L929+LUC 小鼠成纖維細胞

 細胞介紹

1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結締組織),，細胞系L的克隆,。細胞系L是最早建立的連續(xù)培養(yǎng)細胞系之一，而clone 929是最早的克隆株,。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結締組織入脂肪組織中建立了親本細胞系L,。 第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了clone929。檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性,。

細胞特性

1） 來源：組織：皮下結締組織,；疏松結締組織及脂肪 品系：C3H/An

2） 形態(tài)：成纖維細胞，貼壁生長

含量：>1x106  細胞數(shù)

規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

 用途：僅供科研使用,。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系,。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1）收到細胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們,。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。               

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）MEM培養(yǎng)基+10%HS(馬血清）+1%P/S雙抗

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液，專用培養(yǎng)基重懸細胞,。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。

L929+LUC 小鼠成纖維細胞