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杭州實了個驗生物科技有限公司
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瀏覽次數(shù)一,、引言
隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,，實時熒光定量PCR（qPCR）已成為基因表達(dá)分析、病原體檢測,、SNP 分型,、拷貝數(shù)變異等研究和臨床診斷的重要工具,。羅氏（Roche）生產(chǎn)的實時熒光定量PCR儀以其穩(wěn)定的溫度控制系統(tǒng)、靈敏的熒光探測模塊以及完善的軟件平臺而獲得廣泛認(rèn)可,。本文圍繞一臺二手羅氏實時熒光定量PCR儀,，從設(shè)備概覽、主要性能,、技術(shù)優(yōu)勢,、典型應(yīng)用、操作維護,、使用案例和售后支持等方面進(jìn)行詳細(xì)介紹,。
二、設(shè)備概覽
二手羅氏實時熒光定量PCR儀保留了原廠出廠時的全部核心組件,，采用了模塊化設(shè)計,。儀器外觀結(jié)構(gòu)與全新機型一致，由機箱主機,、光學(xué)檢測系統(tǒng),、觸摸屏控制單元以及配套電源組成。主機內(nèi)部包括精準(zhǔn)的熱循環(huán)模塊和多通道熒光探測器,，可支持 FAM,、HEX/VIC、ROX,、Cy5 等常見熒光染料,。配合羅氏專用軟件，可一次性檢測多達(dá) 96 個樣本,，每個樣本可進(jìn)行 1–5 個通道的數(shù)據(jù)采集與分析,。
三、主要性能參數(shù)
溫控精度： ±0.1 ℃,；
溫度均一性： ≤ 0.3 ℃,；
升降溫速率： 5 ℃/s（從 60 ℃ 到 95 ℃）；
光學(xué)通道： 4 通道,；
檢測靈敏度： 可檢出單拷貝水平的核酸,；
通量： 96 孔板，支持半板,、條管以及單管檢測,；
重復(fù)性： Ct 值標(biāo)準(zhǔn)差 ≤ 0.1；
數(shù)據(jù)輸出： CSV,、PDF,、Excel、圖表等多種格式,；
軟件功能： 定性/定量分析,、熔解曲線分析,、相對定量、絕對定量,、SNP 分型等,。
四、技術(shù)優(yōu)勢
精確溫控系統(tǒng)
采用雙閉環(huán) PID 算法,，實時監(jiān)控模塊溫度,，保證反應(yīng)過程中溫度偏差最小化；
多點溫度反饋設(shè)計,，自動校準(zhǔn)溫差,，增強檢測重復(fù)性。
多通道熒光檢測
光電探測器靈敏度高,，自動背景扣除,，信噪比達(dá) 1:1000；
通道切換速度快,，熒光信號采集時延低于 10 ms,。
軟件平臺
界面簡潔；反應(yīng)設(shè)置向?qū)Щ?，減少操作失誤,；
支持直觀的實時擴增曲線,、標(biāo)準(zhǔn)曲線及熔解曲線分析,；
內(nèi)置多種分析模板，可自定義報告內(nèi)容及格式,。
模塊化設(shè)計
可更換光源燈泡與探測器模塊,，維修時無需更換整機；
通用電源接口,，適應(yīng)寬電壓環(huán)境,。
五、典型應(yīng)用場景
基因表達(dá)定量
利用熒光標(biāo)記引物或探針,，精準(zhǔn)評估基因在不同組織或處理條件下的表達(dá)差異,；
病原體快速檢測
新冠病毒、流感病毒,、結(jié)核分枝桿菌等病原微生物的定性與定量檢測,；
轉(zhuǎn)基因作物檢測
檢測樣本中轉(zhuǎn)基因片段的存在與數(shù)量；
SNP 分型與拷貝數(shù)變異
配合特異性探針,，實現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性位點分型與拷貝數(shù)差異檢測,；
臨床診斷與科研
腫瘤標(biāo)志物檢測、脫氧核糖核酸甲基化分析,、miRNA 表達(dá)譜研究等,。
六,、操作與維護
日常開機檢查
檢查電源線與機箱接口是否緊固；
打開軟件,，查看系統(tǒng)自檢結(jié)果,；
試劑和耗材
建議使用羅氏或經(jīng)授權(quán)的兼容品牌試劑盒；
96 孔板,、光學(xué)封板膜應(yīng)選用低熒光漂白材料,；
日常清潔
定期用 70% 乙醇清潔樣本架與蓋板；
光學(xué)窗口每月檢查一次,，如有塵埃用專業(yè)鏡頭紙擦拭,；
定期校準(zhǔn)
建議每半年進(jìn)行溫度與熒光系統(tǒng)校準(zhǔn)；
可聯(lián)系專業(yè)技術(shù)服務(wù)商或?qū)嶒炇覂?nèi)部質(zhì)控組執(zhí)行,；
故障處理
軟件出現(xiàn)異常時,，可重啟主機或重新安裝軟件；
硬件報警提示時,，可參考說明書或聯(lián)系售后支持,。
七、二手設(shè)備驗收要點
外觀檢查： 無明顯磕碰,、劃痕,；機箱固定螺絲完好；
溫控測試： 可通過標(biāo)準(zhǔn)試劑盒或 DNA Ladder 驗證升降溫速率及均一性,；
熒光靈敏度測試： 使用低濃度熒光標(biāo)準(zhǔn)品檢測信號變化曲線,；
軟件運行： 載入模板、編輯程序,、導(dǎo)出報告功能正常,；
質(zhì)保與配件： 確認(rèn)賣方提供的質(zhì)保期限、電源線,、通信線,、光學(xué)封板膜等附件是否齊全。
八,、典型用戶案例
高?？蒲袑嶒炇?/strong>
某大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院購入此機型，用于多部門聯(lián)合項目,，平均每周運行 20 次以上,，設(shè)備穩(wěn)定運行超過兩年，Ct 值重現(xiàn)性良好,。第三方檢測機構(gòu)
某檢測中心作為二手回購機型,，引入用于食品安全微生物檢測，月均通量可達(dá) 500 板次,，高通量檢測任務(wù)下表現(xiàn)出色,。臨床檢驗室
地市級醫(yī)院分子實驗室使用該儀器開展呼吸道病毒核酸監(jiān)測,，并通過 ISO/IEC 17025 認(rèn)證審核。
九,、質(zhì)量保證與售后支持
質(zhì)保范圍
核心部件（熱循環(huán)模塊,、光學(xué)模塊）承諾 6 個月質(zhì)保；
其他配件質(zhì)保 3 個月,，質(zhì)保期內(nèi)免費更換損壞部件,；
技術(shù)培訓(xùn)
提供儀器安裝、使用和日常維護培訓(xùn),；
包含軟件操作與常見故障排查指導(dǎo),；
遠(yuǎn)程支持
配備遠(yuǎn)程診斷軟件，可實時監(jiān)控儀器運行狀態(tài),；
一線工程師在線解答及指導(dǎo),；
現(xiàn)場服務(wù)
在簽署服務(wù)協(xié)議后，48 小時內(nèi)安排工程師上門服務(wù)（限國內(nèi)主要城市）,；
提供定期保養(yǎng)與校準(zhǔn)服務(wù)套餐,。
十、總結(jié)
二手羅氏實時熒光定量PCR儀憑借其精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng),、靈敏的熒光檢測能力和完善的軟件分析平臺,，能夠滿足科研、臨床及第三方檢測等多種需求,。在保證儀器性能的前提下,，二手采購不僅節(jié)省投入成本，也可快速上機開展實驗,。通過嚴(yán)格的驗收流程,、規(guī)范的日常維護及完善的售后服務(wù),，使用者可確保長期穩(wěn)定運行,，為科研與生產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)支持。
