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杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
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什么是賽默飛 7500 熒光定量 PCR 儀,？
賽默飛 7500 熒光定量 PCR 儀（Thermo Fisher Scientific 7500 Real-Time PCR System）是一款經(jīng)典的實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀器,，廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)、突變篩查,、基因分型和藥物研發(fā)等領(lǐng)域,。7500 系列 PCR 儀通過實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增過程中的熒光信號(hào)，精確定量目標(biāo)核酸的濃度,，是分子生物學(xué)研究和臨床診斷的核心工具之一,。
1. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
賽默飛 7500 熒光定量 PCR 儀以其高靈敏度、高特異性和強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析能力而受到科研人員的青睞,。它支持多種實(shí)驗(yàn)類型,，包括相對(duì)定量、絕對(duì)定量,、突變分析和熔解曲線檢測(cè),，能夠滿足從基礎(chǔ)科研到臨床診斷的多種需求。
主要特點(diǎn)：
實(shí)時(shí)檢測(cè)：實(shí)時(shí)監(jiān)控?zé)晒庑盘?hào),，精確定量目標(biāo)核酸,。
多通道檢測(cè)：支持多色熒光通道，用于多重實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),。
快速模式：部分型號(hào)支持快速運(yùn)行模式,，將實(shí)驗(yàn)時(shí)間縮短至30分鐘。
靈活性強(qiáng)：支持多種熒光染料和探針技術(shù),，包括 TaqMan 探針和 SYBR Green,。
數(shù)據(jù)處理能力強(qiáng)：內(nèi)置軟件提供全面的 Ct 值分析、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和結(jié)果輸出功能,。
2. 技術(shù)規(guī)格
(1) 光學(xué)系統(tǒng)
支持多色熒光檢測(cè),，標(biāo)準(zhǔn)配置包括 5 個(gè)熒光通道：
FAM、SYBR Green,、VIC,、HEX、ROX 等染料,。
靈敏度高,，能夠精確檢測(cè)低豐度核酸。
(2) 溫控模塊
溫度范圍：4℃ 至 100℃,，適應(yīng)各種實(shí)驗(yàn)需求,。
溫度均勻性：±0.5℃，確保所有樣品反應(yīng)一致,。
(3) 運(yùn)行模式
標(biāo)準(zhǔn)模式：適合所有常規(guī)實(shí)驗(yàn),。
快速模式：優(yōu)化熱循環(huán)流程，將實(shí)驗(yàn)時(shí)間縮短至 30 分鐘,。
(4) 反應(yīng)板支持
96 孔光學(xué)反應(yīng)板,，適合中等通量實(shí)驗(yàn)室,。
(5) 數(shù)據(jù)采集與分析
實(shí)時(shí)采集熒光信號(hào)，生成擴(kuò)增曲線,、熔解曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
數(shù)據(jù)精確可靠，支持相對(duì)定量,、絕對(duì)定量和基因分型分析,。
3. 核心技術(shù)與功能
(1) 實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)
在 PCR 擴(kuò)增的每個(gè)循環(huán)中實(shí)時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)，監(jiān)控目標(biāo)核酸的累積量,。
熒光信號(hào)與目標(biāo)核酸的初始濃度呈正比,，支持精確定量分析。
(2) 熒光檢測(cè)方法
SYBR Green 染料法：
熒光染料嵌入雙鏈 DNA,，發(fā)出熒光信號(hào)。
優(yōu)點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單,，成本低,。
缺點(diǎn)：可能受到非特異性擴(kuò)增干擾。
TaqMan 探針法：
探針通過熒光基團(tuán)和猝滅基團(tuán)的分離發(fā)出熒光信號(hào),。
優(yōu)點(diǎn)：特異性高,，結(jié)果更可靠。
缺點(diǎn)：探針設(shè)計(jì)和合成成本較高,。
(3) 高分辨率熔解曲線分析
熔解曲線分析用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性,，單一峰值表明擴(kuò)增產(chǎn)物特異性好。
(4) 快速模式
通過優(yōu)化熱循環(huán)程序,，7500 系列的快速模式可在 30 分鐘內(nèi)完成實(shí)驗(yàn),，極大提高了實(shí)驗(yàn)室的工作效率。
(5) 智能化數(shù)據(jù)分析
軟件自動(dòng)生成 Ct 值和標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并可導(dǎo)出擴(kuò)增曲線和熔解曲線等實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),。
4. 工作流程
(1) 樣品準(zhǔn)備
核酸提取：從樣品中提取 DNA 或 RNA，確保純度和濃度符合實(shí)驗(yàn)要求,。
逆轉(zhuǎn)錄（針對(duì) RNA 樣本）：將 RNA 轉(zhuǎn)錄為 cDNA,。
(2) 配置 PCR 反應(yīng)體系
配制 PCR 反應(yīng)液，包括：核酸模板,、引物,、熒光染料或探針、dNTP,、緩沖液和 Taq DNA 聚合酶,。
按規(guī)定體積分裝到 96 孔反應(yīng)板中，并密封,。
(3) 設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)
在軟件中選擇實(shí)驗(yàn)類型（如相對(duì)定量,、絕對(duì)定量或基因分型）。
設(shè)置熒光通道和樣品信息（樣品名稱、分組等）,。
輸入熱循環(huán)程序,，包括變性、退火和延伸階段的溫度和時(shí)間,。
(4) 運(yùn)行實(shí)驗(yàn)
將反應(yīng)板放入儀器樣品艙,，啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)運(yùn)行時(shí),，實(shí)時(shí)采集熒光信號(hào),，生成擴(kuò)增曲線。
(5) 數(shù)據(jù)分析
實(shí)驗(yàn)完成后,，使用軟件分析 Ct 值,、標(biāo)準(zhǔn)曲線、熔解曲線等數(shù)據(jù),。
輸出實(shí)驗(yàn)報(bào)告或?qū)С鰯?shù)據(jù)文件,。
5. 應(yīng)用領(lǐng)域
(1) 基因表達(dá)分析
通過實(shí)時(shí)檢測(cè)基因的表達(dá)水平，用于研究基因調(diào)控機(jī)制和疾病標(biāo)志物,。
(2) 病原體檢測(cè)
快速檢測(cè)病毒和細(xì)菌 DNA 或 RNA,，用于傳染病診斷（如檢測(cè)）。
(3) 突變篩查
檢測(cè)基因突變和多態(tài)性（SNP）,，廣泛應(yīng)用于遺傳性疾病研究和癌癥診斷,。
(4) 藥物研發(fā)
測(cè)量特定基因在藥物處理下的表達(dá)變化，用于篩選藥物靶點(diǎn),。
(5) 食品與環(huán)境安全
檢測(cè)食品中的病原體或轉(zhuǎn)基因成分,，監(jiān)測(cè)環(huán)境樣本中的污染物。
6. 優(yōu)勢(shì)與特點(diǎn)
高靈敏度與高特異性
光學(xué)系統(tǒng)靈敏度高,，能夠檢測(cè)低豐度核酸模板,。
TaqMan 探針法確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的特異性。
快速運(yùn)行
快速模式縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,，提高實(shí)驗(yàn)室效率,。
易用性
用戶界面友好，支持一鍵設(shè)置和自動(dòng)化數(shù)據(jù)分析,。
靈活性
兼容多種熒光染料,、探針和實(shí)驗(yàn)類型，適合多樣化實(shí)驗(yàn)需求,。
可靠性
數(shù)據(jù)穩(wěn)定性高,，結(jié)果重復(fù)性好，適合科研和臨床應(yīng)用,。
7. 注意事項(xiàng)
樣品準(zhǔn)備：確保核酸提取的純度和濃度符合實(shí)驗(yàn)要求,，避免抑制劑干擾 PCR 反應(yīng),。
試劑質(zhì)量：使用新鮮的 PCR 試劑，避免試劑降解導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,。
反應(yīng)板密封：確保光學(xué)反應(yīng)板密封良好,，防止蒸發(fā)或氣泡干擾熒光檢測(cè)。
定期維護(hù)：清潔光學(xué)窗口,，校準(zhǔn)溫控模塊,，確保儀器性能穩(wěn)定。
8. 總結(jié)
賽默飛 7500 熒光定量 PCR 儀以其強(qiáng)大的檢測(cè)能力和高效的數(shù)據(jù)分析功能,，為分子生物學(xué)研究和臨床應(yīng)用提供了可靠的解決方案,。無論是基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)還是藥物研發(fā),，7500 系列都能滿足實(shí)驗(yàn)室的多種需求,。其快速模式、靈活性和高靈敏度,，使其成為科研和診斷領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用的經(jīng)典 PCR 儀器之一,。
