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賽默飛Varioskan LUX酶標儀簡介與使用說明
一,、儀器概述
Varioskan LUX是賽默飛公司推出的一款多功能光學檢測系統(tǒng),屬于多模式酶標儀,。它支持多種檢測模式,,包括吸光度(Absorbance)、熒光強度(Fluorescence Intensity),、時間分辨熒光(Time-Resolved Fluorescence, TRF),、發(fā)光(Luminescence)、熒光偏振(Fluorescence Polarization, FP)以及AlphaScreen/AlphaLISA等技術,。適用于生物化學,、細胞學、分子生物學等研究領域的數(shù)據(jù)采集和分析,。
Varioskan LUX采用模塊化光學系統(tǒng),,結合自動化功能、觸控操作界面和軟件平臺SkanIt,,滿足科研與高通量檢測需求,。其設計強調用戶體驗簡化與操作靈活性,適配多種微孔板格式(96孔,、384孔,、1536孔)以及單管檢測。
二,、基本原理
Varioskan LUX的工作基于光學檢測原理,。不同檢測模式對應不同的光源、探測器與光路設置:
吸光度測量:通過測量樣品對入射光的吸收程度,,反映樣品中物質濃度,。使用氙燈為光源,結合可變波長單色器進行波長掃描,。
熒光檢測:熒光探針在激發(fā)光作用下發(fā)出特定波長的發(fā)射光,,儀器通過濾光或單色器檢測其強度。適合用于蛋白標記,、核酸檢測等實驗,。
時間分辨熒光(TRF):利用發(fā)光延遲特性,提高信噪比,,常用于稀有元素標記(如銪)的免疫分析,。
發(fā)光檢測:無需激發(fā)光源,,直接檢測化學反應或生物發(fā)光產(chǎn)生的光信號,常用于酶促反應或細胞活性分析,。
AlphaScreen技術:基于供體和受體微珠間的能量傳遞,,實現(xiàn)無洗滌的高靈敏度檢測。
三,、儀器組成
Varioskan LUX主要由以下部分構成:
檢測光學系統(tǒng):包含氙燈,、LED光源、單色器,、濾光片、探測器等,,用于實現(xiàn)多模式檢測,。
微孔板模塊:自動托盤系統(tǒng)支持多種孔板格式,并可進行控溫(室溫至+65°C)與震蕩功能,。
自動化接口:支持機械臂對接,,實現(xiàn)自動進板和連續(xù)檢測。
控制界面:配有內(nèi)置觸控屏,,可本地設置參數(shù)或通過SkanIt軟件在計算機端控制,。
數(shù)據(jù)分析系統(tǒng):SkanIt軟件支持實驗設計、數(shù)據(jù)采集,、計算,、標準曲線擬合及報告輸出。
四,、操作流程
1. 儀器準備
開機與自檢:連接電源與計算機,,開啟主機,儀器自動進行系統(tǒng)自檢,,檢查光源,、機械托盤與溫控系統(tǒng)狀態(tài)。
軟件初始化:啟動SkanIt軟件,,確認儀器已連接,,并進入實驗設置界面。
2. 實驗設置
用戶需在軟件中進行以下設定:
板型選擇:選擇使用的孔板格式(如96孔,、384孔),。
檢測模式選擇:根據(jù)實驗類型設定吸光度、熒光,、發(fā)光等檢測方式,。
波長選擇:輸入所需激發(fā)波長與發(fā)射波長(對于熒光模式),或測量波長(對于吸光度),。
讀取參數(shù)設置:如讀取高度,、讀取次數(shù),、讀取順序等。
溫控設置(如需要):設定孵育溫度及持續(xù)時間,。
震蕩模式:選擇線性,、軌跡式或雙向震蕩,并設定持續(xù)時間與速度,。
3. 樣品準備與裝載
將樣品加至孔板中,,避免邊緣效應與氣泡影響。
將孔板正確放入托盤,,確保方向一致(A1孔朝左上),。
在軟件中點擊“讀取",儀器自動啟動檢測,。
4. 數(shù)據(jù)采集與分析
檢測過程中,,實時顯示原始數(shù)值或信號曲線。
軟件可進行標準曲線構建,、濃度計算,、數(shù)據(jù)校正與歸一化處理。
支持多組重復實驗,、平均值計算與標準差統(tǒng)計,。
數(shù)據(jù)可導出為CSV、Excel,、PDF等格式,,并可自定義報告模板。
五,、主要功能與技術參數(shù)
功能/參數(shù) | 說明 |
---|---|
吸光度波長范圍 | 200–1000 nm(步長1 nm) |
熒光激發(fā)/發(fā)射波長范圍 | 200–850 nm |
兼容板型 | 6–1536孔板,,兼容定制格式 |
溫控范圍 | 室溫至65°C,可編程恒溫 |
檢測速度 | 96孔板約15秒,,384孔板約1分鐘 |
發(fā)光檢測動態(tài)范圍 | 10^9 以上 |
自動化接口 | 支持LIMS系統(tǒng)與機械臂對接 |
軟件功能 | 曲線擬合,、條件篩選、統(tǒng)計分析,、多語言支持 |
六,、應用領域
Varioskan LUX廣泛應用于多個研究方向:
細胞生物學:細胞活力檢測、凋亡分析,、熒光標記蛋白研究,。
免疫檢測:ELISA、AlphaLISA,、高靈敏抗體篩選,。
基因分析:熒光定量PCR前期反應驗證、核酸雜交實驗,。
藥物篩選:高通量篩選化合物對酶或受體的作用,。
環(huán)境檢測:污染物光學信號檢測,、化學反應動力學研究。
七,、日常維護與注意事項
1. 日常維護
每日開機前檢查濾光系統(tǒng)與托盤是否干凈,。
使用完畢后關閉光源,避免長期曝光,。
定期清潔檢測窗口與板托,,避免液體殘留。
每季度檢查校準狀態(tài),,必要時聯(lián)系廠商進行專業(yè)校準,。
2. 注意事項
使用前詳細閱讀使用手冊,熟悉各項安全規(guī)定,。
在使用高敏模式時,,盡量避免環(huán)境光干擾。
樣品體積需滿足檢測要求,,避免低液面干擾,。
切勿在運行中強行取出板托,,避免損傷機械系統(tǒng),。
八、故障排查簡表
問題 | 可能原因 | 解決方法 |
---|---|---|
不啟動/死機 | 電源未接穩(wěn),、系統(tǒng)崩潰 | 檢查插頭,,重啟軟件 |
光源不亮 | 燈泡壽命耗盡或松動 | 更換燈泡或重新安裝 |
讀數(shù)波動大 | 孔板氣泡、樣品未混勻 | 去除氣泡,,重做實驗 |
軟件無法識別儀器 | USB端口故障,、驅動未更新 | 更換端口或更新驅動 |
九、總結
Varioskan LUX酶標儀作為一款多模式光學檢測平臺,,適配多種科研與應用場景,。其檢測模式全面,操作界面友好,,數(shù)據(jù)處理功能豐富,,適合從基礎研究到高通量篩選的多種實驗需求。正確掌握儀器功能,、規(guī)范操作流程,、按時進行維護,有助于確保數(shù)據(jù)準確性與實驗穩(wěn)定性,。
如需更高級的使用技巧,,如腳本自動控制、結果批處理,、復雜曲線擬合等,,建議參考SkanIt高級手冊或參加相關技術培訓,,以充分發(fā)揮該系統(tǒng)的性能。