) 來源:Moloney鼠科白血病毒(Mo-MuLV)感染,;淋巴瘤
2) 形態(tài):淋巴母細(xì)胞,懸浮生長
3) 含量:>1x106 細(xì)胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用,。
運輸和保存:干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系,。(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,,請拍照后及時聯(lián)系我們,。
2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基)。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,;雙抗,1%,。
2) 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
懸浮狀態(tài)下生長的細(xì)胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長狀態(tài),,一般情況下細(xì)胞密度維持在1×105~1×106個/mL(不同細(xì)胞對密度要求不同,,)可以維持細(xì)胞的正常生長。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm,,離心5min,,棄去上清,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3) 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用,。下面T25瓶為例,;
1. 細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),,來決定細(xì)胞的凍存密度,。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細(xì)胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清,。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱,、代數(shù),、日期等信息。
3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,,-80度冰箱中過夜,,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存,。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
注意事項:
1. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。
2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,,并會慢慢充滿液氮,。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害,。
YAC-1小鼠淋巴瘤細(xì)胞