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賽默飛Thermo LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀介紹
賽默飛(Thermo Fisher Scientific)的LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一款高性能,、多功能的PCR檢測(cè)儀器,,專為基因表達(dá)研究,、基因分型、拷貝數(shù)變異分析,、突變檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)需求而設(shè)計(jì),。作為分子生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用的儀器之一,LightCycler® 480 II以其高通量,、高靈敏度,、強(qiáng)大的多重檢測(cè)能力以及快速熱循環(huán)技術(shù),在科研,、臨床和工業(yè)檢測(cè)領(lǐng)域表現(xiàn)出色,。
一、儀器概述
LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀結(jié)合了先進(jìn)的光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)與快速溫控技術(shù),,是一款為高精確度核酸定量分析而設(shè)計(jì)的設(shè)備,。該儀器支持96孔和384孔反應(yīng)板,能夠適應(yīng)不同規(guī)模的實(shí)驗(yàn)需求,,同時(shí)以其出色的熒光檢測(cè)能力和數(shù)據(jù)分析功能,,為分子生物學(xué)研究提供了可靠的技術(shù)平臺(tái)。
這款設(shè)備可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增過程中熒光信號(hào)的變化,,幫助研究人員動(dòng)態(tài),、定量分析目標(biāo)基因的表達(dá)或突變狀態(tài)。無論是基礎(chǔ)研究還是臨床診斷,,LightCycler® 480 II都能夠?yàn)榭茖W(xué)家提供高效,、穩(wěn)定和可靠的數(shù)據(jù)支持。
二、技術(shù)特點(diǎn)
1. 高性能光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)
LightCycler® 480 II配備高靈敏度光學(xué)模塊,,支持多通道熒光檢測(cè),,可對(duì)多個(gè)目標(biāo)基因進(jìn)行同時(shí)監(jiān)測(cè)。
高靈敏度檢測(cè):適合低豐度基因的分析,,可靈敏檢測(cè)低拷貝數(shù)樣本,。
多通道支持:支持多達(dá)5種熒光染料的同時(shí)檢測(cè),適合多重PCR實(shí)驗(yàn),。
熒光染料兼容性:支持SYBR Green,、TaqMan探針、EvaGreen以及其他常見熒光標(biāo)記物,。
2. 快速熱循環(huán)技術(shù)
LightCycler® 480 II采用高效熱循環(huán)模塊,,能夠快速升溫和降溫,大幅度縮短PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)間,,提高檢測(cè)效率,。
快速反應(yīng)速度:每次實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)時(shí)間顯著縮短,,同時(shí)保持較高的擴(kuò)增效率,。
精確溫控系統(tǒng):溫控精度達(dá)到±0.1°C,確保PCR擴(kuò)增的高穩(wěn)定性和重復(fù)性,。
3. 多通量配置
該儀器支持兩種孔板配置,,滿足不同實(shí)驗(yàn)室規(guī)模需求:
96孔板:適合中等規(guī)模實(shí)驗(yàn)和科研使用。
384孔板:為高通量實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),,支持大規(guī)模篩查和復(fù)雜檢測(cè),。
4. 智能數(shù)據(jù)分析
LightCycler® 480 II配備功能全面的數(shù)據(jù)分析軟件,能夠滿足用戶的多樣化數(shù)據(jù)處理需求,。
Ct值分析:快速,、準(zhǔn)確地識(shí)別循環(huán)閾值(Ct值),提供可靠的擴(kuò)增曲線,。
熔解曲線分析:用于擴(kuò)增反應(yīng)的特異性驗(yàn)證,,幫助識(shí)別非特異性產(chǎn)物或污染。
絕對(duì)與相對(duì)定量:支持基于標(biāo)準(zhǔn)曲線的絕對(duì)定量以及2^-ΔΔCt法的相對(duì)定量分析,。
突變檢測(cè)和基因分型:支持高分辨率熔解曲線(HRM)分析,,用于基因突變檢測(cè)和基因分型研究。
5. 靈活性與兼容性
LightCycler® 480 II儀器設(shè)計(jì)靈活,,適應(yīng)多種實(shí)驗(yàn)類型和需求:
多種反應(yīng)模式:支持標(biāo)準(zhǔn)PCR,、實(shí)時(shí)定量PCR、多重PCR,、熔解曲線分析等,。
兼容不同實(shí)驗(yàn)條件:支持多種熒光標(biāo)記體系和反應(yīng)方案。
自動(dòng)化擴(kuò)展:可與實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化設(shè)備集成,進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)效率,。
三,、核心功能
1. 基因表達(dá)分析
LightCycler® 480 II能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)控基因表達(dá)水平的變化,適用于各種基因表達(dá)研究場(chǎng)景,。
相對(duì)定量:對(duì)樣本間基因表達(dá)水平差異進(jìn)行分析,。
絕對(duì)定量:通過標(biāo)準(zhǔn)曲線直接計(jì)算基因拷貝數(shù)。
2. 突變檢測(cè)
該儀器可以靈敏檢測(cè)低頻率突變,,適用于點(diǎn)突變,、插入/缺失突變等多種基因突變類型的研究。
HRM分析:高分辨率熔解曲線技術(shù)能夠高效區(qū)分樣本中的突變和野生型序列,。
單核苷酸多態(tài)性(SNP)檢測(cè):快速準(zhǔn)確識(shí)別樣本中的特定基因變異,。
3. 基因分型
LightCycler® 480 II支持基因分型實(shí)驗(yàn),通過分析熒光信號(hào),,對(duì)樣本進(jìn)行遺傳多態(tài)性分型,。
4. 拷貝數(shù)變異(CNV)分析
通過定量PCR實(shí)驗(yàn),該儀器能夠檢測(cè)基因組中目標(biāo)基因的拷貝數(shù)變化,,幫助研究拷貝數(shù)擴(kuò)增或缺失的基因,。
5. 病毒載量檢測(cè)
LightCycler® 480 II被廣泛應(yīng)用于病毒載量分析,通過定量檢測(cè)病毒核酸,,監(jiān)測(cè)感染狀況和治療效果,。
四、技術(shù)參數(shù)
以下為L(zhǎng)ightCycler® 480 II的主要技術(shù)參數(shù):
參數(shù) | 描述 |
---|---|
樣品通量 | 96孔板,、384孔板 |
光學(xué)檢測(cè)通道 | 5通道熒光檢測(cè) |
溫控精度 | ±0.1°C |
熱循環(huán)速度 | 快速升溫和降溫 |
支持的熒光染料 | SYBR Green,、TaqMan、EvaGreen等 |
數(shù)據(jù)分析功能 | Ct值分析,、熔解曲線分析,、基因表達(dá)定量 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 基因表達(dá)、突變檢測(cè),、病毒載量分析等 |
五,、儀器優(yōu)勢(shì)
1. 高靈敏度與高通量
LightCycler® 480 II具檢測(cè)靈敏度和高通量能力,可同時(shí)處理大批量樣本,,顯著提高實(shí)驗(yàn)效率,。
2. 多功能性
該儀器支持多種實(shí)驗(yàn)類型,包括基因表達(dá)分析,、基因分型,、突變檢測(cè)和拷貝數(shù)分析等,覆蓋了絕大多數(shù)PCR應(yīng)用場(chǎng)景,。
3. 操作簡(jiǎn)便
儀器的設(shè)計(jì)注重用戶體驗(yàn),,配套軟件界面直觀,,實(shí)驗(yàn)設(shè)置和數(shù)據(jù)分析簡(jiǎn)便易用。
4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠
高精度的溫控系統(tǒng)和靈敏的光學(xué)模塊確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,。
5. 靈活的擴(kuò)展能力
兼容多種耗材和反應(yīng)方案,,支持與自動(dòng)化工作站集成,適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)室的需求,。
六,、應(yīng)用領(lǐng)域
LightCycler® 480 II在多個(gè)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用:
1. 基礎(chǔ)研究
基因表達(dá)調(diào)控研究
基因功能研究
遺傳多樣性分析
2. 醫(yī)學(xué)研究
腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)
遺傳疾病相關(guān)基因分析
病毒載量檢測(cè)和病原體定量
3. 藥物開發(fā)
藥物基因組學(xué)研究
個(gè)體化醫(yī)療相關(guān)基因研究
藥物代謝相關(guān)基因分型
4. 工業(yè)檢測(cè)
食品安全檢測(cè)中的病原體分析
環(huán)境樣本中的微生物檢測(cè)
七、總結(jié)
賽默飛LightCycler® 480 II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀憑借其高靈敏度,、多通道檢測(cè),、快速熱循環(huán)技術(shù)和強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析能力,成為分子生物學(xué)和基因組學(xué)研究中的重要工具,。它不僅能夠滿足基礎(chǔ)科研需求,,還在臨床和工業(yè)檢測(cè)領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。
無論是小規(guī)模實(shí)驗(yàn)還是大規(guī)模高通量篩查,,LightCycler® 480 II都能夠?yàn)橛脩籼峁┛煽康慕Y(jié)果和高效的實(shí)驗(yàn)體驗(yàn),,為基因研究和診斷提供全面的技術(shù)支持。