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NE-PER NUCLEAR AND CYTOPLASMIC EXTRACTION
  • NE-PER NUCLEAR AND CYTOPLASMIC EXTRACTION

更新時間:2025-03-03 21:00:07

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ThermoScientificNE-PER細(xì)胞核和細(xì)胞核提取試劑盒可在不到兩小時內(nèi)高效裂解細(xì)胞并提取單獨的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白組分
    Thermo Scientific NE-PER 細(xì)胞核和細(xì)胞核提取試劑盒可在不到兩小時內(nèi)高效裂解細(xì)胞并提取單獨的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白組分,。

    NE-PER 細(xì)胞核和細(xì)胞核提取試劑盒的特點:

    ?快速— 可在不到兩小時內(nèi)獲得細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)組分
    ?經(jīng)驗證— NE-PER 試劑盒已在超過 950 種出版物中引用
    ?通用– 來自培養(yǎng)細(xì)胞或組織的核蛋白(僅適用于新鮮樣品)
    ?可擴展— 具有兩種試劑盒規(guī)格,,用于從細(xì)胞和組織中生成提取物
    ?便利— 指示簡單,無需梯度超速離心
    ?可兼容— 可用于下游檢測,,包括 Western 免疫印跡,、凝膠遷移率檢測、蛋白檢測,、報告基因檢測和酶活性試驗

    NE-PER 試劑盒是一種核蛋白提取方法,,涉及簡單、逐步裂解細(xì)胞并離心分離細(xì)胞核和細(xì)胞核蛋白組分,。只需要使用臺式微量離心機,、試管和移液器工具,。NE-PER 試劑可將各種細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白高效溶解并分離為小份,與基因組 DNA 和 mRNA 只有極輕微的交叉污染或干擾,。脫鹽或稀釋后,,分離的蛋白可被用于進行免疫檢測以及蛋白相互作用實驗,如遷移率變動實驗 (EMSA),、免疫共沉淀 (Co-IP) 和沉降試驗,。

    有多種方法可用于分離細(xì)胞核并制備細(xì)胞核蛋白提取物。大多數(shù)制備細(xì)胞核提取物的方法都是繁瑣的流程,,需要可能影響細(xì)胞核蛋白完整性的機械均質(zhì)化,、凍/融循環(huán)、廣泛的離心或透析步驟,。NE-PER 細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)提取試劑盒是一種基于試劑的方案,,可逐步裂解細(xì)胞、從完整的細(xì)胞核中分離細(xì)胞質(zhì),,然后從基因組 DNA 和 mRNA 中提取出細(xì)胞核蛋白,。在使用培養(yǎng)細(xì)胞時,這一溫和的流程只需不到兩小時并且只需要一臺標(biāo)準(zhǔn)的臺式離心機,。此外,,可以從同一細(xì)胞培養(yǎng)或組織樣品中回收活性細(xì)胞核蛋白和細(xì)胞質(zhì)蛋白。

    該試劑盒通??蓮?200 萬個細(xì)胞中產(chǎn)生 200 至 500 µg 細(xì)胞質(zhì)蛋白和 100 至 200 µg 細(xì)胞核蛋白(濃度為 1 mg/mL),。細(xì)胞溶質(zhì)和細(xì)胞核部分間的典型交叉污染率為大約 10%。該方法主要從細(xì)胞核中回收可溶性蛋白,,而不是在染色質(zhì)中結(jié)合的蛋白或細(xì)胞核包膜的整合膜蛋白,。細(xì)胞核提取物的蛋白濃度可通過在提取中采用不同體積的細(xì)胞核提取試劑 (NER) 很容易的進行控制,提取效率不會有任何重大損失,。從細(xì)胞中特定提取各種細(xì)胞核蛋白對于很多基因調(diào)控研究的成功非常重要,。盡管有多種方法可用于分離細(xì)胞核并制備細(xì)胞核蛋白提取物,但這些方法的大多數(shù)都很繁瑣,,需要采用可能影響很多脆弱細(xì)胞核蛋白完整性的機械均質(zhì)化,、凍/融循環(huán)、廣泛的離心或透析步驟,。NE-PER 試劑盒克服了這些問題,,可為 EMSA 和其他分析技術(shù)提供高質(zhì)量、濃縮的細(xì)胞核蛋白提取物,。

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