FLUOREYE是一種熒光檢測解決方案,，專為與現(xiàn)有系統(tǒng)無縫集成而設計,，無需額外空間或設備。它有兩個激發(fā)波長和兩個檢測波長,，可實現(xiàn)集成的熒光信號定量和后續(xù)均一化,，無需用戶干預,。在這里，我們展示FLUOREYE可用于測量被SYBR™ Safe（一種高靈敏度的熒光核酸染料）染色的活細胞熒光強度,，從而確定96孔板中培養(yǎng)的細胞的融合度,。因此，F(xiàn)LUOREYE將其用途擴展到細胞生物學領域,。在Hamilton自動化液體處理設備上使用FLUOREYE進行自動細胞融合度測量,，可以在96孔板中追蹤培養(yǎng)細胞的生長，而不需要顯微鏡,、精密的成像設備或復雜的分析軟件,。按照易操作的自動化工作流程，把細胞用SYBR™ Safe核酸染料（Invitrogen S33102）進行染色,，然后將培養(yǎng)板放在工作站臺面上進行分析,。這種方法減少了成本和用戶干預，同時提高了可重復性和通量,。

1. 在細胞檢測或細胞培養(yǎng)的自動化解決方案中,，它是一種測量細胞融合度的實用、經濟高效的工具,。

2. 無需動手就可以自動選擇合適的時間點開始細胞培養(yǎng)實驗,、傳代或進行細胞增殖實驗。

3. 高度可重復,、標準化和準確的細胞融合度測定方法,。

使用Hamilton FLUOREYE自動測量細胞融合度是傳統(tǒng)顯微鏡成像的一種高性價比的替代方法，也是哺乳動物細胞生長追蹤的一種無人值守,、易于整合的臺面式解決方案,。

在標準培養(yǎng)條件下，在添加了10%FBS（Gibco,，A5256801）的高糖DMEM（Gibco,L0101-500）培養(yǎng)基中培養(yǎng)HEK293細胞,。實驗前一天，對細胞進行計數(shù),，并將其接種在黑色96孔板（Greiner CELLSTAR 655090）中,。SYBR™ Safe染色和FLUOREYE測量在Hamilton Microlab STAR平臺上進行。為避免移液過程中細胞脫落,，每一步操作完成后,，孔中都要留出最少50µL的液體。用生長培養(yǎng)基將50µL SYBR Safe染料稀釋到500倍,，然后每孔加入50µL染色液,，最終稀釋到1000倍。

FLUOREYE體積小巧,，所需空間極小，可輕松集成到現(xiàn)有設備中,，升級到熒光檢測解決方案,，而無需昂貴的整合、外罩,、運輸設備或為避免碰撞所進行的編程工作,。FLUOREYE具有兩個激發(fā)波長和兩個檢測波長，可進行集成的熒光定量,，隨后無需用戶干預的均一化使之可與目前市場上的許多試劑盒兼容,。

用SYBR Safe核酸染料對HEK293細胞進行染色，然后用FLUOREYE在470nm波長下測量熒光強度,。每孔強度與BF顯微鏡成像計算出的融合度相關,。總體而言,，實際細胞融合與FLUOREYE測量的熒光強度之間存在很強的相關性（R2=0.976）,。細胞匯合度和熒光強度之間的線性相關在10% - 80%之間尤為準確，而在密度較高時,，差異增大,，這可能是由于細胞壓實和過度生長造成的。此外,，F(xiàn)LUOREYE讀數(shù)顯示,，細胞融合度在10 - 80%之間時，復孔之間的差異非常?。–V <8%）,。