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北京三藥枯草芽孢桿菌定量菌株Bacillus subtilis CMCC(B) 63 501產(chǎn)品介紹：

商品名稱：枯草芽孢桿菌菌珠

含量范圍：0.5~1.0×106cfu/顆

貯存條件：-20℃或-20℃以下

有 效 期：12 個(gè)月

菌株來源：本產(chǎn)品由中國(guó)醫(yī)學(xué)細(xì)菌保藏管理中心（National Center For Medical Culture Collections, CMCC）提供的 0 代菌種生產(chǎn),。

傳代次數(shù)：第 4 代

北京三藥枯草芽孢桿菌定量菌株Bacillus subtilis CMCC(B) 63 501使用示例：

1. 若接種方法為平板涂布法：

① 使用前將未開啟的西林瓶平衡至室溫,。

② 將 1.1mL 無菌生理鹽水或無菌水加入西林瓶中，蓋上瓶蓋,，靜置約 5~10s,，渦旋震

蕩 5~10s，或使用其它方法使其*溶解,。

③ 吸取 1mL 已溶解*的菌液,，加入 9mL 無菌生理鹽水中，混勻,，逐級(jí)進(jìn)行 10 倍

稀釋,，終使其含菌數(shù)約 500~1000cfu/mL,。

④ 吸取步驟③中 100µL 菌液（含量約為 50~100cfu），加至已凝固的無菌培養(yǎng)基平板

中,，再用無菌 L 型涂布棒將菌液沿同一方向在平板上涂抹均勻,，待菌液滲透入培養(yǎng)基

內(nèi)， 將平板倒置,，置于所需溫度培養(yǎng)即可,。

2. 若接種方法為液體接種或傾注平皿法：

① 使用前將未開啟的西林瓶平衡至室溫。

② 將 1.1mL 無菌生理鹽水或無菌水加入西林瓶中,，蓋上瓶蓋,，靜置約 5~10s，渦旋震

蕩 5~10s,，或使用其它方法使其*溶解,。

③ 吸取 1mL 已溶解*的菌液，加入 9mL 無菌生理鹽水中,，混勻,，逐級(jí)進(jìn)行 10 倍

稀釋，終使其含菌數(shù)約 50~100cfu/mL,。

④ 吸取步驟③中 1mL 菌液（含量約為 50~100cfu）,，加至相應(yīng)液體培養(yǎng)物中，置于所

需溫度培養(yǎng),?；蚴羌又翢o菌平皿中，注入 15~20mL 溫度不超過 45℃已融化的培養(yǎng)基,，

混勻,，凝固，倒置培養(yǎng),。

3. 若應(yīng)用于 “供試品計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)”（試驗(yàn)組,，以供試液體積為 10mL 為例）：

① 使用前將未開啟的西林瓶平衡至室溫。

② 將 1.1mL 無菌生理鹽水或無菌水加入西林瓶中,，蓋上瓶蓋,，靜置約 5~10s，渦旋震

蕩 5~10s,，或使用其它方法使其*溶解,。

③ 吸取 1mL 已溶解*的菌液，加入 9mL 無菌生理鹽水或相應(yīng)稀釋液中,，混勻,，逐

級(jí)進(jìn)行 10 倍稀釋，終使其含菌數(shù)約 5000~10000cfu/mL,。

④ 吸取步驟③中 100µL 菌液（含量約為 500~1000cfu）,，加至 10mL 已制備好的供試

液中（即供試液中含菌量約為 50~100cfu/mL）,，混勻。

⑤ 吸取步驟④中 1mL 菌液（含量約為 50~100cfu）,，加至無菌平皿中,，注入 15~20mL

溫度不超過 45℃已融化的培養(yǎng)基，混勻,，凝固,，倒置培養(yǎng)。