賽默飛 Countess 3 FL 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 是一款高精度,、自動(dòng)化的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析工具,，結(jié)合了熒光顯微鏡技術(shù)和先進(jìn)的圖像分析功能。以下是使用 Countess 3 FL 自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的詳細(xì)教程,，幫助用戶快速上手并有效利用儀器進(jìn)行細(xì)胞分析,。
1. 開始前準(zhǔn)備
在使用Countess 3 FL之前，確保儀器和樣本準(zhǔn)備好。
1.1 儀器準(zhǔn)備
接通電源：確保儀器連接電源,，并開啟電源按鈕,。
檢查儀器狀態(tài)：在儀器啟動(dòng)后，等待系統(tǒng)自檢完成,。此時(shí)屏幕上會(huì)顯示儀器的歡迎界面,，確認(rèn)沒有錯(cuò)誤提示。
清潔樣本腔和顯微鏡鏡頭：使用適當(dāng)?shù)那鍧嵐ぞ撸ㄈ鐭o塵布和清潔液）清潔儀器的顯微鏡鏡頭和樣本腔,，避免灰塵影響結(jié)果,。
1.2 樣本準(zhǔn)備
準(zhǔn)備細(xì)胞懸液：確保細(xì)胞懸液均勻，必要時(shí)使用離心機(jī)沉淀細(xì)胞,，去除上清液,。
選擇適當(dāng)?shù)娜玖?/strong>：根據(jù)需要使用臺(tái)盼藍(lán)或熒光染料（如Calcein-AM、PI等）,，將染料加入細(xì)胞懸液中,，幫助區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞。
2. 操作步驟
2.1 啟動(dòng)儀器
打開 Countess 3 FL,，并觸摸屏幕上的 "Start" 按鈕進(jìn)入主菜單,。
在主菜單中，選擇適合你實(shí)驗(yàn)的計(jì)數(shù)模式（如臺(tái)盼藍(lán)染色,、熒光染料分析等）,。
2.2 樣本加載
將準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸液輕輕滴入計(jì)數(shù)板或樣品腔。確保液體的表面平整,，避免氣泡干擾,。
使用Countess 3 FL的專用樣品腔蓋住樣品，確保沒有氣泡,。插入樣品腔到儀器的掃描區(qū)域,。
2.3 設(shè)置計(jì)數(shù)參數(shù)
選擇適合的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑?/p>
普通細(xì)胞計(jì)數(shù)模式：選擇“臺(tái)盼藍(lán)"或其他染料檢測(cè)活死細(xì)胞的模式。
熒光染料模式：如果使用了熒光染料（如Calcein-AM,、PI等）,，選擇相應(yīng)的熒光通道（如綠色或紅色），以便通過熒光信號(hào)分析細(xì)胞活性,。
調(diào)整其他實(shí)驗(yàn)設(shè)置（如增益,、曝光時(shí)間等），以確保熒光信號(hào)清晰可見,，細(xì)胞圖像清晰,。
2.4 運(yùn)行計(jì)數(shù)
按下 “Start Counting" 按鈕，儀器將自動(dòng)開始圖像采集與分析,。Countess 3 FL會(huì)掃描樣品中的細(xì)胞圖像,，并進(jìn)行自動(dòng)識(shí)別和計(jì)數(shù),。
在分析過程中，Countess 3 FL會(huì)自動(dòng)顯示細(xì)胞數(shù)量,、活細(xì)胞和死細(xì)胞的比例、細(xì)胞大小分布等數(shù)據(jù),。
2.5 查看分析結(jié)果
分析完成后,，儀器會(huì)自動(dòng)生成詳細(xì)的結(jié)果報(bào)告，并顯示在觸摸屏上,。
查看報(bào)告：報(bào)告包括細(xì)胞總數(shù),、活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù),、活細(xì)胞比例等,。你還可以查看細(xì)胞的大小分布、形態(tài)等詳細(xì)信息,。
調(diào)整報(bào)告設(shè)置：根據(jù)需要,，您可以選擇導(dǎo)出數(shù)據(jù)或調(diào)整報(bào)告設(shè)置。
2.6 導(dǎo)出數(shù)據(jù)
點(diǎn)擊“Export"按鈕,，將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)出為 CSV 格式文件,。
通過USB或網(wǎng)絡(luò)將文件轉(zhuǎn)移到電腦上，以進(jìn)行進(jìn)一步分析,。
3. 高級(jí)功能與設(shè)置
3.1 多通道熒光染料分析
如果您正在使用多個(gè)熒光染料（如Calcein-AM,、PI、Hoechst等）,，可以選擇適當(dāng)?shù)臒晒馔ǖ肋M(jìn)行細(xì)胞分析：
在設(shè)置中選擇“Fluorescent Mode"并每個(gè)通道的染料類型,。
儀器會(huì)自動(dòng)切換不同的熒光通道，識(shí)別不同的細(xì)胞群體（例如,，活細(xì)胞,、死細(xì)胞、細(xì)胞核等）,。
3.2 細(xì)胞大小和形態(tài)分析
通過細(xì)胞大小和形態(tài)分析功能,，您可以評(píng)估細(xì)胞的健康狀況和群體分布：
選擇“Size Distribution"模式，儀器會(huì)根據(jù)細(xì)胞大小對(duì)樣本進(jìn)行分類,，并生成直方圖,。
進(jìn)一步分析細(xì)胞的形態(tài)特征，觀察細(xì)胞是否有異常形態(tài)（如細(xì)胞碎片等）,。
4. 維護(hù)與保養(yǎng)
4.1 清潔
定期清潔Countess 3 FL儀器,，特別是顯微鏡鏡頭和樣品腔：
用無塵布清潔顯微鏡鏡頭，避免灰塵和污漬影響圖像質(zhì)量,。
清潔樣品腔,，確保沒有殘留的樣品或染料,，避免交叉污染。
4.2 校準(zhǔn)
Countess 3 FL具有自動(dòng)校準(zhǔn)功能,，但建議定期進(jìn)行校準(zhǔn)檢查,，確保儀器的計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確：
使用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞懸液進(jìn)行校準(zhǔn)，檢查儀器計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性,。
根據(jù)儀器使用頻率,，建議每隔一段時(shí)間重新校準(zhǔn)。
4.3 軟件更新
定期檢查并更新儀器的操作系統(tǒng)和分析軟件：
根據(jù)賽默飛公司發(fā)布的軟件更新通知,，下載并安裝最新的軟件版本,，確保儀器的功能和性能得到優(yōu)化。
5. 常見問題解答
5.1 儀器無法啟動(dòng)
5.2 樣本圖像模糊
檢查顯微鏡鏡頭是否干凈,，如有灰塵，使用無塵布輕輕擦拭,。
檢查樣品腔,，確保沒有氣泡，并確保樣本液面平整,。
5.3 計(jì)數(shù)結(jié)果與預(yù)期差異
檢查染料的使用是否正確,，確保染料與細(xì)胞的匹配。
確保選擇了正確的計(jì)數(shù)模式,，并且設(shè)置了合適的參數(shù)（如熒光增益,、曝光時(shí)間等）。
確保樣品均勻,，并且細(xì)胞濃度在適合儀器測(cè)量的范圍內(nèi),。
總結(jié)
賽默飛Countess 3 FL自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過自動(dòng)化操作、熒光顯微技術(shù),、智能圖像分析,，提供高效、精確的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析功能,。通過本文提供的步驟,，您可以快速上手并有效利用Countess 3 FL進(jìn)行細(xì)胞研究。定期維護(hù),、更新和適當(dāng)?shù)脑O(shè)置調(diào)整,，能夠確保儀器長(zhǎng)期穩(wěn)定地為您提供精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
中級(jí)會(huì)員·2年
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