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供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	10 ×100ul
貨號	CC96101	應用領域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

DH10B感受態(tài)

產(chǎn)品簡介

DH10B 電擊感受態(tài)細胞只能用于電擊轉化，不能用于熱激轉化,。DH10B 菌株來源于 MC1061 菌株,，

mcrA、mcrBC 及 mrr 突變使 DH10B 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA (無論真

核生物還是原核生物的基因組 DNA 都能被高效的轉入 DH10B 中),。recA1 和 endA1 的突變有利于插

入 DNA 的穩(wěn)定和高純度質粒 DNA 的提取,。φ80dlacZ?M15 標記的存在使 DH10B 可用于藍白斑篩

選，rpsL 賦予其鏈霉素抗性,。 DH10B 感受態(tài)細胞適用于大質粒的構建或者各種文庫構建,，經(jīng)特殊

工藝制作，pUC18 質粒檢測轉化效率>1010cfu/μg DNA,。

產(chǎn)品組成

組分

DH10B 感受態(tài)細胞

10 × 50 μL

100 ×50μL

定制

基因型：F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697

galE15 galK λ- rpsL nupG

存儲條件

-80 ℃保存,；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質量控制

無外源質粒 DNA 殘留,；

電轉法轉化效率≥1010 cfu/μg pUC18 DNA,。

使用方法

1. 0.1cm 電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘，待其瀝干水分,，正置5分鐘,，

使乙醇充分揮發(fā)，待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,，壓實冰面，電極杯頂離冰面 0.5 cm 以方便蓋上杯

蓋,，冰中靜置 5 分鐘充分降溫,。

2. 取-80℃保存的 DH10B 電擊感受態(tài)細胞插入冰中 5 分鐘，待其融化,，加入目的 DNA (質?；蜻B接

產(chǎn)物)并用手將 EP 管底輕輕混勻，避免產(chǎn)生氣泡,，立即插入冰中,。

A. 測定轉化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的對照質粒 pUC18,；

B. 對于連接產(chǎn)物，請用乙醇沉淀 DNA 后加入適量 TE 緩沖液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重

懸,，DNA 濃度不超過 100ng/μl,，體積不超過 5μl/50μl 感受態(tài)。

3. 用 200 μl 槍頭將感受態(tài)-DNA 混合物快速移到電擊杯中,，避免產(chǎn)生氣泡,，蓋上杯蓋。

4. 啟動電轉儀,，設置參數(shù)：C=25 μF,，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此為 BioRad 電轉儀推薦參數(shù),，也可按

所用電轉儀推薦的參數(shù)操作）,，將電擊杯快速放入電轉槽中，電擊完成快速插入冰中,。

5. 2 分鐘后從冰中取出電擊杯,，放室溫，加入 700 μl 不含抗生素的無菌 S.O.C. 培養(yǎng)基（室溫）,，用

1ml 槍吹吸電擊杯底部數(shù)次混勻后,，轉移到 50ml 離心管（BD Falcon50ml 錐形離心管等），向離心

管中補加 S.O.C. 培養(yǎng)基至 5ml,。37℃,，225 rpm 復蘇 60 分鐘。

上海語純生物科技有限公司,，是由具有優(yōu)良生命科學,、生物技術背景人員共同創(chuàng)辦的技術企業(yè)。公司專注于原代細胞,、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑產(chǎn)品,，為高校、食品,、醫(yī)藥,、生物研究等領域提供相關技術支持和服務。

公司自成立以來通過不斷地科技創(chuàng)新,，產(chǎn)品研發(fā),，已為客戶提供定制化細胞產(chǎn)品以及完整的細胞培養(yǎng)解決方案，通過積極地探索,、研發(fā),、深化和豐富產(chǎn)品，目前基礎培養(yǎng)基產(chǎn)品種類多達200多種,，細胞系300多種,，原代細胞接近600種,。我們始終以“發(fā)展科學技術，關愛公眾生命健康"為動力,，通過技術創(chuàng)新,，廣泛吸納高科技人才，不斷完善產(chǎn)品體系,、豐富產(chǎn)品鏈,，積極拓展市場，擴充應用領域,，,，建立了具有市場競爭力的“語純"品牌。

注意事項

1,、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作；

2,、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果,，請務必按照建議的儲存條件進行保存；

3,、本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療。

DH10B感受態(tài)