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Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%),,含酚紅 是一種高效的細(xì)胞解離溶液,專為體外培養(yǎng)的哺乳動物貼壁細(xì)胞設(shè)計,。該產(chǎn)品結(jié)合了胰蛋白酶的蛋白水解功能與EDTA的螯合作用,,能夠有效地解離細(xì)胞,使其從培養(yǎng)基底分離,同時保持細(xì)胞的活性和完整性,。酚紅指示劑的加入幫助監(jiān)測溶液的pH變化,,確保細(xì)胞在最佳條件下操作。此產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于細(xì)胞傳代,、單細(xì)胞懸液制備,、細(xì)胞分離以及組織消化等實驗中,。
一,、產(chǎn)品特點
1. 高效細(xì)胞解離:
胰蛋白酶是一種從豬胰臟中提取的蛋白水解酶,能夠有效切割細(xì)胞與培養(yǎng)容器表面之間的蛋白質(zhì)連接,,使貼壁細(xì)胞快速,、溫和地從基底上脫離。此高效解離作用確保了細(xì)胞傳代和單細(xì)胞懸液制備的快速和高效完成,。
2. EDTA 的螯合作用:
EDTA(乙二胺四乙酸)是一種螯合劑,,能夠螯合培養(yǎng)基中的二價陽離子(如Ca2?和Mg2?),進(jìn)一步降低細(xì)胞間和細(xì)胞與培養(yǎng)基底之間的黏附力,。這種作用使得細(xì)胞解離更加溫和,,減少了對細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)的損傷,特別適用于對細(xì)胞表面抗原敏感的實驗,。
3. 含酚紅的pH指示劑:
酚紅是一種常用的pH指示劑,,能夠隨著溶液pH的變化而改變顏色。Gibco 胰蛋白酶-EDTA 溶液中含有酚紅,,研究人員可以通過顏色變化直觀地監(jiān)測操作過程中溶液的pH,,確保細(xì)胞在適宜的pH范圍內(nèi)操作,從而減少細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)和損傷,。
4. 即用型液體溶液:
Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 為即用型液體溶液,,使用方便,無需進(jìn)一步配制,。研究人員只需將其直接應(yīng)用于細(xì)胞解離操作,,大大簡化了實驗流程,節(jié)省了時間并減少了潛在的誤差,。
二,、應(yīng)用領(lǐng)域
1. 細(xì)胞傳代:
胰蛋白酶-EDTA 溶液是貼壁細(xì)胞傳代過程中工具。通過將其應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)基底,,可以迅速將貼壁細(xì)胞從培養(yǎng)基底上解離,,并保持細(xì)胞的完整性和活力。此方法被廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物細(xì)胞的傳代操作,,如腫瘤細(xì)胞,、干細(xì)胞和原代細(xì)胞的培養(yǎng)。
2. 單細(xì)胞懸液制備:
在細(xì)胞生物學(xué)研究中,,制備單細(xì)胞懸液是一個重要步驟,,尤其是在流式細(xì)胞術(shù)和細(xì)胞分選實驗中。Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 可以高效地將貼壁細(xì)胞解離為單個細(xì)胞,,便于后續(xù)的細(xì)胞分析和處理,。
3. 細(xì)胞分離和純化:
胰蛋白酶-EDTA 溶液在細(xì)胞分離和純化實驗中也發(fā)揮著關(guān)鍵作用。它提供溫和的細(xì)胞解離條件,,確保細(xì)胞的高存活率和功能完整性,,特別是在涉及細(xì)胞表面抗原檢測的實驗中,其溫和的作用機(jī)制減少了抗原的降解,。
4. 組織消化和細(xì)胞分離:
該溶液還可以用于小塊組織的消化,,從組織樣品中分離出單個細(xì)胞,用于進(jìn)一步的研究和分析,。這在組織工程,、干細(xì)胞研究和細(xì)胞治療等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用。
三,、使用指南
1. 使用方式:
Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 為即用型液體溶液,,常用于細(xì)胞傳代和解離。使用時,,將培養(yǎng)基移除,,加入適量的胰蛋白酶-EDTA 溶液覆蓋細(xì)胞單層。在37°C培養(yǎng)箱中孵育,,觀察細(xì)胞形態(tài)變化,,通常幾分鐘內(nèi)細(xì)胞會變圓并從基底上脫落。隨后,,加入含血清的培養(yǎng)基中和酶作用,,以保護(hù)細(xì)胞免受過度解離的影響,。接著,,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中進(jìn)行后續(xù)處理,如離心,、重新接種等。
2. 儲存條件:
胰蛋白酶-EDTA 溶液應(yīng)儲存在2-8°C的冰箱中,,避免凍存和反復(fù)凍融,,以保持其活性和穩(wěn)定性。開封后應(yīng)盡快使用,,并確保瓶口密閉,,以防止污染。
3. 注意事項:
在使用胰蛋白酶-EDTA 溶液時,,應(yīng)確保細(xì)胞解離的時間和溫度適當(dāng),以避免過度解離造成細(xì)胞損傷,。建議在無菌條件下操作,,以避免溶液污染。不同細(xì)胞類型可能需要調(diào)整孵育時間,,以獲得最佳解離效果。
四,、產(chǎn)品優(yōu)勢
1. 溫和高效的細(xì)胞解離:
Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 結(jié)合了胰蛋白酶的高效蛋白水解功能和EDTA的溫和螯合作用,,提供了有效而溫和的細(xì)胞解離條件,,特別適合需要保護(hù)細(xì)胞表面抗原的實驗。
2. 含酚紅指示劑,,易于監(jiān)控:
酚紅指示劑的存在使得研究人員能夠直觀地監(jiān)測溶液的pH變化,,確保細(xì)胞在最適宜的pH環(huán)境下操作,從而提高細(xì)胞的存活率和實驗成功率,。
3. 即用型設(shè)計,,操作簡便:
即用型液體溶液設(shè)計簡化了實驗操作,研究人員無需進(jìn)行額外配制,,直接使用,,適合日常細(xì)胞傳代和單細(xì)胞懸液制備。
4. 適用范圍廣泛:
無論是常規(guī)的細(xì)胞傳代,、單細(xì)胞懸液的制備,,還是更復(fù)雜的細(xì)胞分離和組織消化實驗,Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%) 都能夠提供穩(wěn)定的性能和可靠的實驗結(jié)果,。
五,、總結(jié)
Gibco 胰蛋白酶-EDTA (0.25%),含酚紅(100 mL,,貨號:25200056)是一款專為細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計的高效細(xì)胞解離溶液,結(jié)合了胰蛋白酶和EDTA的優(yōu)點,,為細(xì)胞傳代,、單細(xì)胞懸液制備以及細(xì)胞分離提供了溫和且有效的解離條件。其無血清,、成分確定的配方減少了實驗中的變異性,,提供了高度一致和可重復(fù)的結(jié)果,。作為一種即用型液體溶液,Gibco 胰蛋白酶-EDTA 操作簡便,,適合多種細(xì)胞類型的培養(yǎng)需求,,是細(xì)胞生物學(xué)研究中的工具。