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移液器原理,、使用,、維護(hù)、校準(zhǔn)鑒定
這些微量加樣器的吸液范圍在1—1000~1之間,,適用 于臨床常規(guī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室使用,。微量加樣器發(fā)展到今天,不但加樣更為精確,,而且品種也多種多樣,,如微量分配器、多通道微量加樣器等,,其加樣的物理學(xué)原理有下面兩種:
①使用空氣墊(又稱活塞沖程)加樣,;
②使用無空氣墊的活塞正移動(dòng)(positive displacement)加樣,。
上述兩種不同原理的微量加樣器有其不同的特定應(yīng)用范圍。
一,、空氣墊加樣器活塞沖程(空氣墊)加樣器可很方便地用于固定或可調(diào)體積液體的加樣,,加樣體積的范圍在小于1ul至l0ml之間。加樣器中的空氣墊的作用是將吸于塑料吸頭內(nèi)的液體樣本與加樣器內(nèi)的活塞分隔開來,,空氣墊通過加樣器活塞的彈簧樣運(yùn)動(dòng)而移動(dòng),,進(jìn)而帶動(dòng)吸頭中的液體,死體積和移液吸頭中高度的增加決定了加樣中這種空氣墊的膨脹程度,。
因此,,活塞移動(dòng)的體積必須比所希望吸取的體積要大約2%~4%,溫度,、氣壓和空氣濕度的影響必須通過對空氣墊加樣器進(jìn)行結(jié)構(gòu)上的改良而降低,,使得在正常情況下不至于影響加樣的準(zhǔn)確度。
一次性吸頭是本加樣系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分,,其形狀,、材料特性及與加樣器的吻合程度均對加樣的準(zhǔn)確度有很大的影響。
二,、活塞正移動(dòng)加樣器以活塞正移動(dòng)為原理的加樣器和分配器與空氣墊加樣器所受物理因素的影響不同,。
因此,在空氣墊加樣器難以應(yīng)用的情況下,,活塞正移動(dòng)加樣器可以應(yīng)用,,如具有高蒸汽壓的、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm3的液體,;又如在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測定中,,為防止氣溶膠的產(chǎn)生,最好使用活塞正移動(dòng)加樣器,。
活塞正移動(dòng)加樣器的吸頭與空氣墊加樣器吸頭有所不同,,其內(nèi)含一個(gè)可與加樣器的活塞耦合的活塞,這種吸頭一般由生產(chǎn)活塞正移動(dòng)加樣器的廠家配套生產(chǎn),,不能使用通常的吸頭或不同廠家的吸頭,。
三、多通道加樣器,、電子加樣器和分配器多通道加樣器,、電子加樣器和分配器的原理與上述相同。多通道加樣器通常為8通道或12通道,,與8X12=96孔微孔板一致,。
多通道加樣器的使用不但可減少實(shí)驗(yàn)操作人員的加樣操作次數(shù),而且可提高加樣的精密度,。電子加樣器和分配器為半自動(dòng)加樣系統(tǒng),,電子加樣器最大的優(yōu)點(diǎn)是其具有很高的加樣重復(fù)性,,應(yīng)用范圍廣。
第二部分:移液器的使用規(guī)范以及注意事項(xiàng)
1.使用合適的吸頭:
為確保更好的準(zhǔn)確性和精度,,建議移液量在吸頭的35%-100%量程范圍內(nèi),。
2.設(shè)定移液體積
從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度即可
從小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí),,應(yīng)先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度,,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證移液器的精確度
3.吸頭的安裝:
對于大多數(shù)品牌的移液器,,特別是多道移液器,,安裝吸頭并非易事:為追求良好的密封性,將移液器垂直插入吸頭,,左右旋轉(zhuǎn)半圈,,上緊即可。也有人會(huì)用移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊,,但這樣操作會(huì)導(dǎo)致吸頭變形而影響精度,,嚴(yán)重的則會(huì)損壞移液器,所以應(yīng)當(dāng)避免出現(xiàn)這樣的操作,。有的多道移液器設(shè)有O型環(huán),,配合有前擋點(diǎn)的吸頭,只需輕壓一下即可達(dá)致理想密封,。
4.吸頭浸入角度和深度:
吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內(nèi),,保持豎直為佳;吸頭浸入深度建議如下所示:
5.吸頭潤洗:
對常溫樣品,,吸頭潤洗有助于提高準(zhǔn)確性,;但是對于高溫或低溫樣品,吸頭潤洗反而降低操作準(zhǔn)確性,,請使用者特別注意,。
6.吸液速度:
移液操作應(yīng)保持平順、合適的吸液速度,;過快的吸液速度容易造成樣品進(jìn)入套柄,,帶來活塞和密封圈的損傷以及樣品的交叉污染。
7.移液器的放置
吸有液體的移液器不應(yīng)平放,,吸頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可能導(dǎo)致槍的彈簧生銹
8.移液器在每次實(shí)驗(yàn)后應(yīng)將刻度調(diào)至最大,,讓彈簧回復(fù)原型以延長移液器的使用壽命
9.為獲得較高的精度,,吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,,然后再正式移液,因?yàn)槲⊙宓鞍踪|(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時(shí),,吸頭內(nèi)壁會(huì)殘留一層"液膜",,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差,。
10..濃度和粘度大的液體,會(huì)產(chǎn)生誤差,,為消除其誤差的補(bǔ)償量,,可由試驗(yàn)確定,補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進(jìn)行設(shè)定。
11.移液器嚴(yán)禁吸取有強(qiáng)揮發(fā)性,、強(qiáng)腐蝕性的液體
12.不要用大量程的移液器移取小體積的液體,,以免影響準(zhǔn)確度,。同時(shí),,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,,請使用移液管進(jìn)行操作
移液器(移液器)使用建議:1,、移液時(shí)保持正確的姿勢;不要時(shí)
刻緊握移液器,,使用帶指鉤的移液器幫助緩解手部疲勞,;有可能的話經(jīng)常換手操作,。
2,、定期檢查移液器的密封狀況,,一旦發(fā)現(xiàn)密封老化或出現(xiàn)漏液,須及時(shí)更換密封圈,。
3、每年對移液器進(jìn)行1-2次檢驗(yàn)(視使用頻率而定)。
4,、絕大多數(shù)移液器,在使用前和使用一段時(shí)間后,,要給活塞涂上一層潤滑油以保持密封性,;
移液器的日常維護(hù)與維修移液器的清潔
定期清洗移液器,可以用肥皂水、60 %異丙醇,、70%乙醇等非腐蝕性洗滌劑,,再用蒸餾水清洗,,自然晾干。高溫消毒之前,,要確保移液器能適應(yīng)高溫,。
注意事項(xiàng)在吸取液體時(shí)不宜急速彈回,在吸取高粘度的液體時(shí)操作需更加如此,,吸液前應(yīng)檢查管嘴內(nèi)有無異物;新裝的管嘴先吸入液體再排空,,如此2-3次后再進(jìn)行試驗(yàn)操作,。移液器使用溫度與校準(zhǔn)相差很大的時(shí)候,移液器需另行校準(zhǔn),。
1,、前進(jìn)法在潔凈的試劑容器中注入待轉(zhuǎn)移的溶液
A,、將按鈕壓至第一停點(diǎn)位置
B、將移液器管嘴置于液面一下1cm深度并慢慢松開按鈕,,待管嘴吸入液體后,,將管嘴撤出液面并協(xié)貼在試劑瓶壁上淌走多余的液體
C、輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn),,約1秒后繼續(xù)將操作按鈕向下壓至此操作第二停點(diǎn),,此操作作用是排盡管嘴內(nèi)的溶液
D、松開按扭使之返回起點(diǎn)位置
2,、倒退法在潔凈的試劑容器中注入待轉(zhuǎn)移的溶液
A,、將按鈕壓至第二停點(diǎn)位置
B、將移液器管嘴置于液面一下1cm深度并慢慢松開按鈕,,待管嘴吸入液體后,將管嘴撤出液面并協(xié)貼在試劑瓶壁上淌走多余的液體
C,、輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn),,放出預(yù)設(shè)定的液體。將操作按鈕保持在第一停點(diǎn)位置,,使少量不包括移液量范圍的液體依然留在管嘴內(nèi)
D,、剩余在管嘴內(nèi)的液體隨管嘴一起廢棄或者移至原容器中,。
外觀要求
移液器塑料件外殼表而應(yīng)平榷,、光滑,,不得有明顯的縮痕,、廢邊,、裂紋、氣泡和變形等現(xiàn)象;金屬件表面鍍層應(yīng)無脫落,、銹蝕和起層,。
移液器主體應(yīng)具有下列標(biāo)記:產(chǎn)品名稱,、制造廠或商標(biāo),、標(biāo)稱容量(ul或ml),、型號(hào)規(guī)格,、出廠編號(hào),。
活塞
按動(dòng)移液器的活塞時(shí),,上,、下移動(dòng)應(yīng)靈活,,分擋界限明顯,。
調(diào)節(jié)器
移液器的顯示窗在容址調(diào)節(jié)動(dòng)作時(shí),應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)靈活,,數(shù)字指示清晰,、完整。
吸頭
吸頭應(yīng)采用聚丙烯材料制成,。
吸頭不得有明顯的彎曲現(xiàn)象,。內(nèi)壁應(yīng)光潔、平滑,,排液后不得有殘留液體存在,。
不同規(guī)格型號(hào)的移液器應(yīng)采用相應(yīng)配套的吸頭。
檢定介質(zhì)
檢定介質(zhì)應(yīng)符合GB 6682-1992《分析實(shí)驗(yàn)用水規(guī)格和試驗(yàn)方》要求的蒸餾水或去離子水,,并提前24 h放人實(shí)驗(yàn)室內(nèi),,使其溫度與室溫溫差不得大于2度。
被檢移液器應(yīng)在檢定前4h放入實(shí)驗(yàn)室內(nèi)或等條件空間,。
第五部分: 移液器的校準(zhǔn)
采用衡量法對移液器進(jìn)行檢定,。
1、檢定前的準(zhǔn)備
所選用的管嘴應(yīng)與被檢移液器的吸引桿配套,。在移液器的吸引桿的下端,,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)管嘴,以保證移液器的密封性,,并在完成幾次吸液,、排液過程中應(yīng)沒有掛水現(xiàn)象。
多頭型移液器的進(jìn)行單孔分別檢測
2,、檢定步驟
(1)將稱量杯放人電子天平中,,待天平顯示穩(wěn)定后,按下操縱桿使電子天平復(fù)零,。
(2)將移液器的容量調(diào)到被檢點(diǎn),。
(3)垂直握住移液器,將按鈕按到第一檔位,,此時(shí)將管嘴浸入裝有蒸餾水的容器內(nèi),,并保持在液面下2mm到3mm處,緩慢放松按鈕,,等待1到3s后離開液面,,擦干管嘴外的液體(此時(shí)不能碰到流液口,以免管嘴內(nèi)的液體帶出,。)
(4)從電子天平中取出稱量杯,,將吸頭流液口靠在稱量杯內(nèi)壁并成45°,,緩慢的將按鈕壓到第一停止點(diǎn),等待1到3秒,,將按鈕按到底部,,然后將吸頭沿著稱量杯的內(nèi)壁向上移開。
(5)將稱量杯放入天平秤盤,,記錄此時(shí)天平顯示出的數(shù)值,,同時(shí)記錄下此時(shí)容器內(nèi)蒸餾水的溫度。
(6)重復(fù)以上十次次以上,,并填寫《微量移液器校準(zhǔn)表》
檢定應(yīng)包括兩個(gè)量程,,第一個(gè)為最大量程,第二個(gè)量程為最大量程的10%或最小量程
3,,移液器容量小范圍調(diào)整方法
容量不足的時(shí)用校準(zhǔn)工具順時(shí)針旋轉(zhuǎn)螺母可增加容量
容量過大時(shí)用校準(zhǔn)工具逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)螺母可減少容量