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在現(xiàn)代生物科學和生物技術(shù)領(lǐng)域,移液器在實驗室中的重要性不言而喻,。移液器幾乎出現(xiàn)在每一個實驗環(huán)節(jié)中,,從樣品處理到檢測分析,其精準性對科研成果至關(guān)重要,。移液器的準確性直接影響實驗數(shù)據(jù)的可靠性和重現(xiàn)性,,因此在科學研究中占據(jù)了核心地位。本文將詳細介紹移液器的發(fā)展歷史,、分類,、工作原理及其在特殊應(yīng)用中的優(yōu)勢,旨在幫助研究人員更好地理解和使用這一重要工具,。
移液器的發(fā)展歷史
移液器的發(fā)展始于1958年,,當時Heinrich Schnitger先生獲得了一項名為“快速準確移取微量體積液體的移液器"。Eppendorf公司基于這一發(fā)明,,于1961年推出了第一支工業(yè)化的氣體活塞式移液器,。這一創(chuàng)新改變了當時依靠嘴吸取液體的方式。Eppendorf的第一款移液器具備彈性吸嘴和可拆卸的塑料吸頭,,與現(xiàn)代實驗室使用的移液器非常相似,。
自1961年推出第一款“Marburg移液器"后,Eppendorf公司不斷改進和發(fā)展活塞沖程移液器,,推出了多種類型和功能的移液器,,以滿足不同實驗需求。
移液器的分類及工作原理
移液器按工作原理可分為氣體活塞式移液器和外置活塞式移液器,。
氣體活塞式移液器 (Air-cushion)
氣體活塞式移液器通過彈簧的伸縮運動,,推動活塞排除部分空氣,再利用大氣壓吸入液體,,最后由活塞推動空氣將液體排出,。液體和活塞之間有空氣柱。這種設(shè)計適用于常規(guī)水性溶液,,廣泛應(yīng)用于大多數(shù)生物實驗中,。
這種類型的移液器的工作步驟如下:
吸液:按下活塞按鈕,活塞向上移動,,形成負壓,,吸入液體。
放液:松開活塞按鈕,,活塞向下移動,,推動空氣,將液體排出,。
氣體活塞式移液器的優(yōu)點在于其結(jié)構(gòu)簡單,、操作便捷,適合大多數(shù)常規(guī)實驗。
外置活塞式移液器 (Positive-displacement)
外置活塞式移液器的原理是通過分液管或吸頭內(nèi)活塞的連續(xù)運動移取和打出液體,。由于活塞與液體直接接觸,,沒有空氣柱,因此適用于高粘度,、易揮發(fā),、易起泡等特殊液體。
這種類型的移液器的工作步驟如下:
吸液:活塞與液體直接接觸,,形成負壓,,吸入液體。
放液:活塞向下移動,,直接推動液體排出,。
外置活塞式移液器的優(yōu)點在于其高精度和適用范圍廣,特別適合處理難以操作的液體,,如高粘度或易揮發(fā)的化學試劑,。
單按鈕技術(shù)
單按鈕技術(shù)是一種創(chuàng)新設(shè)計,通過一個按鈕即可完成吸液,、放液和脫卸吸頭的操作,。這種設(shè)計有效避免了液體反彈,減少了氣溶膠污染,,同時減少了拇指的左右移動,,降低了手部的重復性勞損。Eppendorf Reference系列移液器就是采用單按鈕操作的手動移液器,。
單按鈕技術(shù)的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在以下幾個方面:
簡化操作:吸液,、放液和脫卸吸頭一步到位,提高實驗效率,。
減少污染:有效防止液體反彈,,減少氣溶膠污染。
降低疲勞:減少手部重復性操作,,降低手部勞損風險,。
特殊應(yīng)用的移液器
384孔板的快速加樣 - 16/24通道移液器
在高通量篩選實驗中,384孔板的加樣操作非常普遍,。Eppendorf的16/24通道移液器和epT.I.P.S.® 384吸頭可以一步完成16孔和24孔的加樣操作,,大大提高了實驗效率和安全性。
這種設(shè)計的優(yōu)勢在于:
高效加樣:一次操作即可完成多個孔的加樣,,適合高通量實驗,。
減少誤差:避免了使用8/12通道移液器帶來的冗長和容易出錯的加樣過程。
簡化流程:手動完成工作站體系建立及驗證工作,,可作為工作站的備份方案。
不同容器類型之間的樣品轉(zhuǎn)移 - Move It可調(diào)間距移液器
Move It可調(diào)間距移液器是一種創(chuàng)新設(shè)計,可以加速和簡化不同容器間的樣品轉(zhuǎn)移,。其無管道鏈接的設(shè)計提高了精確度和耐用性,,同時也增加了操作和樣品的安全性。
這種移液器的應(yīng)用場景包括:
PCR和qPCR:在分子生物學中,,常用于基因表達,、基因編輯的實驗。
免疫學實驗:適用于抗體分析,、ELISA實驗等,。
細胞培養(yǎng):用于細胞篩選、細胞增殖,、包被及基于細胞的分析,。
電動移液器和分液器
電動移液器和分液器在處理冗長連續(xù)分液、放射性或腐蝕性液體的分液,、易揮發(fā)或黏稠液體的精準移液等方面具有顯著優(yōu)勢,。例如,Eppendorf Xplorer和Xplorer plus電動移液器,,以及Multipette E3/E3x電動分液器,,都能大幅減少隨機誤差和系統(tǒng)誤差,提高實驗結(jié)果的可重復性和準確性,。
這些電動移液器的主要特點包括:
自動化操作:減少人為誤差,,提高操作精度。
多功能模式:適用于不同類型的液體分液需求,。
高效便捷:適合大規(guī)模實驗,,提高實驗通量。
如何正確使用移液器,?
正確使用移液器不僅可以提高實驗的準確性和重現(xiàn)性,,還能延長移液器的使用壽命。以下是一些使用移液器的建議和技巧:
挑選合適的吸頭:吸頭和移液器同等重要,,只有使用高質(zhì)量的吸頭才能體現(xiàn)移液器的精確性,。推薦使用廠家原裝吸頭。
選擇適合量程的移液器:移液器最大量程的30%-100%是較佳使用范圍,。
裝配吸頭:將移液器吸嘴垂直插入吸頭,,輕壓上緊,切勿上下敲擊或左右搖晃,,以免損壞移液器內(nèi)部零件,。
調(diào)節(jié)刻度:旋轉(zhuǎn)刻度調(diào)節(jié)旋鈕,從大量程調(diào)節(jié)至小量程,,精度更佳,;從小量程調(diào)節(jié)至大量程時,,最好先調(diào)至略大一點,再返回,。
吸取液體:
保證垂直吸液,,根據(jù)流體靜力壓原理,移液器斜著吸液將使體積偏大,。
吸頭盡量浸沒得淺一些,,防止液體殘留在吸頭表面;但同時要浸沒得足夠深,,防止吸取空氣,。
至少預潤濕3次,使得空氣柱充滿飽和的液體分子(特別是在移取易揮發(fā)性液體時),。
吸,、放液體應(yīng)該緩慢、勻速,,以提高移液精準性,。推薦使用電動移液器,電動馬達驅(qū)動,,減少人為誤差,,提供精準度。
吸取液體后稍稍停留一會兒(特別是對于大量程移液器),。
打出液體:放液時吸頭靠在容器內(nèi)壁(特別是對于20 μL以下的體積),,移液器角度為20°-45°。對于10 μL以下的體積,,直接放液到容器底部,。
結(jié)論
移液器作為現(xiàn)代生物科學和生物技術(shù)實驗室中的工具,其準確性和可靠性直接影響實驗數(shù)據(jù)的質(zhì)量,。通過了解移液器的發(fā)展歷史,、分類、工作原理及其在特殊應(yīng)用中的優(yōu)勢,,研究人員可以更好地選擇和使用移液器,,從而提高實驗效率和數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性。正確使用移液器不僅可以提高實驗結(jié)果的準確性,,還能延長移液器的使用壽命,。關(guān)注Eppendorf,獲取更多關(guān)于移液器使用的技巧和最新資訊,。