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杭州實(shí)了個驗(yàn)生物科技有限公司
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二手ABI QuantStudio™ 5 實(shí)時熒光定量PCR儀技術(shù)評估與應(yīng)用介紹
一,、儀器概述
QuantStudio™ 5 實(shí)時熒光定量PCR儀由Applied Biosystems（現(xiàn)隸屬于賽默飛Thermo Fisher Scientific）推出,，是QuantStudio系列中一款定位于中通量、功能完備,、界面友好的定量PCR平臺,。該設(shè)備兼具96孔與384孔反應(yīng)模塊的可選性，采用LED光源和先進(jìn)的光學(xué)檢測系統(tǒng),，可滿足多種常規(guī)核酸檢測與表達(dá)分析任務(wù),。
對于采購二手設(shè)備的用戶而言，QuantStudio 5憑借結(jié)構(gòu)緊湊,、性能穩(wěn)定,、操作軟件直觀等特征，具有較高的再利用價值,，在高校實(shí)驗(yàn)室,、生物技術(shù)公司及第三方檢測機(jī)構(gòu)中仍有較大使用需求。
二,、技術(shù)參數(shù)與系統(tǒng)結(jié)構(gòu)
1. 溫控性能
模塊類型：標(biāo)準(zhǔn)96孔鋁模塊（0.2 mL 反應(yīng)孔）,；
升降溫速率：升溫約3.5°C/s，降溫約3.0°C/s,；
溫控準(zhǔn)確性：±0.25°C,；
溫度均一性：<0.4°C（在90秒保持期內(nèi)）；
熱蓋溫度范圍：30°C–105°C,，可調(diào)節(jié)壓力以適配不同封膜,。
2. 光學(xué)系統(tǒng)
激發(fā)光源：高強(qiáng)度LED；
檢測方式：多通道熒光檢測系統(tǒng)（最多支持6個通道）,；
支持染料：FAM™, VIC®, SYBR® Green, ROX™, TAMRA™, JOE™, HEX™等,；
采集方式：每循環(huán)末實(shí)時采集熒光信號，光學(xué)無接觸掃描,；
校正機(jī)制：自動進(jìn)行熒光漂移和參考染料校正（ROX為推薦參考）,。
3. 兼容耗材
96孔板（0.2 mL，快裝板或獨(dú)立管）；
高透明封膜,、粘蓋膜,、光學(xué)蓋板；
建議使用原廠或兼容性測試合格耗材,，避免因孔位不一致影響光路,。
三、軟件與數(shù)據(jù)處理功能
QuantStudio Design & Analysis 軟件為該系統(tǒng)配套軟件,，支持多種實(shí)驗(yàn)設(shè)計和結(jié)果分析模式：
1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)置
預(yù)設(shè)模板：絕對定量,、相對定量、SNP分析,、標(biāo)準(zhǔn)曲線,、熔解曲線分析等；
自定義程序編排：設(shè)置循環(huán)參數(shù),、熒光采集時間點(diǎn),；
多用戶賬戶系統(tǒng)，便于管理大型實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)權(quán)限,。
2. 數(shù)據(jù)分析
Ct值提取：自動/手動設(shè)定閾值,；
相對表達(dá)分析：支持ΔΔCt法，歸一化目標(biāo)基因表達(dá),；
SNP判型：通過末端熒光強(qiáng)度判斷基因型,；
圖形輸出：擴(kuò)增曲線、熔解曲線,、熒光散點(diǎn)圖等可導(dǎo)出圖像,。
3. 遠(yuǎn)程控制與云平臺
通過Thermo Fisher Cloud遠(yuǎn)程設(shè)計實(shí)驗(yàn)、監(jiān)控運(yùn)行狀態(tài),；
可實(shí)現(xiàn)多臺設(shè)備數(shù)據(jù)集中管理與備份,；
支持移動設(shè)備端口遠(yuǎn)程訪問（部分型號升級后可實(shí)現(xiàn)）。
四,、常見應(yīng)用方向
QuantStudio 5適用于基礎(chǔ)研究與應(yīng)用檢測的多種核酸實(shí)驗(yàn)：
基因表達(dá)分析
利用SYBR或TaqMan探針,，評估不同處理下的mRNA表達(dá)；
可對多個目標(biāo)基因同時檢測,，實(shí)現(xiàn)相對定量研究,。
SNP/突變檢測
適用于單堿基突變或小范圍結(jié)構(gòu)變異檢測；
支持等位基因判型（如AA,、AG,、GG）；
可拓展至個體化醫(yī)學(xué),、疾病篩查研究,。
微生物/病毒載量檢測
檢測細(xì)菌,、病毒、支原體等特定病原體DNA/RNA,；
常用于環(huán)境檢測,、疫病篩查和藥效評估,。
拷貝數(shù)變異分析（CNV）
精確定量染色體片段或特定位點(diǎn)的DNA拷貝數(shù)變化,；
廣泛用于癌癥、遺傳病等研究,。
農(nóng)產(chǎn)品/食品成分檢測
GMO成分檢測,；
動植物來源成分識別。
五,、二手設(shè)備選購注意事項
購買二手QuantStudio 5系統(tǒng),，應(yīng)從以下維度評估設(shè)備狀態(tài)與價值：
1. 核心部件檢查
熱模塊是否升降溫穩(wěn)定（可進(jìn)行水測試）；
光學(xué)通道校準(zhǔn)是否準(zhǔn)確,；
是否有報錯或通信中斷記錄,；
是否可成功運(yùn)行完整的熒光擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。
2. 軟件與系統(tǒng)版本
是否包含正版授權(quán)的軟件（Design & Analysis）,；
是否支持最新Win10系統(tǒng)或可升級,；
云平臺功能是否激活；
是否提供完整操作手冊與驅(qū)動包,。
3. 外觀與配件
主機(jī)外殼是否破損,、按鍵功能是否失靈；
是否提供原廠或合格的96孔模塊,；
配套的反應(yīng)板托架,、封膜壓蓋器是否齊全。
4. 歷史記錄
設(shè)備出廠時間與使用年限,；
是否經(jīng)過正規(guī)授權(quán)商維修,；
是否有校準(zhǔn)與維護(hù)記錄；
是否經(jīng)過污染清洗和溫控/光學(xué)檢測校準(zhǔn),。
六,、設(shè)備適配場景評估
作為一款定位于中通量科研與臨床研究的實(shí)時熒光PCR平臺，QuantStudio 5適合以下機(jī)構(gòu)與用途：
| 機(jī)構(gòu)類型 | 典型用途 |
|---|---|
| 高校實(shí)驗(yàn)室 | 分子生物學(xué)課程教學(xué),、畢業(yè)課題實(shí)驗(yàn) |
| 醫(yī)學(xué)科研單位 | 基因表達(dá),、miRNA檢測、突變分析 |
| 第三方檢測公司 | 食品檢測,、環(huán)境樣本定量,、病毒篩查 |
| 生物技術(shù)公司 | qPCR試劑開發(fā)、方法學(xué)驗(yàn)證,、客戶服務(wù)實(shí)驗(yàn) |
相較全新設(shè)備,，二手QuantStudio 5在預(yù)算有限場景下，提供了一種可行解決方案，只要設(shè)備狀態(tài)良好并有可追溯維修記錄,，能維持相當(dāng)水平的實(shí)驗(yàn)性能,。
七、結(jié)語
ABI QuantStudio 5 實(shí)時定量PCR儀以其可靠的溫控系統(tǒng),、靈敏的熒光檢測機(jī)制,、便捷的圖形化軟件及良好的通用性，在多種核酸檢測實(shí)驗(yàn)中被廣泛采用,。若評估通過,，選購二手設(shè)備可在控制成本的同時滿足實(shí)驗(yàn)需求。
在實(shí)際購置前,，建議要求賣方提供以下資料以作進(jìn)一步判斷：
儀器序列號及出廠年份,；
運(yùn)行日志截圖；
最近一次擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)的報告,；
售后服務(wù)與運(yùn)輸保障條款,。
