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賽默飛CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀文案介紹
一、產(chǎn)品特點(diǎn)
賽默飛CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是一款高效能的基因檢測(cè)平臺(tái),,擁有強(qiáng)大的檢測(cè)通量和靈敏度,,滿足不同領(lǐng)域的研究和檢測(cè)需求。其特點(diǎn)包括:
96孔板高通量設(shè)計(jì):一次實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛱幚?6個(gè)樣本,適合高通量篩選,、臨床診斷及大規(guī)?;虮磉_(dá)檢測(cè)。
五通道熒光檢測(cè)系統(tǒng):配備五個(gè)獨(dú)立熒光檢測(cè)通道,,允許用戶進(jìn)行多重PCR反應(yīng),,一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)基因,大大提升實(shí)驗(yàn)效率,。
快速升降溫技術(shù):采用精確的熱循環(huán)系統(tǒng),,溫控精度高,能夠顯著縮短PCR循環(huán)時(shí)間,,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性,。
實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)監(jiān)控與分析:配套的軟件可以進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光信號(hào)監(jiān)控,提供即時(shí)數(shù)據(jù)分析和結(jié)果可視化,,極大地方便了實(shí)驗(yàn)進(jìn)程中的決策,。
高度靈活的實(shí)驗(yàn)設(shè)置:支持靈活的程序編排,用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求自由設(shè)置溫度,、時(shí)間及循環(huán)參數(shù),,適用于不同類型的PCR實(shí)驗(yàn)。
二,、應(yīng)用領(lǐng)域
CFX96在多個(gè)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,,適應(yīng)不同的科研與臨床需求:
基因表達(dá)定量分析:可用于研究基因的相對(duì)或絕對(duì)表達(dá)水平,適用于功能基因研究及藥物研發(fā)中的靶點(diǎn)篩選,。
病原體檢測(cè):在臨床上廣泛用于病毒,、細(xì)菌等病原微生物的快速檢測(cè),包括新興傳染病的診斷及防控,。
SNP基因分型:能夠精確檢測(cè)單核苷酸多態(tài)性,,用于遺傳學(xué)研究和藥物基因組學(xué)中的個(gè)性化醫(yī)療方案開發(fā)。
基因突變分析:通過特異性引物和探針設(shè)計(jì),,可檢測(cè)基因突變點(diǎn),,尤其適合癌癥突變研究和遺傳病檢測(cè)。
食品與環(huán)境安全檢測(cè):適用于轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè),、環(huán)境樣本中的微生物監(jiān)控等領(lǐng)域。
三,、使用流程
樣本準(zhǔn)備:從生物樣本中提取DNA或RNA,,隨后進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄(如果是RNA樣品),以制備cDNA,。準(zhǔn)備好含有引物,、探針及熒光染料的PCR反應(yīng)混合物。
樣本加載:將PCR反應(yīng)混合物分裝至96孔板中,密封光學(xué)封板以避免污染,。
實(shí)驗(yàn)設(shè)置:在CFX96的控制軟件中設(shè)置好PCR反應(yīng)條件,,包括變性、退火,、延伸等步驟的時(shí)間和溫度,。選擇合適的熒光檢測(cè)通道。
實(shí)驗(yàn)運(yùn)行與監(jiān)控:?jiǎn)?dòng)儀器,,系統(tǒng)會(huì)實(shí)時(shí)監(jiān)控?zé)晒庑盘?hào)的變化,,用戶可以隨時(shí)查看擴(kuò)增曲線和Ct值。
結(jié)果分析與導(dǎo)出:實(shí)驗(yàn)完成后,,利用軟件自動(dòng)生成標(biāo)準(zhǔn)曲線和Ct值報(bào)告,,分析基因表達(dá)或病原體載量。
四,、貨號(hào)
賽默飛CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的標(biāo)準(zhǔn)貨號(hào)為1855195,。用戶在采購時(shí)需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇適合的配置,并確認(rèn)具體貨號(hào),。
五,、工作原理
賽默飛CFX96的核心工作原理是基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)。每個(gè)PCR反應(yīng)循環(huán)中,,模板DNA經(jīng)歷變性,、退火和延伸三個(gè)步驟,DNA的擴(kuò)增伴隨著熒光染料的結(jié)合,。熒光信號(hào)在每個(gè)循環(huán)中逐漸增強(qiáng),,儀器通過內(nèi)置的光電檢測(cè)器實(shí)時(shí)捕捉熒光信號(hào),生成擴(kuò)增曲線并確定Ct值(Cycle threshold),。Ct值越低,,說明樣品中靶標(biāo)基因的初始濃度越高。通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,,能夠定量分析樣本中的DNA或RNA濃度,。
六、使用攻略
引物與探針設(shè)計(jì):確保引物和探針的設(shè)計(jì)特異性高,、退火溫度匹配,,避免非特異性擴(kuò)增,提升實(shí)驗(yàn)可靠性,。
反應(yīng)體系優(yōu)化:針對(duì)不同實(shí)驗(yàn)體系,,優(yōu)化Mg2+、dNTPs,、Taq酶等反應(yīng)物的濃度,,確保最佳擴(kuò)增效率,。
標(biāo)準(zhǔn)曲線構(gòu)建:使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保實(shí)驗(yàn)定量分析的準(zhǔn)確性,。
防止交叉污染:確保實(shí)驗(yàn)操作在無菌條件下進(jìn)行,,特別是在樣本裝載和光學(xué)封板步驟,避免氣溶膠污染,。
數(shù)據(jù)分析與結(jié)果驗(yàn)證:實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的變化,,分析結(jié)果時(shí)注意樣本中的背景熒光干擾,必要時(shí)使用多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)確保數(shù)據(jù)可靠性,。
七,、技術(shù)參數(shù)與效果
檢測(cè)通量:一次最多可處理96個(gè)樣本,適合大規(guī)模實(shí)驗(yàn)和高通量分析,。
熒光檢測(cè)通道:五通道光學(xué)系統(tǒng),,能夠同時(shí)監(jiān)測(cè)多種熒光信號(hào),用于多重PCR實(shí)驗(yàn)中的靶標(biāo)基因檢測(cè),。
靈敏度:檢測(cè)靈敏度高,,可檢測(cè)單拷貝水平的DNA或RNA樣本,適合低豐度基因檢測(cè)需求,。
動(dòng)態(tài)范圍:寬廣的線性動(dòng)態(tài)范圍,,通常在10^1至10^9拷貝之間,保證了基因表達(dá)的高精度定量,。
溫控性能:CFX96的溫控系統(tǒng)精度為±0.2℃,,并具有良好的孔間溫度均一性,確保所有樣本的反應(yīng)一致性,。
擴(kuò)增速度:通過快速循環(huán)技術(shù),,可以在較短時(shí)間內(nèi)完成一次完整的PCR實(shí)驗(yàn),提升實(shí)驗(yàn)室的工作效率,。
賽默飛CFX96實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀憑借其高精度,、快速、靈活的實(shí)驗(yàn)操作能力,,成為生命科學(xué)研究,、醫(yī)學(xué)檢測(cè)和基因組學(xué)研究中的工具。其多通道檢測(cè),、高靈敏度與數(shù)據(jù)自動(dòng)化分析功能,,為科研工作者提供了理想的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),助力科研與臨床的快速發(fā)展,。