FLS人成纖維樣滑膜細胞

人成纖維樣滑膜細胞（Fibroblast-like Synoviocytes,，F(xiàn)LS）是存在于滑膜組織中最重要的間充質(zhì)細胞之一,，具有成纖維細胞和成軟骨細胞的雙重特性。它們在維持關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,、分泌滑液以及在關(guān)節(jié)炎尤其是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）的發(fā)病機制中發(fā)揮核心作用,。

來源：人滑膜組織（健康或RA患者）
形態(tài)： 單層貼壁生長,，長梭形或不規(guī)則紡錘狀
注意事項：

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們,。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細胞狀態(tài),，同時給剛收到的細胞拍照（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù),。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況,。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收,，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的專用培養(yǎng)基6-8mL,，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,，可以對細胞進行傳代處理,。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收,。

1） 凍存細胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液,，專用培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1.吸去培養(yǎng)液,，加PBS清洗1-2遍，去PBS。加入0.25%胰酶2ml消化15秒,，去胰酶,。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱，靠殘余胰酶繼續(xù)消化細胞3-10分鐘直至細胞變圓（每3分鐘觀察一次,。）

2.加12ml專用培養(yǎng)基,，吹打均勻，即可分到2個T25培養(yǎng)瓶里,。（細胞1傳2,，若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板，建議先包被）

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。下面T25瓶為例,；

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù),，來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清,。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱,、代數(shù),、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,，-80度冰箱中過夜,，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。

備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。 

上海語純生物科技有限公司,，是由具有優(yōu)良生命科學(xué)、生物技術(shù)背景人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)企業(yè),。公司專注于原代細胞,、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品，為高校,、食品,、醫(yī)藥、生物研究等領(lǐng)域提供相關(guān)技術(shù)支持和服務(wù),。

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注意事項

1、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作,；

2、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果,，請務(wù)必按照建議的儲存條件進行保存,；

3、本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療,。

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