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- BH3530 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):47更新時間:2025-03-18 13:18:00
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
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貨號 | BH3530 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:BH3530
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
4T1 是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌噙抗性細胞株,。當注射到BALB/c 小鼠中時,4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉(zhuǎn)移腫瘤,,可轉(zhuǎn)移到肺,,肝,淋巴結(jié)和大腦,,同時在注射部位形成始發(fā)灶,。誘導轉(zhuǎn)移時不需要摘除始發(fā)灶。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長與轉(zhuǎn)移特性與人體中的乳腺癌十分相近,。
4T1+RFP小鼠乳腺癌細胞+ 紅色熒光蛋白標記
細胞介紹
4T1 是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌噙抗性細胞株,。當注射到BALB/c 小鼠中時,4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉(zhuǎn)移腫瘤,,可轉(zhuǎn)移到肺,,肝,淋巴結(jié)和大腦,,同時在注射部位形成始發(fā)灶,。誘導轉(zhuǎn)移時不需要摘除始發(fā)灶。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長與轉(zhuǎn)移特性與人體中的乳腺癌十分相近,。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動物模型,。4T1-誘導的腫瘤在手術(shù)后及未手術(shù)情況下轉(zhuǎn)移的動力學相近,可以用作手術(shù)后及未手術(shù)模型,。 跟其他腫瘤模型相比,,由于4T1的抗6-硫鳥嘌噙特性,微小的轉(zhuǎn)移細胞團(少到僅僅1個)也可以在許多遠端器官中檢測到,。
該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因,。
細胞特性:
1)來源:小鼠乳腺癌
2)形態(tài):上皮細胞樣 貼壁生長
3)含量:>1x106細胞數(shù)
4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。
運輸和保存:干冰運輸及復蘇好存活細胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系。(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,,請拍照后及時聯(lián)系我們,。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù),。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況,。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,,可以對細胞進行傳代處理,。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收,。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1. 準備1640培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%; P/S雙抗,,1%,。
2. 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3. 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細胞處理:
1) 凍存細胞的復蘇::
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細胞,。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。下面T25瓶為例,;
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),,來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清,。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱,、代數(shù),、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,,-80度冰箱中過夜,,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。
注意事項:
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。
2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩,。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,,并會慢慢充滿液氮。解凍時,,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。
4T1+RFP小鼠乳腺癌細胞+ 紅色熒光蛋白標記