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      移液器的校準(zhǔn)方法和步驟

      2024-8-3  閱讀(186)

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      校準(zhǔn)移液器是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要步驟,。以下是詳細(xì)的移液器校準(zhǔn)方法和步驟:

      一,、校準(zhǔn)前準(zhǔn)備

      工具和材料

      1. 精密天平(精度至少為0.01 mg)

      2. 蒸餾水或去離子水

      3. 量筒(用于測量蒸餾水)

      4. 校準(zhǔn)砝碼(用于校準(zhǔn)天平)

      5. 移液器吸頭(與移液器匹配的高質(zhì)量吸頭)

      6. 溫度計(jì)(測量水溫)

      7. 濕度計(jì)(測量環(huán)境濕度)

      8. 手套和防護(hù)裝備(確保操作無污染)

      環(huán)境要求

      • 環(huán)境溫度:20°C ± 2°C

      • 環(huán)境濕度:50% ± 10%

      • 避免氣流、震動(dòng)和電磁干擾

      二,、校準(zhǔn)步驟

      1. 校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備

      • 確保移液器清潔且干燥,。

      • 檢查移液器是否需要維護(hù)或更換密封圈。

      • 在開始校準(zhǔn)前至少30分鐘,將所有工具和材料放置在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中,,使其達(dá)到環(huán)境平衡,。

      2. 天平校準(zhǔn)

      • 打開天平,進(jìn)行預(yù)熱(根據(jù)天平說明書的要求),。

      • 使用校準(zhǔn)砝碼進(jìn)行天平校準(zhǔn),,確保天平讀數(shù)準(zhǔn)確。

      • 確認(rèn)天平校準(zhǔn)完畢后,,將天平調(diào)零,。

      3. 準(zhǔn)備蒸餾水

      • 測量并記錄水溫(理想溫度為20°C)。

      • 根據(jù)溫度,,查找水的密度(參考密度表),。

      4. 吸取和稱量

      • 設(shè)置移液器至校準(zhǔn)所需的體積(如10µL、100µL,、1000µL),。

      • 選擇適配的吸頭,安裝到移液器上,。

      • 使用正確的移液技術(shù)吸取水樣:

        • 將吸頭浸入水中2-3毫米,。

        • 緩慢平穩(wěn)地吸取水樣。

        • 等待1-2秒,,確保吸頭內(nèi)液體穩(wěn)定,。

        • 將吸頭移到天平上方。

        • 緩慢釋放移液器按鈕,,將水樣排到天平的稱量盤上,。

      • 記錄天平讀數(shù)(質(zhì)量)。

      5. 重復(fù)操作

      • 對每個(gè)體積進(jìn)行至少10次重復(fù)操作,,記錄每次稱量的質(zhì)量,。

      6. 計(jì)算體積

      • 使用以下公式計(jì)算每次稱量的體積:V=mρV = \frac{m}{\rho}其中,VV 是體積(µL),,mm 是質(zhì)量(mg),,ρ\rho 是水的密度(mg/µL,取決于水溫),。

      7. 計(jì)算誤差

      • 計(jì)算每次測量的平均體積(Vˉ\bar{V}),。

      • 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD):SD=(Vi?Vˉ)2n?1SD = \sqrt{\frac{\sum (V_i - \bar{V})^2}{n-1}}其中,ViV_i 是每次測量的體積,,nn 是測量次數(shù),。

      • 計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD):RSD=SDVˉ×100%RSD = \frac{SD}{\bar{V}} \times 100\%

      • 計(jì)算系統(tǒng)誤差(系統(tǒng)誤差 = 平均體積 - 設(shè)定體積)。

      三,、評估結(jié)果

      精度和準(zhǔn)確度

      • 比較計(jì)算出的平均體積和設(shè)定體積的差異(系統(tǒng)誤差),。

      • 檢查相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),,確保在移液器規(guī)定的允許范圍內(nèi)。

      調(diào)整移液器

      • 如果誤差超出允許范圍,,根據(jù)移液器說明書進(jìn)行調(diào)整(通常通過移液器上的調(diào)節(jié)螺釘),。

      • 調(diào)整后重新進(jìn)行校準(zhǔn),直至誤差在允許范圍內(nèi),。

      記錄和報(bào)告

      • 填寫移液器校準(zhǔn)記錄表,,包括每次測量的體積、平均體積,、標(biāo)準(zhǔn)偏差和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差,。

      • 保存校準(zhǔn)記錄,以備將來審查,。

      四,、后續(xù)維護(hù)

      定期校準(zhǔn)

      • 根據(jù)使用頻率和實(shí)驗(yàn)要求,定期校準(zhǔn)移液器(通常每3-6個(gè)月一次),。

      日常維護(hù)

      • 每次使用后清潔移液器,,特別是在處理高風(fēng)險(xiǎn)樣本后。

      • 避免粗暴操作,,正確存放移液器,。

      潤滑和維護(hù)

      • 定期使用適當(dāng)?shù)臐櫥瑒?nèi)部機(jī)械部件進(jìn)行潤滑,確保其靈活操作,。

      • 檢查并更換磨損的密封圈和活塞,。

      五、常見問題及解決方法

      漏液

      • 可能原因:吸頭安裝不正確,、密封圈老化或移液器內(nèi)部部件損壞,。

      • 解決方法:確保吸頭正確安裝,定期檢查和更換密封圈,,必要時(shí)維修或更換內(nèi)部部件。

      量程不準(zhǔn)

      • 可能原因:移液器需要校準(zhǔn),、操作方法不正確或移液器內(nèi)部污染,。

      • 解決方法:重新校準(zhǔn)移液器,確保正確操作,,定期清潔移液器內(nèi)部,。

      吸液不均勻

      • 可能原因:吸頭問題、移液器污染或操作不當(dāng)導(dǎo)致氣泡,。

      • 解決方法:更換吸頭,,清潔移液器,吸液時(shí)緩慢平穩(wěn)操作,。

      按鈕卡頓

      • 可能原因:按鈕或內(nèi)部部件磨損,、污染或缺乏潤滑,。

      • 解決方法:檢查并更換磨損部件,定期清潔和潤滑移液器,。

      吸液或排液困難

      • 可能原因:活塞或密封圈損壞,、內(nèi)部堵塞。

      • 解決方法:檢查并更換損壞的活塞或密封圈,,清潔移液器內(nèi)部,。

      通過上述步驟,可以確保移液器的精度和準(zhǔn)確性,,從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性,。如果在校準(zhǔn)過程中遇到復(fù)雜或無法解決的問題,建議聯(lián)系廠家或?qū)I(yè)技術(shù)人員進(jìn)行維護(hù)和維修,。


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