賽默飛世爾Evolution One 紫外可見分光光度計是一種用于分析樣品吸光度的儀器,廣泛應(yīng)用于化學分析,、生命科學研究,、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。其工作原理基于比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law),,通過測量樣品對光的吸收程度來推算樣品的濃度,。以下是該儀器的工作原理詳解:
1. 光源和光譜分散
Evolution One 紫外可見分光光度計使用氘燈和鎢燈作為光源,其中:
氘燈用于紫外光(UV)范圍,,波長約在190nm至400nm之間,。
鎢燈用于可見光(VIS)范圍,波長大約在400nm至800nm之間,。
這些燈發(fā)出的光會被引導到光路中的單色儀裝置,。單色儀的作用是將白光分解為不同波長的單色光,并選擇某一特定波長的光進入樣品室,。
2. 單色儀
單色儀的核心部件通常是光柵或棱鏡,。這些部件可以將光源發(fā)出的白光分散為不同波長的光。選擇的特定波長會通過調(diào)節(jié)單色儀的設(shè)置而得到,。根據(jù)用戶設(shè)置的波長,,光源發(fā)出的光經(jīng)過單色儀后,光的波長就可以被準確選擇,。
3. 光通過樣品
選擇特定波長的光通過樣品室照射到待測樣品上,。樣品的吸收性質(zhì)與其所含化學成分的特性有關(guān)。根據(jù)樣品的化學成分和濃度,,樣品會吸收某些特定波長的光,,而其他波長的光則會透過樣品。
4. 檢測器
透過樣品的光會被光電探測器(如光電倍增管(PMT)或光電二極管)接收,。探測器將透過樣品后的光信號轉(zhuǎn)換為電信號,,這個電信號的強度與樣品吸收的光量成反比。光電探測器的工作是通過感知光的強度變化,,將其轉(zhuǎn)化為可分析的電信號,。
5. 吸光度計算
根據(jù)比爾-朗伯定律,吸光度(A)與光的透過度,、樣品濃度和光程長度之間有著明確的關(guān)系,。公式為:
A=εcl其中:
A 是吸光度,
ε 是摩爾吸光系數(shù),,
c 是樣品的濃度,,
l 是樣品的光程長度。
在實際操作中,儀器會根據(jù)透過樣品的光強度與原始光強度的比值計算吸光度,,并進一步通過已知濃度的標準溶液來推算樣品中的未知濃度,。
6. 數(shù)據(jù)處理和顯示
經(jīng)過光電探測器轉(zhuǎn)換后的電信號會送到計算機處理系統(tǒng)或儀器本身的處理器中。Evolution One 紫外可見分光光度計配有先進的數(shù)據(jù)處理軟件,,可以實時顯示吸光度值,、生成標準曲線,并進行定量分析,。同時,,儀器可以將結(jié)果保存或輸出成報告,供研究人員進一步分析,。
7. 波長掃描與多通道測量
一些紫外可見分光光度計(包括Evolution One)可以進行波長掃描,,即在設(shè)定的波長范圍內(nèi)掃描樣品的吸光度,繪制吸光度與波長的關(guān)系圖(光譜圖),。這對于研究樣品中多種成分的吸光特性和進行定性分析非常有用,。
此外,Evolution One還支持多通道測量,,意味著它可以同時在多個波長下進行測量,,增加了樣品分析的效率,特別適用于復雜樣品的分析,。
總結(jié)
賽默飛世爾Evolution One紫外可見分光光度計通過精確選擇特定波長的光,,測量樣品對光的吸收程度,再結(jié)合比爾-朗伯定律推算樣品的濃度等信息,。儀器的高精度光學設(shè)計和先進的數(shù)據(jù)處理功能,,使其在科研、質(zhì)量控制和教學等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,。